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一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法

阅读：716发布：2021-02-28

IPRDB可以提供一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明涉及一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法，其操作步骤包括：田间烟草转化株鉴别，鉴别时期为团棵期，即烟株移栽后25－30天，株高33厘米左右，每株叶片13片左右；取样形式、样品处理、烟碱和降烟碱的提取与测定、烟碱转化率的计算、转化株的剔除，淘汰烟碱转化率大于5％以上的烟株；种子标记，经烟碱转化率提纯后的烟草品种标明“LC”字样。该方法具有操作简便、便于推广；具有鉴别和剔除烟碱转化株，减少转化株比例、降低烟碱转化率，提高烟叶安全性，适用于以减少亚硝胺为目标的低烟碱转化率性状提纯和品种选育。，下面是一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法专利的具体信息内容。

1、一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法，其特征是，该方法由下述操作步骤构成： A、转化株的鉴别 a、鉴别时期，即烟株团棵期，团棵期是指每株烟叶片达12至14片，烟株高为32厘米至34厘米，在移栽后25至30天； b、取样形式，种植圃所有烟株自下而上各取第7至10叶位生长定型叶1至2片，所有取样株定株编号挂牌； c、样品处理，将采撷的烟叶喷施1％的乙烯利水溶液后保湿晾制，4至6天烟叶完全变黄后，及时去掉主脉烘干，粉碎制成粉样备用； d、烟碱及降烟碱提取与测定，每样品称取100毫克，用三氯甲烷提取烟碱和降烟碱，采用气相色谱法，全自动分析仪测定烟碱和降烟碱的含量； e、烟碱转化率的计算，将上述已测定降烟碱和烟碱含量，代入烟碱转化率公式算出碱烟转化率； B、转化株的剔除，根据早期化学诱导鉴定结果，于烟株开花期前对照单株编号，彻底打顶，淘汰烟碱转化率大于5％以上的烟株； C、种子标记，经烟碱转化率提纯后的原种和由此繁殖的良种，应在种子标签、种子袋和种子包装箱上品种名称后标明“LC”字样。

2、 根据权利要求1所述的烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法， 其特征是，烟株团棵期为移栽后28天，烟株高33厘米，每株叶片有 13片，种植圃所有烟株自下至上各取第8叶位生长定型叶片1片。

3、 根据权利要求1或2所述的烟草品种烟碱转化率性状的提纯 方法，其特征是，烟株团棵期为移栽后30天，烟株高34厘米，每株 叶片有12片，种植圃所有烟株自下至上各取第9叶位生长定型叶片 2片，采撷的烟叶经喷施保湿晾制5天后，烟叶完全变黄。

说明书全文

一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法 技术领域

本发明涉及一种烟草烟碱转化率性状的提纯方法，特别是涉及一 种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法。

背景技术

烟草生物碱主要包括烟碱、降烟碱、新烟草碱和假木贼碱四种。
普通烟草属烟碱各累型，以烟碱为主，其含量占总生物碱的92%以上， 其它各生物碱仅占很少部分。烟碱含量的高低是决定烟叶感官品质的 重要因素， 一般要求烟碱含量适宜，以达到生理强度适中、吃味醇和、 刺激性小的目的。降烟碱亦称去甲基烟碱，正常情况下降烟碱含量不 超过总生物含量的3.5%，主要由烟碱在去甲基酶的作用下脱甲基形 成。由于降烟碱易于在烟叶调制和陈化过程中发生一系列亚硝化和酰 化等生化反应，形成具有致癌作用的烟草特有亚硝胺（TSNAs)的主 要成分N-亚硝基降烟碱（NNN)及麦斯明、甲酰降烟碱、乙酰降烟 碱等酰化产物，导致烟叶有害成分增加和香味品质下降，直接影响着 吸烟者的身体健康。因此，烟叶减害，降低烟草特有的亚硝胺含量成 为目前国际烟草界的共识和主攻方向， 一直是研究的重点和热点。
普通烟草是纯合双隐性基因型（ctctcscs)，不具有烟碱去甲基或 者说烟碱转化能力。但ct隐性基因具有较高的不稳定性，易发生显 性突变，在栽培品种的烟株群体中， 一些烟株往往因基因突变，形成 烟碱转化能力，导致烟碱含量显著降低，降烟碱和TSNAs含量相应 增加。我国对烟碱转化的研究起于世纪90年代末期，研究结果表明， 中国白肋烟、马里兰烟和香料烟均不同程度的存在烟碱转化株比例、 降烟碱含量和烟碱转化率过高的问题。目前，美国已将降烟碱含量作 为考核新品种的主要指标，制定了降烟碱含量不超过总生物碱15% 的最高限额，并以"LC"表示低烟碱转化品种，规定凡未标明"LC" 的品种不得种植。目前，国内还没有有效地控制和降低烟叶烟碱转化率及降烟碱含 量的技术。

发明内容

本发明为了弥补现有技术的不足，基于申请人对烟碱向降烟碱转 化的遗传规律和品种改良的研究，在品种选育和良种繁殖过程中，提 纯烟草烟碱转化性状，控制和降低烟叶烟碱转化率及降烟碱含量，其 目的在于提供一种对降低我国烟叶的烟碱转化率和降烟碱含量，提高 烟叶安全性和改善烟叶品质，丰富和完善烟草品种和良种繁殖技术的 烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法。
本发明所称的烟碱转化率即降烟碱的含量占降烟碱加上烟碱含 量之和的百分率，表示烟碱转化能力的大小。
本发明所称的烟碱转化株即具有烟碱向降烟碱转化能力的烟株。 一般按烟碱转化率大小对烟株进行分级：
(1) 非转化株：烟碱转化率低于5%的烟株。
(2) 低转化株：烟碱转化率低于5%至20%的烟株。
(3) 中转化株：烟碱转化率低于20%至50%的烟株。
(4) 高转化率：烟碱转化率大于50%。 为了实现上述目的，本发明的技术方案是：本发明所称的提纯方
法由下述操作步骤构成。
1、 提纯程序
l.l常规种提纯：按YC/T43-1996中规定的三圃制（即株行圃、 株系圃、原种圃）原种生产程序进行。
1.2杂交种提纯：雄性不育系母本、雄性不育保持系和杂交父本 必须同时按YC/T43-1996中规定的三圃制原种生产程序进行；其中雄 性不育系和保持系按姊妹株系配套繁殖。
2、 转化株的鉴别
2.1鉴别时期，即烟株团棵期，烟株团棵期是当烟株高为32至 34厘米，每株叶片有12至14片，移栽后25至30天。
2.2取样形式，种植圃所有烟株自下而上各取第7至10叶位生长
4定型叶1至2片，所有取样株定株编号挂牌；
2.3样品处理，将采撷的烟叶喷施1%的乙烯利水溶液后保湿晾 制，4至6天烟叶完全变黄后，及时去掉主脉烘干，粉碎制成粉样备 用；
2.4烟碱及降烟碱提取与测定，每样品称取100毫克，用三氯甲 垸提取烟碱和降烟碱，采用气相色谱法，全自动分析仪测定烟碱和降 烟碱的含量；具体操作和参数设定按Burto等的方法进行(Burton H R， Bush L P, Djordjevic M V. Influence of temperature andhumidity on the accumulation of tobacco-specific nitrosamines instored burley tobacco, Journal of Agriltural and Food Chemistry, 1989， 37: 1372画1377.译： 温度和湿气对白肋烟烟草特有亚硝胺积累的影响，农业和食品化学学 报1989年37巻1372-1377页）
2.5烟碱转化率的计算：
碱烟转化率(％)=[降烟碱含量/ (烟碱含量+降烟碱含量）](1)
3、 转化株的剔除
将早期化学诱导鉴定结果，于烟株开花期前对照单株编号，彻底 打顶，淘汰烟碱转化率大于5%以上的烟株；
4、 种子标记
经烟碱转化率提纯后的原种和由此繁殖的良种，应在种子标签、 种子袋和种子包装箱上品种名称后标明"LC"字样。
本发明所称的提纯方法，其特征是，烟株团棵期为移栽后28天， 烟株高33cm(厘米），每株叶片有12-14片，种植圃所有烟株自下至 上各取第9叶位生长定型叶片2片。采撷的烟叶经喷施1%的乙烯利 水溶液后保湿晾制5天后，烟叶完全变黄。
本发明所涉及的一种烟草品种烟碱转化率性状的提纯方法，具有 操作简便，易于掌握，对环境无害，便于推广等特点，具有鉴别和剔 除烟碱转化株，减少转化株比例，提高品种群体中非转化株纯度，降 低烟碱转化率，提高烟叶安全性和改善烟叶品质等优点，也为降低烟 叶中有害成分TSNAs (烟草特有亚硝胺）含量提供了一条新的有效途径。本发明适用范围于白肋烟、马里兰烟、香料烟、烤烟和其它地 方晾晒烟的常规种（自花受粉）和雄性不育杂交种的品种选育和原种
提纯。特别适用于以减少烟叶中有害成分TSNAs为目标的低烟碱转 化率性状提纯。

具体实施方式

下面结合实施例，对其技术方案案详细叙述如下： 实施例l:取白肋烟为提纯对象，该提纯方法按下述步骤进行： 1、鉴别时期，烟株团棵期，为移栽后30天，株高34cm左右，每株 叶片14片，种植圃所有烟株自下而上各取第9叶位生长定型叶2片， 所有取样株定株编号挂牌；样品处理，将采撷的烟叶喷施1%的乙烯 利水溶液后保湿晾制，5天烟叶完全变黄后，及时去掉主脉烘干，粉 碎制成粉样备用；测定，每样品称取100毫克，用三氯甲烷提取烟碱 和降烟碱，采用气相色谱法，全自动分析仪测定烟碱和降烟碱的含量； 具体操作和参数设定按Burto等的方法进行;烟碱转化率的计算[按公 式（1) ]。 2、转化株的剔除，根据早期化学诱导鉴定结果，于烟株 开花期前对照单株编号，彻底打顶，淘汰烟碱转化率大于5%以上的 烟株；3、种子标记，经烟碱转化率提纯后的原种和由此繁殖的良种， 应在种子标签、种子袋和种子包装箱上品种名称后标明"LC"字样。 实施例2:取马里兰烟为提纯对象，该提纯方法操作歩骤为：1、 鉴别时期，烟株团棵期为移栽后28天，烟株高为33cm左右，每株 叶片13片；种植圃所有烟株自下布上各取第8叶位生长定型叶2片， 所有取样株定株编号挂牌；样品处理，采撷烟叶喷施1%的乙烯得水 溶液后保湿晾4天后，烟叶完全变黄，及时去掉主脉烘干，制成粉样 备用；其它操作步骤、所需设备、条件等均与实施例l相同。
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