乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物专利检索-乳头畜牧业专利检索查询-专利查询网

积极推动地理标志专门立法

2022-03-10 地理标志，立法，知识产权
保护知识产权是对创新最大的激励

2022-03-10 保护知识产权，创新，激励
谢商华：加快制定知识产权基本法

2022-03-10 知识产权基本法
擦亮“双奥之城”品牌

2022-03-10 双奥，知识产权
让冰雪运动“热”力全开

2022-03-10 冰雪运动，知识产权
携手共奋进　走好强国路

2022-03-10 强国，知识产权
坚持创新引领　方能稳中求进

2022-03-10 创新，稳中求进，知识产权
答好“两张卷” 奋进新征程

2022-03-10 知识产权
专家解读政府工作报告中的创新和知识产权相关部署

2022-03-10 政府工作报告，创新，知识产权
今年政府工作报告指出：加强知识产权保护和运用

2022-03-10 政府工作报告，知识产权保护

乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物

阅读：1041发布：2020-09-16

IPRDB可以提供乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明涉及包含通式(I)化合物以及溶剂和增稠剂的药物组合物，以及其作为药物，特别是用于治疗和预防乳头瘤病毒感染的药物的用途，和制备该药物组合物的方法。，下面是乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种药物组合物，其包含通式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐与溶剂和增稠剂联合，

其中：

■G1代表键或包含1至4个碳原子的、任选地被一或二个烷基，优选相同的烷基取代的、支链或直链的、饱和或不饱和的烃链，■A代表芳基，例如苯基，任选被取代：

-在间位或对位被下列基团取代：

●卤素原子或氰基、烷氧基、卤代烷氧基、酰基氨基烷基或–XR基团，其中X代表–O–、–S–、–SO–、–SO2–或–CO–，且R代表芳基烷基、环烷基或芳基，每个任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如卤素原子、烷氧基或酰基，或●环烷基、芳基或芳基烷基，每个任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如酰基或烷氧基，-和/或在邻位或间位被烷基取代，

■B代表芳基，优选苯基，在其邻位被杂环，优选N-环烷基，例如哌啶-1-基基团取代，和任选在其邻位'被烷基，例如甲基取代，■n为1至4之间的整数，优选1至2之间的整数，更优选为1，■R1代表烷氧基，例如甲氧基，优选位于相对于R3的邻位，■R2代表氢原子或卤素原子，例如氯或溴，或烷基，例如甲基，优选位于相对于R3的间位，和■R3代表酸或酯基团，优选酸基团。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量以重量计0.01至10％，特别是2至8％，且优选约5％的所述式(I)化合物。

3.根据权利要求1或2中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述增稠剂为羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆或其混合物，且优选为羟丙基纤维素。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量以重量计0.01至50％，特别是0.05至10％，特别是0.5至5％，优选1至

5％的增稠剂。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述溶剂为丙二醇、甘油、聚乙二醇或其混合物，特别是丙二醇。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量以重量计40至99.9％，特别是80至99.5％，尤其是85至99％，优选90至95％的溶剂。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量：-以重量计0.01至10％，尤其是2至8％的所述式(I)化合物，-以重量计0.01至50％，特别是0.05至10％，尤其是0.5至5％，优选1至5％的增稠剂，和-以重量计40至99.9％，特别是80至99.5％，尤其是85至99％，优选90至95％的溶剂。

8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量：-以重量计0.01至10％，特别是2至8％，且优选约5％的所述式(I)化合物，-以重量计0.05至10％，特别是0.5至5％，尤其是1至5％，优选约3％的增稠剂，所述增稠剂选自羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆及其混合物，和-以重量计80至99.5％，特别是85至99％，尤其是90至95％，优选约92％的溶剂，所述溶剂选自丙二醇、甘油、聚乙二醇及其混合物。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，其包含相对于所述药物组合物总重量的下列成分：-以重量计0.01至10％，特别是2至8％，且优选约5％的所述式(I)化合物，-以重量计0.05至10％，特别是0.5至5％，尤其是1至5％，优选约3％的羟丙基纤维素，和-以重量计80至99.5％，特别是85至99％，尤其90至95％，优选约92％的丙二醇。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其特征在于，其为凝胶形式。

11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述凝胶具有5000至

50000mPa·s的粘度，特别是15000至25000mPa·s的浓度。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述式(I)化合物具有下列特征：-G1代表键或包含1至4个碳原子的直链的和饱和的烃链，且优选代表键，-A代表芳基，优选苯基，在其间位或对位，优选在其对位，被烷氧基，例如甲氧基取代，或者被芳基或芳基烷基，例如苯基或苄基取代，任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如酰基或烷氧基，-B代表芳基，优选苯基，在其邻位被杂环，优选N-环烷基，例如哌啶-1-基基团取代，和任选在其邻'位被烷基，例如甲基取代，和-R2代表卤素原子，例如溴原子，优选位于相对于R3的间位。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述式(I)化合物具有下列特征：-A代表在对位被苄基取代的苯基，

-B代表在邻位被哌啶-1-基基团取代且在邻'位被甲基取代的苯基，和-G1代表键。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述式(I)化合物为4–[N'–(4–苄基–苯基)–N'–(2–甲基–6–哌啶–1–基–苯基)–肼基羰基甲基]–5–溴–2–甲氧基–苯甲酸或其药学上可接受的盐，且特别是其钾盐。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的药物组合物，其用作药物。

16.根据权利要求1至14中任一项所述的药物组合物，其用于治疗和预防乳头瘤病毒感染，且特别是HPV6或HPV11感染。

17.根据权利要求16所述的药物组合物，其用于预防或治疗与乳头瘤病毒感染相关的病变或疾病，且特别是肛门生殖器疣，例如尖锐湿疣和扁平湿疣，喉、结膜或口腔乳头瘤，复发性呼吸道乳头瘤病，低级别和高级别上皮内瘤变，鲍温样丘疹病，常见的、足底的、蚁冢状疣，浅表或扁平疣，疣状表皮发育不良，和癌，特别是肛门生殖器疣。

18.一种制备根据权利要求1至17中任一项所述的药物组合物的方法，其包括下列步骤：(i)在部分所述溶剂中混合所述式(I)化合物以获得溶液A，(ii)在其余部分的所述溶剂中混合所述增稠剂以获得溶液B，和(iii)混合溶液A和B以获得所述药物组合物。

19.4–[N'–(4–苄基–苯基)–N'–(2–甲基–6–哌啶–1–基–苯基)–肼基羰基甲基]–5–溴–2–甲氧基–苯甲酸的钾盐。

说明书全文

乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及一种化合物的药物组合物，所述化合物有用于治疗和预防与乳头瘤病毒有关的感染，特别是申请WO 2007/135106中描述的化合物。

背景技术

[0002] 申请WO 2007/135106中描述的化合物具有以下结构：

[0003]

[0004] 其中：

[0005] -A代表任选被取代的芳基、环烷基、环烯基或杂环基，

[0006] -B代表任选被取代的芳基或杂环基，

[0007] -R1和R2独立地代表氢原子或各种取代基，

[0008] -R3代表酸官能团或该官能团的前药或生物电子等排基团，

[0009] -G1代表键或烃链，和

[0010] -G2代表基团，其中R代表氢原子或各种取代基，W代表O、S或NH且G代表键或烃链。

[0011] 然而，WO 2007/135106中没有描述这些化合物的制剂。

[0012] 这些有用于治疗和预防与乳头瘤病毒有关的感染的化合物特别旨在局部施用于皮肤和粘膜，特别用于肛门生殖器区。

[0013] 本发明人因此发现了能够迅速和高效释放活性成分的非常简单的药物组合物。

发明内容

[0014] 因此，本发明的目的为一种药物组合物，其包含通式(I)的化合物：

[0015]

[0016] 或其药学上可接受的盐与增稠剂联合，

[0017] 其中：

[0018] ■G1代表键或包含1至4个碳原子的、任选地被一或二个烷基，优选相同的烷基取代的支链或直链的、饱和或不饱和的烃链，

[0019] ■A代表芳基，例如苯基，任选被取代：

[0020] -在间位或对位被下列基团取代：

[0021] ·卤素原子或氰基、烷氧基、卤代烷氧基、酰基氨基烷基或–XR基团，其中X代表–O–、–S–、–SO–、–SO2–或–CO–，且R代表芳基烷基、环烷基或芳基，每个任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如卤素原子、烷氧基或酰基，或

[0022] ·环烷基、芳基或芳基烷基，每个任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如酰基或烷氧基，

[0023] -和/或在邻位或间位被烷基取代，

[0024] ■B代表芳基，优选苯基，在其邻位被杂环，优选N-环烷基，例如哌啶-1-基基团取代，和任选在其邻'位被烷基，例如甲基取代，

[0025] ■n为1至4之间的整数，优选1至2之间的整数，更优选为1，

[0026] ■R1代表烷氧基，例如甲氧基，优选位于相对于R3的邻位，

[0027] ■R2代表氢原子或卤素原子，例如氯或溴，或烷基，例如甲基，优选位于相对于R3的间位，和

[0028] ■R3代表酸或酯基团，优选酸基团。

[0029] 在本发明中，“药学上可接受的”是指其在制备药物组合物中有用，其一般是安全、无毒的且即不是生物学上不良的也不是其它不良的，且其对于兽用以及人类药用都是可接受的。

[0030] 在本发明中化合物的“药学上可接受的盐”是指如本文定义的药学上可接受的并具有所期望的其母体化合物的药理学活性的盐。这样的盐包括：

[0031] (1)水合物和溶剂化物，

[0032] (2)与无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的酸式加成盐；或与有机酸如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、羟基萘甲酸，2-羟基乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘康酸、2-萘磺酸、丙酸、水杨酸、琥珀酸、二苯甲酰基-L-酒石酸、酒石酸、对甲苯磺酸、三甲基乙酸、三氟乙酸等形成的酸式加成盐；和

[0033] (3)当存在于母体化合物的酸质子被金属离子，例如碱金属离子(例如Na+、K+或+ 2+ 2+Li)，碱土金属离子(如Ca 或Mg )或铝离子替换时形成的盐；或当存在于母体化合物的酸质子与有机或无机碱配位时形成的盐。可接受的有机碱包括二乙醇胺、乙醇胺、N-甲基葡糖胺、三乙醇胺、氨丁三醇等。可接受的无机碱包括氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠和氢氧化钠。

[0034] 其特别是碱金属盐，且特别是钾盐。

[0035] 在本发明文本中，术语“不饱和的”是指包括一个或多个不饱和键的基团。

[0036] 在本发明文本中，术语“不饱和键”是指双键或三键。

[0037] 在本发明文本中，术语“卤素”是指氟、溴、氯或碘原子。有利地，其为氟、溴或氯原子。

[0038] 在本发明文本中，术语“烷基”是指包含1-6个碳原子的直链或支链的饱和烃链，特别是下列基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基或正己基。有利地，其为甲基。

[0039] 在本发明文本中，术语“环烷基”是指包含3至12个碳原子的饱和单环或多环系统，优选单、双或三环，所述环能够两两稠合或桥连，例如下列基团：环丙基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、金刚烷基、十氢萘基(décalinyle)和降冰片基(norbornyle)。

[0040] 在本发明文本中，术语“N-环烷基”是指如上定义的环烷基，其中一个碳原子已经被氮原子取代，通过该氮原子与分子进行连接。其有利地为哌啶-1-基或吡咯烷-1-基基团。

[0041] 在本发明文本中，术语“酰基”是指式-C(O)-Z的基团，其中Z代表如上定义的烷基或苯基。其可以有利地为乙酰基、乙基羰基或苯甲酰基。

[0042] 在本发明文本中，术语“烷氧基”是指通过氧原子连接至分子的如上定义的烷基。其可以特别是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、伯丁氧基或叔丁氧基。

[0043] 在本发明文本中，术语“卤代烷氧基”是指被一个或数个如上定义的卤素原子取代的如上定义的烷氧基。优选地，其为氟代烷氧基，即被一个或数个氟原子取代的烷氧基，例如-OCF3或-OCH2CF3基团。

[0044] 在本发明文本中，术语“芳基”是指优选包含5至10个碳原子，并包含一个或数个连接的环的芳香族基团，例如苯基或萘基。有利地，其为苯基。

[0045] 在本发明文本中，术语“杂环”是指含有3至12元的饱和的、不饱和的或芳香族的单环或多环系统，优选单环或双环，该环可以两两稠合、螺接或桥连，且包含相同或不同的选自O、S和N的1-4个杂原子，并且任选包含1或2个氧代基或硫代基，其应被理解为在多环系统的情况下，其中一个环可以是芳香族的而其它环可以是芳香族的、饱和的或不饱和的。有利地，其涉及下列基团：哌啶基、哌嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡二嗪基(pyradizinyle)、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基(benzodioxolyle)、苯并二噁烯基(benzodioxinyle)、苯并[1,2,5]噻二唑基、苯并[1,2,5]噁二唑基、[1,2,3]三唑基和[1,2,4]三唑基。

[0046] 在本发明文本中，术语“芳基烷基”是指通过如上定义的烷基连接至分子的如上定义的芳基。优选地，其为苄基。

[0047] 在本发明文本中，术语“酰基氨基烷基”是指式-Alk-NHCO-Alk'的基团，其中Alk和Alk'彼此独立地代表如上定义的烷基。

[0048] 在本发明文本中，术语“酸”是指COOH基团。

[0049] 在本发明文本中，术语“酯”是指-CO-O-Alk基团，其中Alk代表如上定义的烷基。

[0050] 在本发明文本中，术语“增稠剂”是指增加流体，例如液体的粘度的化合物。其因此改变流体的流变性能，使得流体更粘稠。

[0051] 有利地，根据本发明的组合物包含相对于所述组合物总重量以重量计0.01至10％，特别是2至8％，优选约5％的所述式(I)化合物。

[0052] 所述增稠剂可以是羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素或卡波姆。所述增稠剂还可以这些增稠剂的混合物形式存在。优选地，所述增稠剂为羟丙基纤维素。

[0053] 根据本发明的组合物可以包含相对于所述组合物总重量以重量计0.01至50％，特别是0.05至10％，尤其是0.5至5％，优选1至5％的增稠剂。

[0054] 根据本发明的组合物有利地进一步包含溶剂，例如丙二醇、甘油或聚乙二醇。所述溶剂还可以这些溶剂的混合物形式存在。优选地，所述溶剂为丙二醇。

[0055] 根据本发明的组合物可以包含相对于所述组合物总重量以重量计40至99.9％，特别是80至99.5％，尤其是85至99％，优选90至95％的溶剂。

[0056] 因此，根据本发明的组合物有利地包含式(I)化合物、增稠剂和溶剂，优选由式(I)化合物、增稠剂和溶剂组成。

[0057] 特别地，该药物组合物可以包含下列成分或由下列成分组成(以重量计的百分比以相对于药物组合物总重量表示)：

[0058] -以重量计0.01至10％，特别是2至8％的式(I)化合物，

[0059] -以重量计0.01至50％，特别是0.05至10％，尤其是0.5至5％，优选1至5％的增稠剂，和

[0060] -以重量计40至99.9％，特别是80至99.5％，尤其是85至99％，优选90至95％的溶剂。

[0061] 有利地，该药物组合物包含下列成分或由下列成分组成(以重量计的百分比以相对于药物组合物总重量表示)：

[0062] -以重量计0.01至10％，特别是2至8％，且优选约5％的式(I)化合物，[0063] -以重量计0.05至10％，特别是0.5至5％，尤其是1至5％，优选约3％的增稠剂，所述增稠剂选自羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆及其混合物，和[0064] -以重量计80至99.5％，特别是85至99％，尤其是90至95％，优选约92％的溶剂，所述溶剂选自丙二醇、甘油、聚乙二醇及其混合物。

[0065] 优选地，根据本发明的组合物包含式(I)化合物、羟丙基纤维素和丙二醇，优选由式(I)化合物、羟丙基纤维素和丙二醇组成。

[0066] 因此，根据本发明的组合物特别地具有相对于所述组合物的总重量的下列成分：

[0067] -以重量计0.01至10％，特别是2至8％，优选约5％的式(I)化合物，[0068] -以重量计0.01至50％，特别是0.05至10％，尤其是0.5至5％，尤其是1至5％，优选约3％的羟丙基纤维素，和

[0069] -以重量计40至99.9％，特别是80至99.5％，尤其是85至99％，尤其是90至95％，优选约92％的丙二醇。

[0070] 根据本发明的组合物特别地以凝胶形式提供。

[0071] 在该情况下，凝胶特别地具有根据欧洲药典2.2.10标准测定的5000至50000mPa·s的粘度，特别是15000至25000mPa·s的浓度。更特别地，于25℃使用Brookﬁeld型号HDBV+装置或等价物，其具有21号转子，转速10rpm(法语为tr/min)测定粘度。旋转1分钟后给出值。

[0072] 有利地，G1代表键或由1至4个碳原子组成的直链的和饱和的烃链，且优选代表键。

[0073] 在一个有利的方案中，如上定义的基团A为芳基，优选苯基，在其间位或对位，优选在其对位，被烷氧基，例如甲氧基取代，或者被芳基或芳基烷基，例如苯基或苄基取代，任选地被一或两个相同或不同的取代基取代，例如酰基或烷氧基。

[0074] 有利地，B代表芳基，优选苯基，在其邻位被杂环，优选N-环烷基，例如哌啶-1-基基团取代，和任选在其邻'位被烷基，例如甲基取代。

[0075] 有利地，R2代表卤素原子，例如溴原子，优选位于相对于R3的间位。

[0076] 优选，式(I)化合物具有下列特征：

[0077] -A代表在对位被苄基取代的苯基，

[0078] -B代表在邻位被哌啶-1-基基团取代且在邻'位被甲基取代的苯基，

[0079] -G1代表键，和

[0080] -R1、R2、R3和n如上所定义。

[0081] 特别地，式(I)化合物为4–[N'–(4–苄基–苯基)–N'–(2–甲基–6–哌啶–1–基–苯基)–肼基羰基甲基]–5–溴–2–甲氧基–苯甲酸或其药学上可接受的盐，且特别是其钾盐。

[0082] 事实上，钾盐增加了该化合物的溶解性，特别是与其盐酸盐相比时，并且促进该产品的配制。

[0083] 因此本发明目的还是4–[N'–(4–苄基–苯基)–N'–(2–甲基–6–哌啶–1–基–苯基)–肼基羰基甲基]–5–溴–2–甲氧基–苯甲酸的钾盐。

[0084] 本发明还涉及该特定盐作为药物的用途，特别是用于预防或治疗乳头瘤病毒感染，且特别是HPV6或HPV11感染。

[0085] 特别地，该钾盐能够预防或治疗与乳头瘤病毒感染相关的病变或疾病，且特别是肛门生殖器疣，例如尖锐湿疣和扁平湿疣，喉、结膜或口腔乳头瘤，复发性呼吸道乳头瘤病，低级别和高级别上皮内瘤变，鲍温样丘疹病，常见的、足底的、蚁冢状疣，浅表或扁平疣，疣状表皮发育不良，和癌，特别是肛门生殖器疣。

[0086] 其尤其有用于治疗特别是由HPV6和HPV11感染引起的病变，特别是疣和湿疣。

[0087] 本发明还涉及任何药物组合物，其包含该钾盐与至少一种药学上可接受的赋形剂联合。

[0088] 本发明的目的还涉及根据本发明的组合物作为药物的用途，特别是用于预防或治疗乳头瘤病毒感染，且特别是HPV6或HPV11感染。

[0089] 本发明还涉及根据本发明的组合物在制备用于预防或治疗乳头瘤病毒感染，且特别是HPV6或HPV11感染的药物中的用途。

[0090] 本发明还涉及一种预防或治疗乳头瘤病毒感染，且特别是HPV6或HPV11感染的方法，其包括向需要其的人施用有效量的根据本发明的组合物。

[0091] 特别地，所述组合物局部施用，特别以凝胶的形式局部地施用；也可以设想口服施用。

[0092] 在本发明文本中，术语“局部地(topique)”是指局部(locale)应用。该应用可以在皮肤或粘膜(外部或内部)上进行，例如呼吸道、口腔或肛门生殖器区。该应用还可以通过在病变或肿瘤内或周围局部注射来进行。优选地，该应用在皮肤和/或粘膜上，且特别是在肛门生殖器区进行。

[0093] 特别地，根据本发明的组合物能够预防或治疗与乳头瘤病毒感染相关的病变或疾病，且特别是肛门生殖器疣，例如尖锐湿疣和扁平湿疣，喉、结膜或口腔乳头瘤，复发性呼吸道乳头瘤病，低级别和高级别上皮内瘤变，鲍温样丘疹病，常见的、足底的、蚁冢状疣，浅表或扁平疣，疣状表皮发育不良，和癌，特别是肛门生殖器疣。

[0094] 根据本发明的组合物特别用于治疗尤其是由HPV6和HPV11感染引起的病变，特别是疣和湿疣。

[0095] 可以通过混合各种成分制备根据本发明的组合物。

[0096] 因此，本发明的目的还为一种制备根据本发明的组合物的方法，所述组合物包含式(I)化合物、增稠剂和溶剂，所述方法包括下列步骤：

[0097] (i)在部分溶剂中混合式(I)化合物以获得溶液A，

[0098] (ii)在其余部分的溶剂中混合增稠剂以获得溶液B，和

[0099] (iii)混合溶液A和B以获得根据本发明的组合物。

[0100] 优选地，在室温下进行步骤(i)。

[0101] 优选地，加热进行步骤(ii)以获得增稠剂的均匀溶液。特别地在60至100℃之间的温度，优选70至80℃之间的温度进行该步骤。然后溶液B在步骤(iii)中被使用之前被冷却。

[0102] 优选地，在20至40℃之间的温度进行步骤(iii)。在该情况下，将包含溶液A的反应器注入到包含溶液B的反应器中，或者反之亦然。因此，根据标准惯例可以进一步使用少量溶剂冲洗倒空的反应器。

[0103] 鉴于以下非限制性实施例将更好理解本发明。

附图说明

[0104] 图1代表制备根据本发明的组合物的方法的图示。

具体实施方式

[0105] 实施例：

[0106] 实施例中使用的活性成分为4–[N'–(4–苄基–苯基)–N'–(2–甲基–6–哌啶–1–基–苯基)–肼基羰基甲基]–5–溴–2–甲氧基–苯甲酸的钾盐(化合物(Ia))。

[0107] 获得所述活性成分的钾盐的一个方法是基于使用乙醇的氢氧化钾转化溶解于乙醇中的感兴趣的化合物的中性形式。中性形式本身由水洗涤如专利WO 2007/135106要求保护的盐酸盐形式的化合物而获得。

[0108] 具有以重量计5％的活性成分的凝胶形式的根据本发明的组合物

[0109]

[0110] 所述药物组合物为包含以重量计5％的化合物(Ia)的凝胶。

[0111] 羟丙基纤维素：

[0112] 规格为欧洲药典no.0337专题中的那些。

[0113] 羟丙基纤维素的来源为由供应商ASHLAND再销售，其具有下列级别：MF–Pharm、MXF–Pharm和GF–Pharm。

[0114] 丙二醇：

[0115] 规格为欧洲药典no.0430专题中的那些。

[0116] 药物组合物(a)至(g)的制备

[0117] 将活性成分(Ia)溶解于一部分丙二醇中。将羟丙基纤维素分散于“冷”丙二醇中，然后将混合物加热以获得增稠剂的溶解。当凝胶冷却至40℃时，加入活性成分(Ia)的丙二醇溶液(用少量丙二醇冲洗曾包含该溶液的容器)且将混合物均匀化。持续搅拌直至到达室温。

[0118] 制备凝胶的方法显示于图1中。

[0119] 特别地，根据该方法制备下面的5000g批次(对应于组合物(g))：

[0120]

[0121] 于室温将活性成分溶解于约750g丙二醇中用于5000g批次的凝胶。将羟丙基纤维素分散于约3600g的丙二醇中。于75±5℃搅拌下加热混合物直至获得均匀凝胶。将该制剂放置冷却至40℃或更低，同时保持搅拌。

[0122] 搅拌下，将溶液中的活性成分倒入溶液中的羟丙基纤维素中且用其余的丙二醇(约250g)冲洗容器。在包装前，搅拌下放置最终的凝胶冷却至30±5℃。

[0123] 获得的药物组合物为粘稠的、透明的、无色至浅黄色的凝胶。

[0124] 来自于药物组合物(d)的活性成分通过合成膜的扩散研究

[0125] 对药物组合物(d)进行通过由纤维素制成的、安装在弗朗兹扩散池上的合成透析膜的扩散研究。

[0126] 监测化合物(Ia)通过膜的扩散动力学6小时。当动力学停止时，从药物组合物中释放出20％以上的活性成分。

[0127] 药物组合物的生物活性

[0128] 可以在多种体外试验和细胞试验中评价活性成分对抗乳头瘤病毒的活性，例如 Chiang 等人 (1992),Proc.Natl.Acad.Sci.USA,89:5799–5803,White 等人(2003),Journal of Biological Chemistry,278:26765–26772,或者Fradet–Turcotte等人(2010),Virology,399:65–76描述的那些。

[0129] 在本发明中，使用两种类型的试验研究化合物对抗乳头瘤病毒的生物活性。第一类型试验(“E1/E2相互作用试验”)评价人类细胞中HPV(人乳头瘤病毒)的E1和E2蛋白质之间的相互作用。第二类型试验(“复制试验”)测定人类细胞中病毒基因组DNA(法语为l’ADN)的复制。

[0130] ·相互作用试验

[0131] E1和E2之间的相互作用试验相似于通常被称为“哺乳动物双杂交”的试验。该试验是基于报告载体和编码HPV的E1和E2蛋白质的表达载体的共转染，所述报告载体含有对HPV的E2蛋白质的DNA结合位点，所述结合位点在控制报告基因表达的启动子中，所述E1蛋白质融合至VP16反式激活结构域。该试验使其可能跟踪E1和E2蛋白质之间的相互作用，该相互作用为HPV基因组复制所需的步骤。

[0132] 对于E1和E2之间的相互作用的试验，构建了含有数个对E2蛋白质的DNA结合位点的报告载体(回文序列5'ACCGNNNNCGGT–3')，所述结合位点在最小的腺病毒主要-晚期启动子(MLP)上游控制编码萤火虫荧光素酶的基因的转录。还构建了与HSV-1的VP16反式激活结构域在N-末端融合的HPV E1蛋白质表达载体。在细胞系中该含有E2位点的报告载体和HPV E2蛋白质表达载体的共转染导致荧光素酶活性的轻微增加。该含有E2位点的报告载体、HPV E2蛋白质表达载体和融合至VP16结构域的E1蛋白质表达载体的共转染使得在细胞中形成强烈的反式激活E2/E1–VP16蛋白质复合体，并且导致荧光素酶活性的大幅增加。这表示了细胞中E1和E2蛋白质之间的相互作用。

[0133] ·复制试验

[0134] 病毒基因组DNA的复制试验是基于含有HPV复制起点(ori)的报告载体和编码HPV的E1和E2蛋白质的表达载体的共转染。该试验使其可能跟踪HPV基因组复制所需的E1和E2的一套生物学功能。。

[0135] 对于病毒基因组DNA复制试验，构建了含有HPV11/HPV6复制起点(也被称为LCR，其带有HPV的E1和E2蛋白质的结合位点)和在SV40启动子转录调控下的编码萤火虫荧光素酶的基因的“复制子”报告载体。证实了在E1或E2病毒蛋白质存在或不存在时，HPV复制起点的存在对荧光素酶基因的表达均无转录上的影响。在人细胞系中该复制子载体和HPV E1和E2蛋白质表达载体的共转染导致依赖于E1和E2存在的荧光素酶活性的增强，展示了报告载体数目的增加。这归因于使含有病毒复制起点的该复制子载体在哺乳动物细胞中复制的E1和E2病毒蛋白质的活性。

[0136] 为了显示在根据本发明药物组合物中的活性成分的配制没有改变非配制的活性成分的生物活性，通过研究根据本发明的药物组合物(a)、(d)、(f)和(g)，或者新鲜制备的Tris–DMSO缓冲溶液(25mM Tris,pH 8.0,5％DMSO)中的化合物(Ia)对抗乳头瘤病毒的生物活性来测定化合物(Ia)的活性。

[0137] 将药物组合物(a)、(d)、(f)和(g)以与活性成分相同的浓度(即0.25至40μM的范围)稀释于待测试的相同缓冲溶液中。

[0138] 评价了化合物(Ia)，在溶液中或在药物组合物(a)、(d)、(f)和(g)中，对于在源于肾脏上皮细胞或宫颈癌细胞的人细胞系中的HPV11/HPV6的E1和E2蛋白质之间的相互作用的抑制活性。转染之后将各种剂量(0.25–40μM)于细胞介质中孵育2天，并且测定荧光素酶活性以确定化合物对于HPV的E1和E2蛋白质之间的相互作用的IC50。

[0139] 评价了化合物(Ia)，在溶液中或在药物组合物(a)、(d)、(f)和(g)中，对于在源于肾脏上皮细胞或宫颈癌细胞的人细胞系中的HPV11/HPV6的E1和E2依赖性病毒复制的抑制活性。转染之后将各种剂量(0.25–40μM)于细胞介质中孵育2至6天，并且使用光度计测定荧光素酶活性以确定化合物对于HPV基因组复制的IC50。

[0140] 上面描述的药物组合物显示出与溶液中化合物(Ia)(非配制)相同的生物活性。溶液中和药物组合物(a)、(d)、(f)和(g)中的化合物(Ia)既抑制细胞中HPV11/HPV6E1和E2蛋白质之间的相互作用也抑制细胞中HPV11的E1和E2蛋白质依赖性病毒复制，且IC50为约1μM。

[0141] 体外和体内经皮吸收

[0142] 在安装在弗朗兹池的人皮肤上应用10mg/cm2剂量之后研究来自于药物组合物(g)的化合物(Ia)的经皮吸收。通过在健康皮肤上和在剥落皮肤上(作为肛门生殖器区弱角质化的模型)对比经皮吸收进行该研究。

[0143] 暴露于药物组合物(g)8或24小时之后，通过HPLC定量化存在于各个皮肤层(角质层、表皮层、真皮层)中的和已经透过皮肤(接收流体(fluide récepteur))的化合物(Ia)的量。

[0144] 扩散8小时之后获得的结果显示于下表中。

[0145]

[0146] 通过用粘合剂剥离从表皮层移除非剥落的皮肤样品的角质层。在恒定和受控的压力下将后者应用于皮肤表面。

[0147] NA：不适用

[0148] 扩散8小时之后在皮肤中测定的化合物(Ia)的浓度对应于细胞水平(in cellulo)测定的活性成分的活性(IC50)的100倍(健康皮肤)至1000倍(剥落皮肤)的局部浓度。扩散24小时之后获得了相似的结果。以相同的方式，体外在小型猪的皮肤上(高度预测人皮肤行为的动物模型)的经皮吸收的研究中观察到相似的结果。

[0149] 此外，尽管皮肤中活性成分的局部浓度很高，但是仅有少量的化合物(Ia)透过安2
装在弗朗兹池上的小型猪的皮肤。因此，在暴露于10mg/cm 剂量的药物组合物(g)24小时之后，在接收流体中测定到应用的剂量的约0.1％。

[0150] 在毒代动力学研究期间，还体内测定了来自于药物组合物(g)的化合物(Ia)的经2
皮吸收，通过在小型猪侧面上以10mg/cm 剂量每天两次应用42天进行所述毒代动力学研究。使用非常敏感的LC–MS/MS生物分析方法(检测极限＝0.5ng/ml)在受治疗动物的血液中研究的第一天和最后一天测量和定量到化合物(Ia)的存在。以相似于如上所述的在人皮肤和小型猪皮肤上的体外经皮吸收研究的方式，在小型猪的血液中检测到少量的化合物(Ia)。因此，测定应用的剂量的约0.1％，显示来自于药物组合物的化合物(Ia)的低体内经皮吸收。

[0151] 整个这些结果显示应用药物组合物之后皮肤中活性成分(化合物(Ia))的高局部浓度以及活性成分的低全身性暴露，正如药物的局部使用所需要的。

[0152] 耐受性

[0153] 在小型猪临床前毒性研究中和在健康志愿者的Ia期临床研究中药物组合物(g)2
均显示非常良好的耐受性。在小型猪中，向动物侧面25、125或250cm 面积处应用10mg/
2
cm 的剂量每天两次持续42天。无论受治疗的面积多大，所述药物组合物均观察到很好的
2 2
耐受性。并且，向健康志愿者的下背25cm 面积处以10mg/cm 的剂量，在每天两次应用7天期间，所述药物组合物显示出非常良好的耐受性。在受治疗的8名健康志愿者中没有观察到局部反应或副作用。

[0154] 微生物特性

[0155] 根据欧洲药典的方法(应用标准5.1.3–2的方法5.1.3)测试药物组合物(a)和(g)的抗微生物防腐功效。

[0156] 结果示于下表中：

[0157] 药物组合物(a)：

[0158]

[0159] NI(法语为PA)：没有增加

[0160] *CFU(法语为U.F.C.)：菌落形成单位

[0161] 药物组合物(g)：

[0162]

[0163] NI：没有增加

[0164] *CFU：菌落形成单位

[0165] 这些结果符合欧洲药典方法5.1.3–2的A标准。

[0166] 借助于丙二醇的存在(本领域技术人员已知其抗微生物防腐特性)，所述制剂免受微生物污染，因此不需要额外的防腐剂。

[0167] 稳定性研究

[0168] 在5kg实验室批次上研究药物组合物(g)的稳定性。

[0169] 根据ICH推荐测试下列保存条件：

[0170] -长期条件：5℃±3℃，

[0171] -中间条件：25℃±2℃/60％±5％RH(相对湿度)，和

[0172] -加速条件：40℃±2℃/75％±5％RH。

[0173] 测试方法是惯用的那些并且包括：

[0174] -鉴定外观，

[0175] -测量粘度，和

[0176] -通过HPLC分析活性成分(Ia)。

[0177] 所得结果列于下表中：

[0178] 于5℃的稳定性数据

[0179]

[0180] ND：未进行检测

[0181] 于25℃/60％RH的稳定性数据

[0182]

[0183]

[0184] ND：未测定

[0185] 于40℃/75％RH的稳定性数据

[0186]

[0187] ND：未测定

[0188] 无论储存条件和持续时间，粘度均保持稳定。

[0189] 无论储存条件和持续时间，在期满时活性成分(Ia)的浓度和凝胶的外观均在标准内，这证明了凝胶在存储期间的稳定性。

标题	发布/更新时间	阅读量
乳头肌捆束-专利编号CN110582251A	2020-05-12	544
乳头按摩器-专利编号CN1437440A	2020-05-12	715
乳头凹陷矫正架-专利编号CN107260373B	2020-05-13	1013
乳头皲裂康-专利编号CN105311390A	2020-05-12	360
乳头杯-专利编号CN101453886B	2020-05-11	160
乳头按摩器-专利编号CN1183825C	2020-05-11	829
一种乳头清洗机-专利编号CN106614005B	2020-05-13	759
奶牛乳头穿刺针-专利编号CN109419564A	2020-05-13	668
乳头杯-专利编号CN101453886A	2020-05-11	156
乳头浸洗剂-专利编号CN1225555A	2020-05-11	504

乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物

乳头瘤病毒抑制剂的药物组合物

技术领域

背景技术

发明内容

附图说明

具体实施方式

IPRDB

热门服务

关于我们

友情链接

联系方式