：本发明涉及到一种刺云实粉提取物及其药用制剂，属天然植物药技术领域。
刺云实是由云南省首次引种成功的一个新种，它属于豆科植物，为苏木属的一种灌木或小乔木，学名为刺云实(Caesalpinia spinosa Kuntze)。刺云实粉提取物及其药用制剂，是以滇产药用植物刺云实的豆荚壳(简称刺云实粉)为原料研制成的提取物及新药。
通过国内外文献检索，未见与本发明技术相同的报道。
本发明所作的毒理学、药效学及临床观察实验结果(数据及结论)如下：1、抗病毒活性试验：由于病毒只能在活细胞中生长复制，因而细胞培养抗病毒试验，是抗病毒药物活性试验的最常用方法---抑制病毒致细胞病变法(简称CPE)，并规定以抑制细胞病变50％的药物最低稀释浓度为IC50。
1-1实验材料---DMEM(Dulbecco’s modified eagle’s培养基)、磷酸缓冲盐液是Sigma公司出品；胰蛋白酶-EDTA(x10)及胰蛋白酶(1∶250)为Gibco公司出品；胎牛血清(FBS)为Biofluids有限公司出品。
1-2病毒病原菌株及活细胞---呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒3型(parainfluenza type 3 virus)为试验病毒病原菌株；Hep2细胞均由美国Type CultureCollection提供。
1-3试验用药及对照品----三批试验用药样品由发明人提供；对照试验用药品为浙江温卅第三制药厂生产的化学药品三氮唑核苷(Ribavirin)。
1-4抑病毒试验----用上述规格的材料和病毒病原菌株，并采用抑制病毒致细胞病变法(简称CPE)进行抑病毒试验。对提取物三批样品进行了抑病毒试验结果如表1及表2所示。
表1：三个样品对呼吸道合胞病毒(RSV)的抗病毒活性试验样品    IC50(μg/ml)aTC50(μg/ml)bTCc1         2.8                2.8            1.02         2.3                2.3            1.03         12.0               12.0           1.0三氮唑核苷    2.9                23.0           7.9a IC50-----抑制细胞病变50％的药物最低稀释浓度b TC50-----为产生50％细胞毒性效应(cytotoxic effect)的药物浓度c TCc＝TC50/IC50表2：三个样品对副流感病毒3型病原菌的抗病毒活性试验样品    IC50(μg/ml)aTC50(μg/ml)bTCc1         2.8                2.8            1.02         2.3                2.3            1.03         12.0               12.0           1.0三氮唑核苷    5.2                62.5           12.0试验结果表明，提取物，比对照试验的化学药品“三氮唑核苷(Ribavirin)”具有更多优点，而且副作用小得多，这正是提取物制成的药制的特色所在。
2、刺云实粉提取物抑菌实验(平皿法)：2-1培养基---采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的Muller-Hinton琼脂培养基。
2-2对照品---选用昆明制药厂出产的盐酸黄莲素片剂。
2-3供试菌株---共选用了八种：金黄色葡萄球菌(Staphyloccus albus，ATCC-25923)、绿脓杆菌(Pseudomonas aerusinosa，ATCC--27853)、大肠杆菌(Escherichia coli ATCC--25922)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)甲型溶血性链球菌、(S.hemolyticus)以及痢疾杆菌、宋氏痢疾杆菌。其中金黄色葡萄球菌(Staphyloccus albus，ATCC-25923)、绿脓杆菌(Pseudomonas aerusinosa，ATCC--27853)、大肠杆菌(Escherichiacoli，ATCC--25922)为美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的菌株，其余五种为云南省微生物研究所提供的菌种。
2-4试验结果---抑菌试验结果表明，刺云实粉提取物对八种菌株均有明显地抑制作用，最低抑菌浓度(MIC)在0.150g％-0.0613g％之间，小于对照品盐酸黄莲素片剂(MIC：一般在0.150g％-0.5000g％之间)。
供试八种菌株包括了革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌，杆菌和球菌，均为新型抗生素筛选常用的指示菌，所以从抑菌试验结果可以初步表明，刺云实粉提取物具有广谱抗菌活性。因此刺云实粉提取物具有清热解毒、抗菌消炎的功效。
3、毒理学试验毒理学试验包括急毒、长毒、特殊毒性试验(致癌试验、生殖毒性试验、致突变试验)三个部份，由授权单位昆明医学院天然药物药理重点实验室完成。特殊毒性试验要回答的是潜在性危害问题，对用药者及下一代有无致癌、致畸、致突变的危险。我们研制的是中药二类新药，按规定特殊毒性试验可以不做，报送说明资料即可。刺云实粉提取物在原产地南美洲是当地土著民族世世代代袭用的药物，至少有二百多年使用历史，没有发现任何毒副作用，非常安全。
3-1急毒试验：实验动物----选体重为18-20.0g健康的ICR小鼠20只，雌雄各半用于进行预试验，探索该提取物的中毒剂量及死亡剂量。预试结果证明，测不出半致死量，小鼠经口最大耐受量为22.8g/kg体重。为临床用药量的250倍以上。故按规定采用最天耐受量试验(M.T.D)。
最大耐受量试验---选体重为18-20.0g健康的ICR小鼠20只，雌雄各半用于进行最大耐受量试验，按常规设计要求灌胃给药后，计算得最大耐受量(M.T.D)。
毒理试验结果---试验结果测不出半致死量，小鼠经口最大耐受量为22.8g/kg体重。为临床用药量的250倍以上。在给药后8小时、24小时直至到第七天的观察中，未见动物出现中毒反应。在15天的连续观察中，试验动物情况良好，活动、食欲、粪便均未见异常，口、眼、鼻、耳无异常分泌物。体重增长也属正常范围，平均每天每只增长0.5克左右。在14天的连续观察后，将小鼠解剖，内脏完全正常。毒理结论认为，以刺云实粉提取物为原料的药用制剂，是一种少有的安全可靠的新药。
3-2长期毒性试验：长期毒性试验的主要目的是观察动物因长期连续给药所产生的毒性反应，以确定该药的毒性和临床用药安全剂量。
实验动物----选了两种动物：1、狗，年龄5个月。每剂量组雌雄各2只；2、大鼠，鼠龄7周，体重为120-150.0g健康的SD系大鼠，每剂量组雌雄各10只；对照组与试验组动物数量相同。
剂量---急毒理试验结果表明，刺云实粉提取物毒性很低，测不出半数至死量(LD50)，最大耐受量为22.8g/Kg体重/日，因此长期毒性试验选两个剂量组就足够说明问题了：1)、与临床推荐量一致，此为低剂量；2、最大耐受量(M.T.D)的1/8，即2.85g/Kg体重/日，此为高剂量，相当于临床推荐量的30倍以上。对照品---选用哈尔滨中药二厂出产的黄莲素片剂。
毒理试验结果---急毒理试验结果表明，刺云实粉提取物毒性很低，最大耐受量(M.T.D)为22.8g/Kg体重/日，该剂量为临床推荐量的250倍，在给药后8小时、24小时直至到第6周的观察中，未见动物出现中毒反应。在42天的连续观察中，试验动物情况良好，活动、食欲、粪便均未见异常，口、眼、鼻、耳无异常分泌物，尿常规、血常规、肝肾功能、体重完全正常。在42天的连续观察后，将2/3的动物处死，解剖，留下1/3动物继续观察了3周，再处死解剖检查，检查结果发现内脏(包括心、肝、脾、肺、肾等脏器)毫无异样，一致正常！长期毒性试验结论认为，以刺云实粉提取物为原料的药用制剂，是一种安全可靠的新药。
4、临床疗效观察4-1病例选择：按随机原则，对流感病患者共130例，设治疗组(100例)与对照组(30例)。
4-2对照组：选用温卅第三制药厂生产的三痰唑核苷。
4-3临床疗效观察结论：以刺云实粉提取物为原料的药用制剂，经临床疗效观察证实，总有效率达93.83％，对流感患者有效率高达96.00％；对成年上呼吸道感染患者有效率达91.67％。它不仅显效快，疗效显著，而且患者均未出现不适及毒副作用。
5、刺云实粉提取物药用制剂的抗炎作用的检验：刺云实粉提取物药用制剂对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的作用。
皮肤毛细血管通透性增高是检验药物是否有抗炎作用的最常用动物模型之一，而且由于炎症反应发生于动物皮肤，故本方法具有可以直接观察炎症变化的优点。
酚类衍生物是刺云实粉提取物的主要有效成分，临床上用于治疗多种急慢性病毒感染炎症，效果好。
取30只小鼠，雄雌各半，体重19-21g，随机均分为三组，每组10只，雄雌各半，用生理盐水为对照，另两组经口服高低两个剂量刺云实粉提取物药用制剂(下表中简称：提取物)，按常规进行操作，对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的作用，实验结果如下表3：表3提取物对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响药物    剂量(mg/kg) 鼠数(只) 蓝斑色泽深浅(级)   蓝斑染料量(μg)生理盐水   ---        10        7.1±2.1          2.00±0.23提取物     20         10        2.1±1.4          1.21±0.10提取物     35         10        2.0±1.1          1.10±0.16从实验结果可以看出，无论以蓝斑色泽深浅(数字小，抗菌作用强)评比，或是蓝斑染料量(μg，数字小，抗菌作用强)进行比较，刺云实粉提取物组动物数值均明显低于生理盐水对照组，表明刺云实粉提取物药用制剂能明显抑制二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高，即其具有朋显消炎功能。
6、刺云实粉提取物药用制剂的免疫作用---巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验巨噬细胞具有强大的吞噬能力。鸡红细胞对鼠类是一种较强的抗原性异物，当将鸡红细胞注入小鼠腹腔后，可引起腹腔巨噬细胞聚集并吞噬鸡红细胞，这是一项机体免疫功能的主要指标，因此可以检验药物对机体免疫能力的影响。
取30只小鼠，雄雌各半，体重19-21g，随机均分为三组，每组10只，雄雌各半，用生理盐水为对照，另两组经口服高低两个剂量刺云实粉提取物药用制剂(简称：提取物)，按常规进行操作，对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力影响的实验。实验结果如下表4：表4：提取物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响药物    剂量(mg/kg) 鼠数(只)    吞噬百分率      吞噬指数生理盐水   ---        10        26.2±2.70    0.501±0.029提取物     15         10        66.4±4.28    0.950±0.219提取物     30         10        68.2±2.08    0.965±0.139从实验结果可以看出，无论以吞噬百分率(数字大，免疫功能增强)评比，或以吞噬指数(数字大，免疫功能增强)进行比较，刺云实粉提取物组动物数值均明显高于生理盐水对照组，表明刺云实粉提取物药用制剂能明显增高对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力，即增高小鼠免疫功能。
经上述研究证实，本发明具有明显抗病毒、抗菌消炎、清热解毒的功能。特别适合于婴儿下呼吸道感染和成人上呼吸道感染等症，并具有明显的扶正培本功效。
称取提取物精粉15克，185克药用淀粉，将二者混合均匀，灌装成1000粒胶囊，铝塑压板后，经8K强度辐照消毒灭菌，包装即完成整个研制过程，每1粒含精粉15mg。
2、取刺云实粉经30％丙酮提取4次，常规过滤后，在50℃左右减压(0.08Mpa)浓缩成膏状，用乙酸乙醋萃取4次，经100-300目硅胶柱层析纯化，分出活性分，此为剌云实粉提取物精粉，含65-90％酚类衍生物。
称取提取物精粉16克，184克药用淀粉，将二者混合均匀，灌装成1000粒胶囊，铝塑压板后，经8K强度辐照消毒灭菌，包装即完成整个研制过程，每1粒含精粉16mg。
3、取剌云实粉经70％丙酮提取4次，常规过滤后，在40℃左右减压(0.06Mpa)浓缩成膏状，用乙酸乙醋萃取4次，经200-300目硅胶柱层析纯化，分出活性分，此为剌云实粉提取物精粉，含75-97％酚类衍生物。
称取提取物精粉14克，药用混合赋形剂186克(内含糊精71.9克，淀粉71.9克，糖粉36.2克，氢氧化铝凝胶6.1克)。将二者混合均匀，采取全粉末直接压片法，压制成1000片，每片含取提取物精粉14mg，装瓶后，经辐照消毒灭菌，包装即完成整个研制过程，每1粒含精粉14mg。
下面是几个典型病例的摘录资料：1，王云鹤：男，60岁，工人、退休。主要症状：持续发烧三天38-39℃之间，嘴角起泡疹，呼吸吃力，不思饮食，咳嗽。诊断为病毒感性重感冒、轻度支气管炎。服用病毒消(胶囊)，每日三次每次2粒，3天病情得到控制，精神逐渐好转，8天后症症状基本消失。
2，李怡怡，女，2岁，主要症状：突然发烧39℃左右，不愿进食，咳嗽、哭闹。家长开始服用一般小儿退烧药，几乎无效，经医生诊断为病毒感染引起支气管炎。服用病毒消(胶囊)及维生素C，病毒消胶囊每日4次每次1粒，维生素C每日2次(早晚各服1次)每次1粒，2天后病情得到控制，情绪安定，不再哭闹，愿意进食，6天后痊愈。
4、李家发，男，45岁。主要症状：咳嗽，打喷嚏，流清鼻涕，全身乏力，嗜睡，发烧三天38℃。诊断为流感。服用病毒消(胶囊)及复合维生素，病毒消每日三次每次2粒，复合维生素每日三次每次2粒，8天后痊愈。
4、张芳，女，12岁，发热、头痛、咽痛3天，加重伴咳嗽2天后服用病毒消(胶囊)，每天三次，每次2粒，2天后病情缓解，6天后痊愈。