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序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
61 一种检测稻瘟病菌无毒基因AvrPi9致病性变异的引物组、试剂盒及方法 CN202110101239.8 2021-01-25 CN112662804A 2021-04-16 寇艳君; 邱结华; 沈浙南; 时焕斌
本发明公开了一种检测稻瘟病菌无毒基因AvrPi9致病性变异的引物组、试剂盒及方法。稻瘟病菌无毒基因AvrPi9发生SNP变化导致AvrPi9基因编码提前终止、转变为有毒基因。所述引物组包括两对引物,第一对引物用于扩增出AvrPi9基因片段;第二对引物用于鉴别是否含有突变后导致AvrPi9转变为有毒基因的SNP。本发明提供了两对稻瘟病菌无毒基因AvrPi9的分子标记,利用所述分子标记可以快速建立稻瘟病菌自然群体中AvrPi9致病性变异的分子检测体系,了解和把握所述基因在田间自然群体中的分布及其动态变化规律,以此来指导各个地区水稻稻瘟病抗病育种以及品种合理布局和轮换,以便提高育种效率,更有效地控制稻瘟病的发生,以此来设计稻瘟病综合防治的新策略。
62 一种检测稻瘟病菌无毒基因AvrPi9致病性变异的引物组、试剂盒及方法 CN202110101239.8 2021-01-25 CN112662804B 2022-05-10 寇艳君; 邱结华; 沈浙南; 时焕斌
本发明公开了一种检测稻瘟病菌无毒基因AvrPi9致病性变异的引物组、试剂盒及方法。稻瘟病菌无毒基因AvrPi9发生SNP变化导致AvrPi9基因编码提前终止、转变为有毒基因。所述引物组包括两对引物,第一对引物用于扩增出AvrPi9基因片段;第二对引物用于鉴别是否含有突变后导致AvrPi9转变为有毒基因的SNP。本发明提供了两对稻瘟病菌无毒基因AvrPi9的分子标记,利用所述分子标记可以快速建立稻瘟病菌自然群体中AvrPi9致病性变异的分子检测体系,了解和把握所述基因在田间自然群体中的分布及其动态变化规律,以此来指导各个地区水稻稻瘟病抗病育种以及品种合理布局和轮换,以便提高育种效率,更有效地控制稻瘟病的发生,以此来设计稻瘟病综合防治的新策略。
63 利用抗病基因识别无毒效应蛋白以鉴定具有分泌功能信号肽的方法 CN201810055476.3 2018-01-19 CN108359689A 2018-08-03 阴伟晓; 罗朝喜; 谢松霖; 林杨; 田振东
本发明提供了一种利用抗病基因识别无毒效应蛋白以鉴定具有分泌功能信号肽的方法,包括以下步骤:(1)将待鉴定信号肽连接致病疫霉无毒效应蛋白Avr3a的C端构建表达载体,所述致病疫霉无毒效应蛋白Avr3a的C端氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;(2)将步骤(1)构建的表达载体转化感受态细胞;(3)将步骤(2)的感受态细胞和含有抗病基因的感受态细胞共同注射入植物细胞中,观察注射位点坏死情况,若注射位点坏死,则待检测信号肽不具有分泌功能,若注射位点无坏死,则待检测信号肽具有分泌功能。
64 用于测定大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83-570致病性的分子方法 CN201610143784.2 2016-03-14 CN105671173A 2016-06-15 崔林开; 胡艳红; 周洲; 李永丽; 郑伟
本发明涉及用于测定大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83-570致病性的分子方法,提取待检测大豆疫霉菌的基因组DNA;PCR扩增出包括完整无毒基因Avr3a的DNA片段;用限制性内切酶BmgBI酶切扩增出的DNA片段;对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳图在250bp-500bp范围内有2条DNA条带,则对应的待检测大豆疫霉菌菌株对鉴别寄主L83-570表现为不致病,酶切后在750bp以下有1条DNA条带,则对应的待检测大豆疫霉菌菌株对鉴别寄主L83-570表现为致病。该方法测定周期短、无中间类型,可同时测定多株大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83-570的致病性。
65 用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物及其检测方法和应用 CN202110577126.5 2021-05-26 CN113151571A 2021-07-23 闫红飞; 赵娜; 孟庆芳; 李令蕊; 刘贺; 张文朝; 杨军玉; 郝晓宇; 房小力
本发明涉及基因检测技术领域,具体公开一种用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物及其检测方法和应用。所述引物的碱基序列为:上游引物E4‑F:5′‑TCCAAGACTCGAATTGGCTC‑3′;下游引物E4‑R:5′‑CGTCGTCAACGAAGGCAT‑3′。本发明提供的用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物可以在对TcLr1有毒的叶锈菌基因组中特异性的扩增出120bp的条带,且扩增的稳定性好,可以作为鉴别小麦叶锈菌对TcLr1有毒/无毒的特异性分子标记,对小麦叶锈菌毒性/无毒基因的定位与克隆、小种的抗性鉴定与结构分析、揭示小种变异规律等研究都具有重要意义。
66 用于测定大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83-570致病性的分子方法 CN201610143784.2 2016-03-14 CN105671173B 2019-04-05 崔林开; 胡艳红; 周洲; 李永丽; 郑伟
本发明涉及用于测定大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83‑570致病性的分子方法,提取待检测大豆疫霉菌的基因组DNA;PCR扩增出包括完整无毒基因Avr3a的DNA片段;用限制性内切酶BmgBI酶切扩增出的DNA片段;对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳图在250bp‑500bp范围内有2条DNA条带,则对应的待检测大豆疫霉菌菌株对鉴别寄主L83‑570表现为不致病,酶切后在750bp以下有1条DNA条带,则对应的待检测大豆疫霉菌菌株对鉴别寄主L83‑570表现为致病。该方法测定周期短、无中间类型,可同时测定多株大豆疫霉菌无毒基因Avr3a对鉴别寄主L83‑570的致病性。
67 用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物及其检测方法和应用 CN202110577126.5 2021-05-26 CN113151571B 2022-10-28 闫红飞; 赵娜; 孟庆芳; 李令蕊; 刘贺; 张文朝; 杨军玉; 郝晓宇; 房小力
本发明涉及基因检测技术领域,具体公开一种用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物及其检测方法和应用。所述引物的碱基序列为:上游引物E4‑F:5′‑TCCAAGACTCGAATTGGCTC‑3′;下游引物E4‑R:5′‑CGTCGTCAACGAAGGCAT‑3′。本发明提供的用于检测小麦叶锈菌无毒基因AvrLr1分子标记的引物可以在对TcLr1有毒的叶锈菌基因组中特异性的扩增出120bp的条带,且扩增的稳定性好,可以作为鉴别小麦叶锈菌对TcLr1有毒/无毒的特异性分子标记,对小麦叶锈菌毒性/无毒基因的定位与克隆、小种的抗性鉴定与结构分析、揭示小种变异规律等研究都具有重要意义。
68 一种用于快速无毒提取动植物或微生物基因组DNA的细胞裂解液、试剂盒和方法 CN202011179724.9 2020-10-29 CN114426966A 2022-05-03 陈新龙; 尚丽娜; 何光华
本发明公开了一种用于快速无毒提取动植物或微生物基因组DNA的细胞裂解液,由以下组分组成:10~300mM pH为7.5~9.0的Tris‑HCl、1~2mM pH为8.0~8.5的Na2EDTA、0.01%~0.1%(w/v)的LDS、0.01%~0.1%(v/v)的Tween‑20、pH为7.0~8.5的纯水;本发明还提供了利用上述细胞裂解液快速无毒提取动植物或微生物基因组DNA的方法,该方法突破了国内外现有基因组DNA提取的时间限制,在15s内即可完成基因组DNA的提取,利用该方法获得的基因组DNA完整性好、PCR重复性高、兼容多种DNA聚合酶,可直接用于基因鉴定、基因克隆等多种下游分子生物学实验。
69 Automated gene-targeting using non-toxic detectable markers US10544683 2004-02-03 US20060179502A1 2006-08-10 Gunther Kauselmann; Branko Zevnik; Jost Seibler; Heidrun Kern
The invention relates to a method that enables automated identification and isolation of cells harbouring a predetermined genetic modification (homologous recombination) using detectable/sortable markers, e.g. fluorescence markers, to identify homologous DNA modifications. Suitable vectors are also provided.
70 Gene conferring disease resistance to plants by responding to an avirulence gene in plant pathogens US447185 1995-05-22 US5648599A 1997-07-15 Steven D. Tanksley; Gregory B. Martin
The present invention relates to an isolated gene fragment which confers disease resistance to plants by responding to an avirulence gene in plant pathogens. The gene fragment encodes for protein kinase, particularly serine/threonine kinase. The gene can be cloned into an expression vector to produce a recombinant DNA expression system suitable for insertion into cells to form a transgenic plant transformed with that gene fragment. Also disclosed is a process of conferring disease resistance to plants by growing plant host cells transformed with that expression system and expressing the gene conferring disease resistance to impart such resistance to the host cells.
71 Replication competent, avirulent Herpes simplex virus as a vector for neural and ocular gene therapy US992250 1997-12-17 US6106826A 2000-08-22 Curtis R. Brandt; Ronald E. Kalil; Seema Agarwala
Degenerative diseases of the retina are a leading cause of vision loss in the United States, affecting approximately two million people each year. The replacement of a defective gene by gene therapy provides one approach for treating individuals having ocular neuronal degeneration where the defective gene has been identified. Several factors, however, suggest that the replacement of a specific gene in a patient might not be effective. For example, many of the conditions are autosomal dominant, and placing a normal copy of the gene into the cells would not correct the defect. As an alternative, replication competent, avirulent, ribonuclease reductase deficient Herpes simplex virus can provide the means to deliver therapeutic polypeptides in a continuous manner to affected cells. Such therapeutic polypeptides include growth factors, neurotrophins and cytokines.
72 一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用 CN202310096073.4 2023-01-18 CN116024182B 2024-04-05 周继勇; 李海敏; 顾金燕; 颜焰; 董伟仁
本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变,使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得,本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱,免疫原性强,用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。
73 一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用 CN202310096073.4 2023-01-18 CN116024182A 2023-04-28 周继勇; 李海敏; 顾金燕; 颜焰; 董伟仁
本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变,使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得,本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱,免疫原性强,用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。
74 一种在不同植物病害系统中通过病原物的接种即可鉴定抗病基因的技术体系 CN202010527886.0 2020-06-11 CN111662953B 2021-05-04 潘庆华; 文健强; 张瑞洁; 赖琪; 王玲
本发明公开了一种在不同植物病害系统中通过病原物的接种即可鉴定抗病基因的技术体系。该方法根据植物病害系统存在的“基因对基因”互作关系,在不同的植物病害系统中鉴定寄主植物抗病基因,具体是从病原物供体菌株中分离克隆其无毒基因并导入受体菌株中而获得重组菌株,将供体菌株、受体菌株及重组菌株分别接种于寄主植物品种上而获得“供体菌株‑受体菌株‑重组菌株”之“三连反应型”;再通过比较、确认“三连反应型”之间具有的遗传背景的逻辑性及无毒基因的特异性,由此以既具有遗传背景逻辑性又具有无毒基因特异性的“三连反应型”来鉴定与无毒基因互作的抗病基因。本技术体系具有泛用性,可应用于在不同的植物病害系统中发掘、鉴定及导入抗病基因;本技术体系无需分子生物学实验的条件、经验及技术,通过常规的病原物接种方法即可简易而准确地鉴定抗病基因。
75 一种十字花科作物抗病品种的鉴定方法 CN200910223808.5 2009-11-23 CN102071248B 2013-02-27 何勇强; 姜伯乐; 唐纪良; 岑卫健; 姜伟; 刘娇; 黄俊锭
本发明披露了一种十字花科作物抗病品种的鉴定方法,包括:找出十字花科黑腐病菌8004菌株基因组中的无毒基因;用所述8004菌株基因组中的无毒基因构建系列的鉴别菌株;将至少带有所述无毒基因的农杆菌悬液注渗到十字花科应试寄主叶片脉间,并检测应试寄主的过敏反应。本发明不仅能够快速地鉴定出十字花科作物抗病品种,而且能提供十字花科作物抗病基因的相关信息,为快速分离、克隆抗病基因奠定了基础,这无疑对十字花科作物抗病育种以及提高十字花科类蔬菜的产量和品质具有显著的不可估量的意义。
76 一种十字花科作物抗病品种的鉴定方法 CN200910223808.5 2009-11-23 CN102071248A 2011-05-25 何勇强; 姜伯乐; 唐纪良; 岑卫健; 姜伟; 刘娇; 黄俊锭
本发明披露了一种十字花科作物抗病品种的鉴定方法,包括:找出十字花科黑腐病菌8004菌株基因组中的无毒基因;用所述8004菌株基因组中的无毒基因构建系列的鉴别菌株;将至少带有所述无毒基因的农杆菌悬液注渗到十字花科应试寄主叶片脉间,并检测应试寄主的过敏反应。本发明不仅能够快速地鉴定出十字花科作物抗病品种,而且能提供十字花科作物抗病基因的相关信息,为快速分离、克隆抗病基因奠定了基础,这无疑对十字花科作物抗病育种以及提高十字花科类蔬菜的产量和品质具有显著的不可估量的意义。
77 来自水稻病原格氏麦格纳保瑟菌的栽培品种特异性基因和应用方法 CN99805473.9 1999-02-25 CN1308678A 2001-08-15 S·A·莱翁; M·L·法曼
本发明提供一种新颖的来源于稻瘟病病原格氏麦格纳保瑟菌的无毒性基因。名为AVR1-CO39的基因赋予对携带所述基因的格氏麦格纳保瑟菌株的栽培品种特异的无毒力。本发明也包括应用该基因和其编码产物改善水稻对稻瘟病病原的抗性。
78 一种在不同植物病害系统中通过病原物的接种即可鉴定抗病基因的技术体系 CN202010527886.0 2020-06-11 CN111662953A 2020-09-15 潘庆华; 文健强; 张瑞洁; 赖琪; 王玲
本发明公开了一种在不同植物病害系统中通过病原物的接种即可鉴定抗病基因的技术体系。该方法根据植物病害系统存在的“基因对基因”互作关系,在不同的植物病害系统中鉴定寄主植物抗病基因,具体是从病原物供体菌株中分离克隆其无毒基因并导入受体菌株中而获得重组菌株,将供体菌株、受体菌株及重组菌株分别接种于寄主植物品种上而获得“供体菌株-受体菌株-重组菌株”之“三连反应型”;再通过比较、确认“三连反应型”之间具有的遗传背景的逻辑性及无毒基因的特异性,由此以既具有遗传背景逻辑性又具有无毒基因特异性的“三连反应型”来鉴定与无毒基因互作的抗病基因。本技术体系具有泛用性,可应用于在不同的植物病害系统中发掘、鉴定及导入抗病基因;本技术体系无需分子生物学实验的条件、经验及技术,通过常规的病原物接种方法即可简易而准确地鉴定抗病基因。
79 植物抗病关键基因突变体的筛选方法 CN03116430.7 2003-04-14 CN1445368A 2003-10-01 蔡新忠
本发明公开了一种植物抗病关键基因突变体的筛选方法。步骤包括转植物抗病基因和病原物无毒基因的植物的分别获取,含植物抗病基因和与之互补的病原物无毒基因的杂交一代植物种子的获取、及该种子发育成的苗不产生过敏性坏死反应的突变体的诱变筛选。现有的植物抗病相关基因突变体的筛选方法人力物力耗费大,适用对象有限,与抗性无关的假阳性突变体产生较多。本发明方法无需育苗,省力省时,筛选简易方便,不产生假阳性突变体,所获突变体均为植物抗病关键基因的突变体。可用于所有抗病基因和互补无毒基因已被克隆的植物抗病关键基因突变体的筛选研究,为克隆植物抗病关键基因奠定基础。
80 植物抗病关键基因突变体的筛选方法 CN03116430.7 2003-04-14 CN1216993C 2005-08-31 蔡新忠
本发明公开了一种植物抗病关键基因突变体的筛选方法。步骤包括转植物抗病基因和病原物无毒基因的植物的分别获取,含植物抗病基因和与之互补的病原物无毒基因的杂交一代植物种子的获取、及该种子发育成的苗不产生过敏性坏死反应的突变体的诱变筛选。现有的植物抗病相关基因突变体的筛选方法人力物力耗费大,适用对象有限,与抗性无关的假阳性突变体产生较多。本发明方法无需育苗,省力省时,筛选简易方便,不产生假阳性突变体,所获突变体均为植物抗病关键基因的突变体。可用于所有抗病基因和互补无毒基因已被克隆的植物抗病关键基因突变体的筛选研究,为克隆植物抗病关键基因奠定基础。