发明概述
本发明涉及一种识别神经元烟碱性受体配体的方法，特别是NNR 配体，其具有使NNR调节副作用或良好耐受性副作用低发生率的显著 可能性。本发明的方法包含提供一种化合物的步骤，该化合物对α4β2 NNR亚型表现出选择性，这种化合物还对体外表达的NNRs表现出弱的 激动剂活性。表明这些性能的化合物表现出表明有益认知作用的显著可 能性，该有益的认知作用与NNR调节活性有关，例如认知上的正面效 果。例如，这些化合物可以对病症和疾病表现出有益的治疗效果，所述 病症和疾病的特征在于神经心理(neuropsychological)和认知功能障碍， 例如阿尔茨海默氏病、双相性精神障碍、精神分裂症、情感分裂性精神 障碍，以及特征在于神经心理和认知功能障碍的其它相关疾病。
此外，这些化合物具有保持有益NNR调节作用的显著可能性，例 如对神经心理系统和认知的有益作用，而当与没有表现出对α4β2 NNR 亚型选择性和对体外表达的NNRs表现出弱的激动剂活性的NNR配体 相比时，表现出对NNR调节副作用减少的倾向。因而，通过本发明的 方法识别的化合物可能与心血管和胃肠道副作用的低发生率有关，其至 少在动物模型中已经得到证实，例如哺乳动物的动物模型中，例如啮齿 动物和灵长目动物模型，并且可以进一步在人类中进行证实，如研究结 果所表明的带来特定的NNR配体，如附录A中所报导的那样，其在此 整个引入作为参考。
此外，一种化合物，其对α4β2 NNR亚型表现出选择性和对NNRs 表现出弱的激动剂活性，并且其可以通过对体外表达的NNRs评价激动 剂活性来证明，可以给予易受或患有一种病症或疾病的哺乳动物或受试 者，其中在所述的病症或疾病中，调节烟碱性受体活性对于提供具有这 种治疗有益处的药物化合物或组合物是治疗有益的。在临床研究中，这 种化合物或组合物可以给予受试者以证明对于病症或疾病的治疗益处， 其中在所述病症或疾病中，调节烟碱性受体活性是有益的。数据可以从 受试者中获得，并评价以提供疗效的统计学支持。这种获得的数据可以 提交给具有职权的管理机构，以评价和管理药物化合物或产品，以便获 得制造或销售所需药物化合物的许可。
所述化合物，组合物，识别这些化合物的方法以及使用所述化合物、 组合物的方法，或从这些化合物或组合物给予哺乳动物或受试者中获得 的数据，将在下面进一步描述，例如在下面的详细说明部分。
发明的详细描述
本发明的方法
本发明的一种方法涉及一种识别神经元烟碱性受体配体的方法，特 别是对α4β2神经元烟碱性受体亚型表现出选择性结合以及还对体外表 达的神经元烟碱性受体表现出弱激动剂活性的神经元烟碱激动剂。该方 法包含步骤：1)评价化合物与α4β2神经元烟碱性受体亚型的选择性结 合；2)评价化合物刺激离子通道流量到表达α4β2、α3β4或α3β2神经元 烟碱性受体亚型的细胞中的能力；3)以及识别一种化合物，其选择性结 合α4β2神经元烟碱性受体亚型并表现出刺激离子通道流到表达α4β2、 α3β4或α3β2神经元烟碱性受体亚型的细胞中的弱能力。
该化合物可以使用各种方法评价与α4β2 NNR亚型的结合。可以理 解，开发神经元烟碱性受体配体，特别是药物产品领域的熟练技术人员， 在各种适合于测定化合物是否与α4β2以选择性方式结合的方法中，将 能够评价选择性α4β2 NNR亚型结合。
评价体外选择性α4β2 NNR亚型结合的一种方法是通过评价化合物 从大鼠脑膜制剂中替换[3H]-野靛碱的能力。该方法可以在任何合适的结 合条件下完成。对[3H]-野靛碱结合的合适结合条件的例子已经在本领域 中描述过，例如在至少美国专利号5,948,793；5,914,328和6,809,105中， 其步骤在此全部引入作为参考。IC50和Ki值可以根据在[3H]-野靛碱结合 试验中获得的数据确定。优选地，对于该方法的化合物对[3H]-野靛碱结 合位点表现出小于30nM的结合亲和力，更优选小于15nM的结合亲和 力。
另一种可选择的方式是，可以使用适合于评价化合物对α4β2选择 性结合的其它方法。这些方法可能在优选的如所述试验测定的结合亲和 力数量方面进行变化。然而，在考虑所选化合物在合适的对于评价化合 物认知增强作用或通过使用化合物所表现出的其它NNR调节治疗益处 和副作用的体外或动物模型中的作用后，本领域熟练技术人员将能够确 定对于感兴趣的任何特定α4β2选择性结合试验的优选水平。
使用各种方法，该化合物可以评价刺激离子通道流入表达α4β2、 α3β4或α3β2神经元烟碱性受体亚型的细胞中的能力。在本领域中可以 理解，开发神经元烟碱性受体配体、特别是药物产品的本领域熟练技术 人员，在各种适合于测定离子通道流量的方法中，将能够评价化合物刺 激离子通道流入细胞的能力，该细胞表达α4β2、α3β4或α3β2神经元烟 碱性受体亚型。
评价离子通道流量的一种方法是通过激活离子流入细胞，所述细胞 表达重组体α4β2、α3β4或α3β2 NNR亚型。或者，表达NNRs的天然细 胞系也可能是合适的。该方法可以在任何合适的结合条件下完成。对 [3H]-野靛碱结合的合适结合条件的例子已经在本领域中描述，例如至少 在美国专利号6,403,575和6,133,253中描述，其步骤在此全文引入本文 作为参考。可以对从这些离子通道流量试验中获得的数据进行评价，以 确定最大烟碱响应百分比(％)，其直接与最大激动剂效力百分比相关。 优选地，对于该方法的化合物表现出小于40％的最大激动剂效力。
可以使用评价离子通道流量的其它方法。这些方法可能在由所述试 验测定的最大激动剂效力百分比方面进行变化。然而，对于任何感兴趣 的特定的离子通道流量试验，在考虑后所选化合物在合适的体外或动物 模型中的效果，所述体外或动物模型用于评价化合物认知增强作用或通 过使用该化合物所表现出的其它NNR-调节治疗益处和副作用，本领域 熟练技术人员将能够测定最大激动剂效力百分比的优选水平。
在考虑选择性α4β2结合和前面所述的离子通道流量方法，可以识 别神经元烟碱性受体配体，其表现出选择性结合α4β2神经元烟碱性受 体亚型以及表现出对在体外表达的神经元烟碱性受体的弱激动剂活性。
表现出这些性能的化合物具有显著可能性，该显著可能性表现出与 NNR调节活性有关的有益认知作用，例如对认知的正面效果，包括，但 不限于，所述病症和疾病的特征在于神经心理和认知功能障碍，例如阿 尔茨海默氏病、双相性精神障碍、精神分裂症、情感分裂性精神障碍， 以及特征在于神经心理和认知功能障碍的其它相关疾病的有益治疗效 果。
此外，当与没有表现出对α4β2 NNR亚型选择性以及对体外表达的 NNRs表现出弱的激动剂活性的NNR配体相比时，这些化合物表现出对 NNR调节副作用减少的倾向。因而，由本发明的方法识别的化合物可能 与心血管和胃肠道副作用的低发生率有关。这些化合物可以给予易受或 患有病症或疾病的哺乳动物或受试者，其中调节烟碱性受体活性对于提 供表现出这些治疗益处的药物化合物或组合物，治疗是有益的，例如， 在临床研究中。这种化合物或组合物可以给予受试者以证明对于病症或 疾病的治疗益处，其中在所述病症或疾病中，调节烟碱性受体活性是有 益的。数据可以从受试者中获得，并评价以提供疗效的统计学支持。这 种获得的数据可以提交给具有职权的管理机构，以评价和管理药物化合 物或产品，以便获得制造或销售所需药物化合物的许可。合适的药物化 合物可以通过将该化合物加入到药学上可接受的载体中获得。
在本发明的药物组合物中，化合物或活性组分的实际剂量水平可以 变化，以便获得有效的活性化合物(们)的数量，这种数量对于特定的患 者、组合物和给药模式实现所需的治疗响应是有效的。所选剂量水平将 取决于具体化合物的活性、给药途径、所治疗病症的严重程度以及所治 疗患者的条件和之前的病史。然而，在本领域的技术范围内就会将化合 物的起始剂量设在比达到所需疗效所需较低的水平，然后会逐步增加剂 量，直到达到理想的效果为止。
当在上述或其它治疗中使用时，治疗有效量的本发明化合物之一可 以以纯的形式使用，或者以药学上可接受的盐、酯、酰胺或前药形式使 用，如果这些形式存在的话。或者，所述化合物可以以药物组合物的形 式给药，所述药物组合物含有该感兴趣的化合物以及一种或多种药学上 可接受的载体。本发明化合物的短语“治疗有效量”是指化合物的数量 足以治疗疾病，并且在可施用于任何医学治疗的合理益处/风险比下。然 而，可以理解，本发明的化合物和组合物的总日用量将由主治医师在合 理医学判断的范围内决定。对于任何特定的患者，具体的治疗有效剂量 水平将取决于各种因素，包括所治疗的疾病和该疾病的严重程度；所使 用的特定化合物的活性；所使用的特定组合物；患者的年龄、体重、一 般健康状况、性别和饮食；给药时间、给药途径、以及所使用特定化合 物的排泄率；治疗的持续时间；联合用药的药物或与所使用的特定化合 物一起同时使用的药物；以及在医学领域中公知的类似因素。例如，完 全在本领域的技术范围内就会将化合物的起始剂量设在比达到所需疗 效所需较低的水平，然后会逐步增加剂量，直到达到理想的效果为止。
给予人或低等动物的本发明化合物的总日剂量在约0.001mg/kg体 重至约1g/kg体重的范围内。更优选的剂量可以在约0.10mg/kg体重至 约100mg/kg体重的范围之内，更优选1mg/kg体重至约20mg/kg体重， 尤其更优选0.05mg/kg体重-约0.5mg/kg体重。如果需要的话，为了给 药，可以将该有效日剂量分成多剂量。因此，单剂量组合物可以含有这 样的数量或其分倍数(submultiples)以补足日剂量。
本发明的化合物
适合于本发明的化合物可以是对α4β2神经元烟碱性受体亚型表现 出选择性结合以及还对在体外表达的神经元烟碱性受体表现出弱激动 剂活性的任何化合物，除非该化合物是神经元烟碱性受体拮抗剂，例如 二氢-β-刺桐碱氢溴酸盐(DHBE)。合适化合物的例子是，例如，ABT-089， 其是2-甲基-3-(2-(S)-吡咯烷基甲氧基)吡啶，具有下面的结构：

并表现出结合亲和力Ki为14nM，其在美国专利号5,948,793中进一步 描述，其在此全文引入本文作为参考。
用于该方法的另一个合适的化合物是，例如，化合物(R，R)-1-(吡啶 -3-基)-八氢-吡咯并[3，4-b]吡咯，具有下面的结构：

并表现出结合亲和力Ki为8.8nM，其在美国专利号6,809,105中进一步 描述，其在此全文引入本文作为参考。
用于该方法的还有另一合适的化合物是，例如，具有下面结构的化 合物：

并表现出结合亲和力Ki为0.04nM，其在美国专利号6,127,386中进一 步描述，其在此全文整个引入本文作为参考。
用于该方法的另一合适的化合物是，例如，具有下面结构的化合物：

并表现出结合亲和力Ki为1.5nM，其在美国专利号6,809,105中进一步 描述，其在此全文整个引入本文作为参考。
这些化合物具有所表现出的选择性α4β2神经元烟碱性受体亚型结 合和刺激离子通道流入表达α4β2、α3β4或α3β2 NNR亚型的细胞中的弱 能力。每一化合物在自由血浆浓度水平(free plasma concentration levels) 下在神经元烟碱结合Ki的10倍内表现出效力。因此，作为本发明的一 部分，本发明还考虑规定对于这些化合物的给药的靶标血浆浓度水平。 因而，本发明提供一种识别和使用化合物以提供最大效力的方法。
此外，在如实施例，特别是实施例3，中所附的研究结果所证明的 那样，化合物ABT-089在人临床研究中表现出效力，如使用Connor’s 成年ADHD等级量表(CAARS)评价的那样，并且是良好耐受的。评价 ABT-089效力的方法和材料，表现出与α4β2神经元烟碱性受体亚型选 择性结合并且对体外表达的神经元烟碱性受体表现出弱激动剂活性的 化合物，在本文所述实施例中进行描述。
这样的人临床数据可以提供给管理机构，以便获得管理授权。该数 据可以提供给对药物化合物或产品或两者具有评价或管理或两者职权 的管理机构，以便从该管理机构获得许可制造或销售所需的药物化合 物。当它与ABT-089人临床数据有关时，这种数据可能是特别有用的， 更特别是当所述人临床数据与随机、双盲、安慰剂对照多次剂量研究有 关时。此外，这种人临床数据可以用来提供与从管理机构获得的许可制 造或销售所需药物化合物相关的药物产品。这种数据是特别有用的，当 该药物产品用于治疗患有病症的哺乳动物，其中在所述病症中，调节烟 碱乙酰胆碱受体活性是治疗上有益的，其中所述病症是阿尔茨海默氏 病、双相性精神障碍、精神分裂症或情感分裂性精神障碍。
本发明的组合物
本发明也提供药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的所需化合 物以及与其联合的药物可接受的载体。所述组合物包含与一种或多种无 毒药物可接受的载体配制在一起的本发明化合物。药物组合物可以配制 成固体或液体形式供口服给药、胃肠外注射或直肠给药用。
在此所使用的术语“药物可接受的载体”是指无毒惰性固体、半固 体或液体填充剂、稀释剂、胶囊用材料或任何类型的制剂用助剂。可用 作药物可接受的载体的材料的一些实例是：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗 糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲 基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉状西黄蓍胶；麦芽；明胶； 滑石粉；可可脂和栓剂用蜡；油脂，例如花生油、棉籽油、红花油、芝 麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二元醇类；例如丙二醇；酯类，例如 油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海 藻酸；无热源水；等渗盐水；林格氏液；乙醇和磷酸盐缓冲液、以及其 它无毒相容性润滑剂，例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、 释放剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂，按照制剂领域的熟练技术 人员的判断，组合物中也可以含有防腐剂和抗氧化剂。
本发明的药物组合物可以通过口服、直肠、胃肠外、脑池内、阴道 内、腹膜内、局部(通过粉剂、软膏剂或滴剂)、颊(bucally)或作为口腔或 鼻腔喷雾剂方式给予人和其它哺乳动物。本文所用的术语“胃肠外”是 指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下、关节内注射和输注的给 药模式。
供胃肠外注射用的药物组合物包含药物可接受的无菌的水溶液剂 或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，以及用于重建到无菌注射用溶 液或分散体中的无菌粉剂。合适的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋 形剂的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等，及其合 适的混合物)、植物油(例如橄榄油)、注射用有机酯类(例如油酸乙酯)或 其合适的混合物。例如可以通过使用包衣材料(例如卵磷脂)、通过在分 散剂的情况下维持所需粒径、和通过使用表面活性剂，来维持组合物的 适当流动性。
这些组合物也可含有辅料，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。 要想确保防止微生物作用，可以通过添加各种抗菌剂和抗真菌剂，例如 对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等。组合物中最好还可以 包含等渗剂，例如糖、氯化钠等。通过使用延迟吸收的试剂(例如单硬脂 酸铝和明胶)，可以达到注射药物形式的延迟吸收。
在某些情况下，为了延长药效，常常期望使皮下或肌内注射的药物 吸收放缓。可通过使用含有水溶性差的晶体或无定形材料的液体混悬 剂，来达到该目的。药物吸收速率还可以取决于其溶出率，而溶出率又 可以取决于晶体大小和晶型。或者，可以通过将药物溶解或悬浮在油性 赋形剂中，来给予供胃肠外给药的药物形式。
混悬剂中除了含有活性化合物外，还可含有悬浮剂，例如乙氧基化 异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨坦酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、皂 土、琼脂、西黄蓍胶及其混合物。
如有必要，以及为了更有效的分布，可以将本发明化合物掺入到缓 释或靶向给药系统例如聚合物基质、脂质体和微球体中。它们可以进行 灭菌处理，例如通过用阻截细菌的滤器进行过滤，或者通过加入无菌固 体组合物形式的消毒剂，所述组合物可以在临用前立即溶于或分散在无 菌水或某些其它无菌注射用介质中。
注射用储剂(depot)形式是通过在生物可降解聚合物中形成药物的 微囊基质而制得，所述生物可降解聚合物例如聚交酯-聚乙醇酸交酯。根 据药物与聚合物的比例和所用的特定聚合物性质不同，可以控制药物释 放速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。储剂的 注射剂也可通过将药物包封在脂质体或机体组织相容性微乳剂中而制 得。
注射制剂可以进行灭菌处理，例如通过用阻截细菌的滤器进行过 滤，或者通过加入无菌固体组合物形式的消毒剂，所述组合物可以就在 临用前溶于或分散在无菌水或其它无菌注射用介质中。
注射制剂例如无菌注射含水或含油混悬剂，可以按照已知技术、采 用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制。无菌注射制剂也可以是溶于 无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂(例如1，3-丁二醇溶液)的无菌注射溶 液剂、混悬剂或乳剂。在可接受的赋形剂和溶剂中，可以使用的有水、 林格氏液、美国药典(U.S.P)和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的固定油类 被常规用作溶剂或悬浮介质。为了该目的，可以使用任何温合(bland) 的固定油，包括合成的单甘油酯或甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可用 于制备注射制剂。
供口服给药用固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。 在所述固体剂型中，一种或多种本发明化合物可以与至少一种惰性的、 药物可接受的载体(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下成分混合：a)填 充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和水杨酸；b) 粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和 阿拉伯胶；c)保湿剂，例如甘油；d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃 薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂例如 石蜡；f)吸收加速剂，例如季铵化合物；g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬 脂酸甘油酯；h)吸收剂，例如高岭土和皂土粘土；和i)润滑剂，例如滑 石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合 物。就胶囊剂、片剂和丸剂而论，该剂型也可包含缓冲剂。
使用乳糖或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇，相似类型的 固体组合物也可用作软质和硬质填充明胶胶囊剂的填充剂。
片剂、锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂等固体剂型可通过包衣和壳(例 如肠溶衣和药物制剂领域众所周知的其它包衣)来制备。它们可任选含有 遮光剂，也可以是仅仅或优选在肠道的某部位以延迟的方式释放活性成 分的组合物。可用于延迟释放活性剂的材料的实例包括聚合物和蜡。
供口服给药用液体剂型包括药物可接受的乳剂、微型乳剂、溶液剂、 混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型中除了含有活性化合物外，还可含有 本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂例如乙 醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3- 丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、 橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨坦的脂肪 酸酯及其混合物。
口服用组合物中除了含有惰性稀释剂外，也可包括辅料例如润湿 剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂。
本发明的化合物也可以脂质体形式给药。正如本领域已知的，脂质 体通常衍生自磷脂或其它脂质物质。脂质体是通过分散在水性介质中的 单层或多层水合液晶而形成。任何无毒的、生理上可接受和可代谢的并 能形成脂质体的脂质都可以使用。脂质体形式的本发明组合物除了含有 本发明化合物外，还可含有稳定剂、防腐剂等。优选的脂质为天然和合 成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，单独使用或一起使用。
形成脂质体的方法是本领域已知的。参见例如Prescott编著， Methods in Cell Biology，第XIV卷，Academic Press，New York，N.Y. (1976)，第33页，以及其下等等。
本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药物可接受的盐、 酯或酰胺的形式来使用。本文所用的术语“药物可接受的盐、酯和酰胺” 包括在合理的医学判断范围内，适用于接触人体组织和低等动物组织而 没有过高毒性、刺激性、过敏反应等、具有合理的利益/风险比并且对其 预期用途有效的本发明化合物的盐、两性离子、酯和酰胺。
术语“药物可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内，适用于接 触人体组织和低等动物组织而没有过高毒性、刺激性、过敏反应等、具 有合理的利益/风险比的那些盐。药物可接受的盐是本领域众所周知的。 所述盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化期间就地制备，或者可以 通过使游离碱官能基(function)与合适的有机酸反应后分离而制得。
代表性的酸加成盐包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬 酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸 盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸 盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐(羟乙磺 酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸酯、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、 双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸 盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳 酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。
另外，碱性含氮基团可以用诸如以下的试剂季铵化：低级烷基卤， 例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸 酯，例如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基的硫酸酯；长链卤化物，例 如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物； 芳基烷基卤，例如苄基和苯乙基的溴化物等等。因而得到水溶性或油溶 性或可分散的产物。
可用于形成药物可接受的酸加成盐的酸的实例包括无机酸和有机 酸，无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，有机酸例如草酸、马来酸、 琥珀酸和柠檬酸。
碱加成盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化期间就地制备，即 通过使含羧酸的部分与合适的碱例如药物可接受的金属阳离子的氢氧 化物、碳酸盐或碳酸氢盐反应，或者与氨或有机伯、仲或叔胺反应。药 物可接受的盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子的盐，例如 锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等，以及无毒季铵和胺阳离子， 包括铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙 胺、乙胺等。可用于构成碱加成盐的其它的代表性有机胺包括乙二胺、 乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
本文所用的术语“药物可接受的酯”是指能在体内水解的本发明化 合物的酯，包括易于在人体内分解并释放母体化合物或其盐的酯。本发 明的药物可接受的无毒酯的实例包括C1-C6烷基酯和C5-C7环烷基酯， 尽管优选C1-C4烷基酯。本发明化合物的酯可按照常规方法来制备。药 物可接受的酯可以通过将含有羟基的化合物与酸和烷基羧酸(例如乙酸) 或与酸和芳基羧酸(例如苯甲酸)反应而连接到羟基上。对含有羧酸基团 的化合物而言，药物可接受的酯可以由含有羧酸基团的化合物来制备， 即通过使所述化合物与碱(例如三乙胺)和烷基卤、三氟甲磺酸烷基酯， 例如与甲基碘、苄基碘、环戊基碘反应。它们也可通过使所述化合物与 酸(例如盐酸)和烷基羧酸(例如乙酸)或与酸和芳基羧酸(例如苯甲酸)反 应来制备。
本文所用的术语“药物可接受的酰胺”是指本发明的无毒酰胺，其 衍生自氨、C1-C6烷基伯胺和C1-C6二烷基仲胺。就仲胺而言，胺可以呈 含有一个氮原子的5或6元杂环形式。优选衍生自氨、C1-C3烷基伯酰 胺和C1-C2二烷基仲酰胺的酰胺。本发明化合物的酰胺可以按照常规方 法来制备。药物可接受的酰胺可以由含有伯胺或仲胺基团的化合物来制 备，即通过使含有氨基的化合物与烷基酸酐、芳基酸酐、酰卤或芳酰卤 反应。就含有羧酸基团的化合物而言，药物可接受的酯可以由含有羧酸 基团的化合物来制备，即通过使所述化合物与碱(例如三乙胺)、脱水剂 (例如二环己基碳化二亚胺或羰基二咪唑)和烷基胺、二烷基胺(例如与甲 胺、二乙胺、哌啶)反应。它们也可以通过在脱水条件下、在加入分子筛 时，使所述化合物与酸(例如硫酸)和烷基羧酸(例如乙酸)或者与酸和芳基 羧酸(例如苯甲酸)进行反应而制备。组合物可含有呈药物可接受的前体 药物形式的本发明化合物。
本文所用的术语“药物可接受的前体药物”或“前体药物”是指， 在合理的医疗判断范围内，适用于接触人体组织和低等动物组织而没有 过高毒性、刺激性、过敏反应等、具有合理的利益/风险比并且对其预期 用途有效的本发明化合物的那些前体药物。本发明的前体药物可以在体 内快速转化为本发明的母体化合物，例如通过在血液中水解。详细讨论 提供于T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems，A.C.S. 会议论文集第14卷，和在Edward B.Roche编辑，Bioreversible Carriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press (1987)。
本发明考虑药学活性化合物，或化学合成的或体内生物转化形成的 化合物。
本发明的化合物、组合物和方法通过参考下列实施例和参考实施例 进行更好的理解，这些实施例仅仅是示范性的并不对本发明的范围构成 限制。

实施例
烟碱乙酰胆碱通道受体结合效力的测定
实施例1：[ 3 H]-野靛碱结合试验
修改了以下文献所述步骤的结合条件：Pabreza LA，Dhawan，S， Kellar KJ，[3H]-Cytisine Binding to Nicotinic Cholinergic Receptors(与脑 内烟碱性胆碱能受体结合的[3H]-野靛碱)，在Brain Mol.Pharm.39：9-12， 1991。将来自大鼠脑(去掉小脑)的膜浓缩部分(ABS Inc.，Wilmington，DE) 在4℃缓慢融化，洗涤并重悬于30倍体积的BSS-Tris缓冲液(120mM NaCl/5mM KCl/2mM CaCl2/2mM MgCl2/50mM Tris-Cl，pH7.4，4℃)中。 在500μl终体积中，将含有100-200μg蛋白和0.75nM[3H]-野靛碱 (30Ci/mmol；Perkin Elmer/NEN Life Science Products，Boston，MA)的样品 在4℃孵育75分钟。测定每种化合物的7个对数稀释浓度，各重复测定 两次。在10μM(-)-烟碱存在下，测定非特异性结合。通过使用96孔滤 设备(Packard Instruments，Meriden，CT)，将其真空过滤到预先润湿的玻 璃纤维滤板(Millipore，Bedford，MA)上，分离结合放射性，然后用2ml 冰冷的BSS缓冲液(120mM NaCl/5mM KCl/2mM CaCl2/2mM MgCl2)快 速漂清。向各孔中加入Packard 闪烁混合液(40μL)，用 Packard 仪器进行放射性测定。通过在Microsoft 软件 上进行非线性回归，测定IC50值。根据IC50，使用以下Cheng-Prusoff 方程，计算Ki值：其中Ki＝IC50/1+[配体]/KD]。
烟碱乙酰胆碱通道受体通道离子流量的测定
实施例2：IMR-32试验
将IMR-32人成神经细胞瘤克隆细胞系的细胞(ATCC，Rockville， 马里兰，美国)根据所建立的步骤保持在对数生长期。实验细胞以500,000 细胞/mL的密度接种到24孔组织培养皿中。将平铺后的细胞增殖至少 48小时，接着与2μ Ci/mL的86Rb+(35Ci/mmol)一起在37℃负载过夜。 除在86Rb+负载、冲洗和激动剂诱导流出步骤期间使用无血清达尔伯克 (氏)改良伊格尔(氏)培养基外，该86Rb+流出试验根据之前公开的方案 (Lukas，R.J.，J.Pharmacol.Exp.Ther.，265，294-302，1993)进行。数据反映 86Rb+流量在1μM浓度下的激活，以及反映由(S)-尼古丁引起的作为最 大响应的百分比的响应。该数据如此解释，以致响应越大，外周神经节 受体激活更有效，其进一步解释表明，在体内将更有效地促进不希望作 用的发生，例如在心血管或胃肠系统中，或两者中。
神经元烟碱性受体部分激动剂用于治疗成人ADHD的探索性研究
实施例3：设计探索性研究以评价ABT-089，一种神经元烟碱性受体(NNR) 部分激动剂，作为用于成人注意力缺陷多动症(ADHD)的治疗。方法： 成人给予ADHD可接受的安慰剂，2mg、4mg或20mg的ABT-089两周，每 个都在随机、双盲、安慰剂-对照的4x4拉丁方设计，总共8周。除原发性 结果外，完成Conner成人ADHD等级量表(CAARS)、第二等级量表、神 经心理和安全性评估。结果：总共11位具有良好表征ADHD的成人完成 了此交换研究。对于CAARS总症状得分，ABT-089优于安慰剂，其是基 础终点(安慰剂：38.0±-1.9；2mg每日两次(bid)：32.2±-1.9，单尾p＝ 0.021；4mg每日两次：33.2±-1.9，p＝0.047；20mg每日两次：33.5±-1.9， p＝0.056)。对于CAARS ADHD指数和多动/冲动得分以及临床综合印象 量表-ADHD严重程度得分，ABT-089也优于安慰剂。在临床效力终点， 观察CAARS总症状得分和CAARS多动/冲动得分，一浅反V型剂量-响应 曲线。然而，注意力和记忆效应的剂量-响应曲线通过电脑化认知测试测 定似乎是剂量-线性的。在安全评估或副作用曲线方面，没有观察到临床 有意义的发现。结论：由该探索性研究的数据表明，ABT-089在治疗成 人ADHD方面可能是有效的并且具有良好的耐受性。基于这些满意的结 果，保证了进行更长时间的更大平行组ABT-089研究。
引言
注意力缺陷-多动症(hyperactivity)(ADHD)的特征为核心症状为多 动、注意力不集中和行为冲动。在学龄儿童中，在世界范围内，它的发 病率估计为6-8％(Faraone等2003)，在童年发病的个体中，约50％个体 的症状持续到成年(Barkley等2002；Wilens等2004)。最新的流行病学 数据表明，在美国，约4.7％的成人出现ADHD(Kessler等，正在印刷)。 集合数据也支持，成人ADHD与该疾病的童年形式共享许多表型的和遗 传型的相似性(Faraone等2005；Spencer 2004)。此外，由于在跨越终身 反应方面的药理学相似性(Spencer 2004)和将新化合物暴露于青少年的 道德考虑，ADHD成人已经越来越用于早期药理学试验。
成人ADHD与教育、职业、婚姻困难和并存性精神错乱如药物滥用、 抑郁症、焦虑和人格障碍有关(Barkley 2002；Biederman 2004；Wilens 等1995)。此外，在未治疗的ADHD成人中，疾病成本数据将大大超过 与之匹配的ADHD成人-对于医学和社会支出两者(Secnik等2005)。考 虑到在生活质量的功能和功能障碍方面所造成的高水平损伤，ADHD成 人需要对它们的ADHD进行治疗。
目前，治疗成人ADHD主要以使用兴奋性和非兴奋性药物为基础， 以及辅助性结构化心理疗法(Saften等2004)。对于ADHD，虽然可以使 用食品与药品管理署(FDA)批准的药剂以及其它药剂，但是许多个体或 者无法忍受，或者对现有化合物没有反应，因此需要开发具有新作用机 理的可供选择的药剂。
越来越多的兴趣已经集中在烟碱胆碱能系统对认知障碍的作用，包 括ADHD。在ADHD青少年和成人中，除吸香烟是过度代表外，在治疗 ADHD方面，尼古丁及相关类似物已经表现出效力(Conners 1996；Levin 等1996；Wilens等1999)。
例如，ABT-418，一种经皮给药的神经元烟碱性受体(NNR)激动剂， 在32位成人的临床对照试验中，以前表现出在治疗ADHD中通常是有 效的，特别是在治疗注意力/认知缺陷中是有效的(Wilens等1999)。近年 来，一种NNR部分激动剂，ABT-089，的口服形式，已经对所测试的人 是可以获得的。ABT-089与人α4β2 NNRs在体外是非常选择性结合的， 并且对体外表达的NNRs具有弱的激动剂活性。在啮齿动物和灵长目动 物动物模型中，ABT-089已经表现出改善注意力、学习和记忆缺失。该 剂量-响应曲线是U形的，其中效力与5-15ng/mL的血浆水平有关(Rueter 等2004)。类似发现已经在阶段1多剂量人研究中观察到。在此多剂量 研究中，简单反应时间，一种注意力的量度，与安慰剂[M02-411，在 Abbott Laboratories存档的数据]相比，用每日两次在5-40mg范围内的 ABT-089治疗，其得到显著改善。ABT-089在此剂量范围内是良好耐受 的。考虑到这种烟碱类似物对认知损伤的作用，以及考虑到在ADHD中 (特别是青少年和成人)高度的认知功能障碍(Biederman等2000；Millstein 等1997)，使用ABT-089对ADHD进行治疗是引人注目的。
在本文中所报道的是ABT-089在治疗ADHD成人中随机化的、双 盲、安慰剂-对照的交换(crossover)探索性研究的结果。我们的目标是 比较2mg、4mg和20mg ABT-089每日给药两次与安慰剂在ADHD成 人中的安全性和效力。我们假设，该研究的ABT-089阶段，与安慰剂条 件相比，将改善ADHD的核心症状。
在着手更大规模阶段IIb方案之前，本研究设计成探索性的、信号 检测、阶段IIa研究以提供此新化合物的概念证明。因而，选择一种成 本效率的设计，其中相对小数量的受试者将在少量高度经受试验点处进 行研究。保持受试者较少数目并没有损失统计力量的一种所选方法是使 用单尾检验法，以测试药物比安慰剂要好的假说，由此减少20％数目的 受试者。此外，选择交换设计而不是平行组设计，与类似统计力用双尾 检验进行的常规4组(arm)平行剂量-范围研究相比，由此进一步减少 所研究的受试者的数目约十倍。受试者接受安慰剂和三种剂量的 ABT-089。选择剂量的宽范围以最大化信号检测概率。预期相对快速开 始的作用(～1-2小时，在Abbott处存档的数据)，这样每次治疗所给药 的持续时间被限制到两周；然而，该设计确保每一受试者接受不间断暴 露于研究药物4-6周。
在所有受试者完成该试验之前，停止该研究。总共61位受试者进 行了登记，其中11位完成了该研究。本出版物集中于完成整个交换试 验的11位受试者的结果上。其余50位所剩余患者仅仅具有部分数据， 大部分限于该研究的头两周。
方法和材料
受试者-18至60岁的受试者，其符合DSM-IV-TR标准，并且ADHD评 价通过临床交谈并由华盛顿大学的圣路易斯小孩情感障碍和精神分裂 症计划(WASH-U-KSADS)ADHD诊断标准(Orvaschel 1985)(Geller等 1998)证实，有资格包括在本研究中。此外，需要筛选Conner成年ADHD 等级量表(CAARS)(Conners等1999)中子等级中的至少一个，9项中至少6 项的得分≥2，以及第一天筛选在临床综合印象量表-ADHD严重程度 (CGI-ADHD-S)测试(Guy 1976)中得分≥4(即，至少中等严重程度)。排 除标准由下面组成：在登记前的三个月内尼古丁产品的吸烟者或使用 者；临床意义的慢性医学病症；情感分裂性精神障碍或双相性精神障碍、 强迫观念与行为障碍、精神分裂症或其它精神障碍的当前诊断或病史； 需要治疗的当前抑郁症；严重的杀人或自杀思维；异常基线实验值；最 近三个月内药物或酒精滥用/依赖性；目前使用精神药物或兴奋药；和怀 孕或哺乳妇女。下列institutional review boards at Quorum IRB in Seattle， WA，The Human Research Committee at the Lawrence House in Boston， MA，the Institutional Board of Research Associates at the NYU School of Medicine in New York，NY，the New York Campus，VA NY Harbor Healthcare Systems Subcommittee for human subjects，research and development subcommittee，and research safety subcommittee in New York， NY，the University of Vermont Committee on Human Research in Burlington，VT，the Scientific Advisory Committee of Burlington，VT，和 the University of Chicago Hospitals IRB in Chicago，IL同意该研究方案， 并且所有受试者提供书面的、告知的同意意见。
设计-在最初两周药物冲洗和屏蔽时期后，受试者进入一个八周双盲 的治疗时期。将合格的受试者随机(根据中央计算机产生的随机化安排) 分成四个治疗顺序之一个，其中它们接受ABT-089 2mg、4mg、20mg 以及匹配安慰剂，每组每日两次(在早餐前30分钟和8小时后)给药两周， 在治疗之间没有冲洗。研究设计方案在下表1中提供。
评价-在开始研究前，训练并证明CAARS评价者。调查者-执行的 CAARS、CGI-ADHD-S、Hamilton焦虑量表(HAM-A)(Hamilton 1959)和 Hamilton抑郁症量表(HAM-D)(Hamilton 1960)以基线给予受试者，并在 每一治疗周期(第14、28、42和56天)完成。CAARS、HAM-A和HAM-D 评级基于之前的七天。训练后，将受试者完成电脑化认知评价组(Simpson 等1989)，其进行修正以包括Conner连续作业测验(Conners 1995)和 Stroop Color Word测试(Jensen和Rohwer 1966)，在基线时和在完成每一 治疗周期时。评价项目如注意力任务(简单和选择反应时间，数字警惕)， 选择性注意(Conner’s CPT)，工作存储任务(数字和空间工作存储，快速 直观信息处理)，阵发性辅助存储(立即的和延迟单词回忆，单词和图象 识别)，运动控制任务(跟踪)，和执行功能(Stroop作用)。
在第一天的第0、1、2、4和8小时以及在每次给药周期的最后一 天给药后约2小时采集药物动力学分析用血样。所采集的血样立即存储 在4℃或以下。将血样用冷冻离心机在1小时收集时间内进行离心，分 离血浆。将血浆样品用塑料移液管转移到塑料瓶中。将血浆样品在-20 ℃冷冻离心一小时，并保持冷冻，直到送至Abbott实验室进行分析为止。
由不利事件的自发报告进行安全评价；此外，实验室数据(血液学、 化学、尿分析)、生命特征和心电图(BCGs)在基线时和在每一治疗周期 的末端完成。
统计-最初效力终点是在每一治疗周期的最后一天所获得的CAARS 总ADHD症状得分(注意力不集中和多动/冲动得分之和)。使用固定期限 的方差分析(ANOV A)模型评价治疗差异，该模型适合于治疗、周期和 顺序以及在顺序内受试者的随机效应。第二效力测量(ADHD指数， CAARS多动/冲动得分，CAARS注意力不集中得分，CGI-ADHD-S， HAM-A，HAM-D)的治疗差异，以及在每一治疗周期的末端所获得的电 脑化认知评价组)和平均实验室、生命特征和心电图(ECG)数据也通过 ANOV A进行评价。在ANOV A模型的框架内，每一剂量的ABT-089 与安慰剂相比。在本概念证明研究中，对多重比较没有进行修正。效力 统计试验是单侧的；p-值≤0.050被认为是统计上显著的，在0.051和 0.010之间被表明是具有统计趋势的。
之前(priori)选择单尾检验，因为用双尾检验进行全尺寸平行组剂 量-范围试验将基于与安慰剂相比ABT-089至少表现出改善。0.37的假 定作用大小与ADHD成人在治疗2-10周后的阿托西汀多中心试验结果 相符(Michelson等2003)。根据得分的公开的测试/再测试可靠性结果， 0.5的受试者内相关性被认为是相关性的下限。
在本研究中采用Williams设计，拉丁方设计的一种类型(Senn 1993)。Williams设计是交换(crossover)设计的一个特例，其中每一治 疗在所有其它治疗前面有一个相同数目的次数，并且考虑不相等残留效 果的评价。本设计的动力依赖完成全部四个治疗时期的所有受试者。对 于0.37的作用大小和0.5的受试者内相关性，完成所有治疗的48位受 试者的样本大小将检测ABT-089剂量相对于安慰剂的优越性，其中80％ 动力在单尾测试中α＝0.05。双尾检验的平行组阶段IIb剂量范围试验需 要每治疗组130位受试者，总共520位受试者。
在研究期间，为了使受试者不会没有超过2周的积极治疗(即，研究 治疗时期的四分之一为安慰剂)，并允许用“活性”药物连续治疗至少4 周，在连续时期的剂量间没有冲洗间隔。如果没有消除，在治疗2周的 末端进行的评价应该具有最小的遗留。如果存在不相等遗留的证据，那 么研究所选的顺序将在分析中允许调整。
经验作用大小计算CAARS总分，作为每一ABT-089剂量对安慰剂 的平均差值除以差值得分的标准偏差。
结果
人口分布和疾病史-总共61位受试者进行了登记，并且在过早终止待 定其它临床前数据之前，11位受试者完成了研究。由于不利的事件眩晕 (在研究的第2天，虽然服用ABT-089 2mg)，仅有一位受试者过早地停止 研究，其中所述调查员认为可能与研究药物或伴随急剧使用酒精和违禁 药物有关。一位受试者在研究期间收回了同意书，一位受试者失去了跟 踪，剩下的47位受试者当发起人停止该研究时过早地中止了。大部分这 些受试者仅治疗5-14天，因此将不包括在分析中。假使Williams交换 (crossover)设计的统计功效需要受试者完成全部治疗周期，使用11位 完成研究的受试者的数据集进行效力分析，其包括6位男性和8位高加索 人，其平均(±SD)年龄为32.0(10.15)岁。5位受试者与ADHD具有第一级 (first degree)关系。3位受试者至少一生并存精神疾病，其中所有3位都报 道患有抑郁症。
在基线，6位受试者符合CAARS注意力不集中亚型DSM-IV标准， 5位受试者符合混合亚型标准，没有受试者符合CAARS多动/冲动亚型 标准。在基线，对于总分来说，平均CAARS得分是39.1(8.08)，对于 注意力不集中子量表来说，平均CAARS得分是22.6(3.14)，以及对于 多动/冲动子量表来说，平均CAARS得分是16.5(6.09)，以及对于ADHD 指数来说，平均CAARS得分是25.4(4.74)。受试者既不极度焦虑(HAM-A ＝7.1±5.15)，也不抑郁(HAM-D＝5.5±3.50)。完成试验的受试者的基线 特征在下表2中提供。与年龄相当的健康对照组相比，在个体注意力任 务内反应在损害反应次数上，它们在某些电脑化认知评价上受到损害。
治疗效果-在最后治疗那天，ABT-089 2mg和4mg，每日给药两次， 观察对CAARS总症状得分的统计上显著的治疗效果(对安慰剂)，对于 ABT-089 20mg每日两次响应接近统计显著性水平(p＝0.056)，其将在下 表3中进行报道。对于2mg，4mg，和20mg每日两次的剂量，其效果 大小分别是0.92、0.76和0.71。当所述数据通过CAARS子量表进行分 析时，仅在治疗2周后，在所有剂量水平下，都观察到对ADHD指数的 统计上显著的改善(～17％改善对安慰剂)，以及在ABT-089 2mg和4 mg剂量中，观察到多动/冲动得分(～20％改善对安慰剂)。对于2mg 和20mg剂量，在CAARS注意力不集中得分方面注意到改善的趋势， 其对安慰剂得分的改善约11％。对于CAARS总症状得分和CAARS多 动/冲动分量表，该剂量响应曲线具有浅反转的U形，类似于动物数据。 然而，对于CAARS注意力不集中子量表，没有观察到剂量响应。
对于初级终点，对安慰剂的响应在全部四个治疗时期都类似，表明 没有学习效果或时间效果(时期1：[n＝3]36.7，时期2：[n＝4]38.5，时 期3：[n＝2]40.5，时期4：[n＝2]35.5)。在有效剂量中，当治疗时间更 长时，治疗效果似乎更大。
对于CGI-ADHD-S，在2mg(p＝0.031)和4mg(p＝0.093)剂量后，而 不是20mg剂量(p＝0.112)后，观察到ABT-089有利于安慰剂的治疗差异。 与3.92(0.20)2mg剂量治疗后、4.09(0.20)4mg剂量治疗后和4.12(0.20) 20mg剂量治疗后相比，安慰剂治疗后的平均得分是4.47(0.20)。ABT-089 对HAM-A或HAM-D得分没有影响。
认知评价-在本小样本中，电脑化认知评价结果表明，ABT-089对于 注意力和记忆效应的剂量-反应曲线似乎是剂量-线性的。对于数字工作 记忆灵敏度指数，与安慰剂(0.882±-0.022；P＝0.091)相比，存在有利 于ABT-089 20mg(0.923±-0.022)的趋势。对于空间工作记忆，用 ABT-08920mg观察到灵敏度指数统计上显著改善(0.966±0.031对安 慰剂：0.892±0.031，p＝0.021)和其中2mg(0.937±0.031，P＝0.074)和 4mg(0.946±0.031，p＝0.052)的趋势。对于信息加工，基于速度存在有 利于ABT-089 20mg的趋势(516.3±12.7对安慰剂：544.1±12.7，p＝ 0.065)，但在所测目标百分比或误报警数目的剂量间没有差别。在选择 性注意力集中测定中(连续作业测验)，在所有ABT-089剂量水平下对于 commission误差数目可以观察到统计上显著改善，其当响应对非目标刺 激时出现。其它来自连续作业测验的有利于ABT-089治疗剂量差异包括： 对于注意力集中2mg(0.56±0.27对安慰剂：-0.03±0.27，p＝0.066)，4mg (0.68±0.27，p＝0.037)，和20mg(0.69±0.27，p＝0.035)。对于注意力 集中测定(反应时间，警惕性)，情节次级记忆和执行功能(由Stroop作用 评价)，在ABT-089和安慰剂间不存在有意义的差异。
药物动力学-由于受限的药物动力学取样时间点，使用非线性混合作 用药物动力学模型化方法(non-linear mixed-effect pharmacokinetic modeling approach)用第V版NONMEM软件估算谷浓度和平均浓度。2mg 和4mg每日两次给药后，5-15ng/mL目标范围内的数值表示在下表4中。
耐受性和安全性-ABT-089，在2mg至20mg每日两次的剂量范围内， 由完成本研究的11位成年ADHD受试者证实具有良好的耐受性。没有严 重的不良事件。没有临床有意义的发生不良事件类型的趋势，也没有任 何暂时的或与药物给药的剂量关系。大多数不良事件在严重程度方面被 认为是轻度的或中度的。最通常报道的与治疗相关的事件(在任何时期的 治疗期间，一位以上受试者)是如下表5所示的头痛、嗜眠、疼痛(手臂疼 痛和牙痛)、增加食欲和神经紧张。仅有一位受试者在4mg剂量时经历了 恶心，其在20mg或2mg剂量下没有出现恶心，该相同的受试者在服用4 mg和20mg剂量时报道腹泻。
在研究期间，对于实验室发现、生命体征或ECG，没有临床有意义 的发现或与剂量有关的趋势。61位随机进行此试验的受试者的安全性评 价结果，其中大多数人治疗5至14天，与完成的那11位受试者所报道的 结果一致。
结果总结
在此小型的、探索的、随机的、双盲的、安慰剂-对照的交换 (crossover)概念证据的11位成年ADHD受试者研究中，用ABT-089治 疗在十倍剂量范围内具有良好的耐受性。虽然曝露的时间短，但是当对 由调查员执行的CAARS进行评价时，试验结果得到改善ADHD症状的清 楚效力信号。多动/冲动症状以及注意力不集中症状都对ABT-089作出反 应；然而，在此研究中，对多动/冲动症状的影响在数值上要大于对注意 力不集中症状的影响。通常，在较低两种剂量(2mg和4mg每日两次)下 在首次和第二次结果测定上观察到临床改善。在此研究中，在ABT-089 2 mg剂量下，CGI-ADHD-S表现出相对于安慰剂适度的但显著的改善，支 持在较低剂量下CAARS效力的发现。然而，注意力和记忆效应的剂量- 响应曲线通过电脑化认知测试测定似乎是剂量-线性的。此效力是在每一 剂量水平与安慰剂相比仅在治疗两周后进行的检测，表明ABT-089对 ADHD的快速启动的效力。有趣地是，对安慰剂的响应在所有四个治疗 时期都类似，表明不存在后遗作用。
为了能够在如此少的受试者中检测这些满意效果，在相对短治疗持 续时间后对使用ADHD交换(crossover)设计给出可信度，尤其是相对 迅速开始启动作用的化合物，如ABT-089。当研究中的疾病症状是随时 间稳定时，所述交换(crossover)设计特别适合概念证据研究。虽然适 合探索性研究，但是这种设计不一定适合于验证性研究。交换(crossover) 设计在之前已经用于成年ADHD概念证据研究，使用阿托西汀(Spencer 等1998)、Adderall(Spencer等2001)和ABT-418(Wilens等1999)。
早期研究困难之一是确定疾病的最佳剂量。评价本研究的剂量根据 药物动力学模型的预期进行选择，每日给药两次共4mg，以8小时时间 间隔进行，在70％以上的受试者中，在早晨给药后约20小时，将不间断 保持在5-15ng/mL范围内的种群稳态血浆浓度。5-15ng/mL的目标范围衍 生于动物试验(Decker等1997)，使用2mg和20mg每日两次的剂量以分别 测试低于和高于预期有效血浆水平下的试验效力。在本研究中，两个较 低剂量后的血浆水平在所述的目标范围内，由此证实我们根据动物模型 的预测。
在本探索性研究中，ABT-089与ADHD相对于安慰剂的改善有关。 假使ABT-089对α4β2受体亚型具有选择性，那么很可能这些作用通过这 种NNR亚型进行调节。本研究结果与不断增长的文献结论相一致，该文 献支持这样的结论，即直接NNR刺激与ADHD及相关疾病的认知缺陷改 善有关(Newhouse等2004)。化合物如NNRs，对认知具有正面效果，在治 疗许多疾病中可能是有益的，所述疾病的其特征在于广泛性神经心理和 认知功能障碍包括阿尔茨海默氏病、双相性精神障碍、精神分裂症、情 感分裂性精神障碍以及其它相关疾病。清楚地，需要做更多的工作去评 价这些药剂在宽范围的具有已知认知障碍的精神疾病中的作用。
相对于ADHD，目前的结果类似于由Levin和Conners所报道的那些， 其报道了一种非常简单的试验，说明尼古丁贴片对ADHD成人是有效的 (Levin等1996)。类似地，有关的烟碱激动剂被证明是可在临床上用于成 人ADHD(Wilens等1999)。这些集合数据进一步支持了在烟碱性受体活 性和ADHD间的生长和公认的联系。
ABT-089是良好耐受的。在本研究中，没有剂量限定副作用或停药 症状的报告。在研究期间，没有临床有意义的心血管或其它实验室异常； 然而，我们检测罕见和特殊反应的能力被小数量的受试者和治疗病症的 短持续时间以及整个研究所限制。此外，按照许多临床试验中的标准做 法，在本研究中使用自愿报告副作用。使用结构性副作用等级量表可能 引起更多不良事件。
在本研究中存在若干局限性。因为所述研究的性质，选择同族研究 群体，这样将不能概括典型的ADHD成人。例如，有重大医学病史和吸 烟者的受试者被排除在外。此外，在所述研究中存在小组的受试者。该 研究意图是完成48位受试者，虽然61位受试者是随机的，当仅11位受试 者完成全部4个治疗时期时，该研究过早地终止了，并且大多数其它受 试者完成5-14天的治疗。此外，在此研究中，大多数患者来自研究地点 之一，因此由于地点间差异度，在此研究中观察到的真实作用大小将在 多中心试验中不可能重复。尽管该设计确保每一位受试者接受不间断暴 露于研究药物4-6周，但是另一局限性是在每一时期相对短的治疗暴露。 该研究的两个最终局限是使用单尾检验法进行效力评价和缺乏多重比 较的调整，其两种都增加了发现ABT-089正面效果的机会。单尾检验法 排除了消极效果的检测。然而，在概念证据研究中，决定继续开发要求 感兴趣的治疗优于安慰剂；对于效力没有可检测的正面效果或消极效果 的发现指出相同的结论：缺少效力。
虽然存在上面的局限性，但是这些探索性数据表明，ABT-089在治 疗ADHD方面似乎具有效力。同样，在这有限数目的受试者中，在相对 宽的剂量范围内(10倍)，ABT-089似乎是耐受的。考虑到在此小组受试 者中的阳性发现，保证了ABT-089的较大的、平行设计剂量范围研究， 并且考虑到临床终点的浅反转U形剂量-响应曲线，这些研究应集中于在 本研究中所探索的剂量范围的下端。
表1.研究设计方案(Schematic)

注解：研究药物每日给药两次
表2.完成试验的受试者的基线特征

ADHD＝注意力缺乏的多动症；CAARS-INV＝Conner’s成年ADHD等级 量表调查者总ADHD症状得分；CGI-ADHD-S＝ADHD严重程度的临床综 合印象；HAM-A＝Hamilton焦虑量表；HAM-D＝Hamilton抑郁症量表
表3.最小二乘均值(±SE)Conner’s成年ADHD等级量表(CAARS) 得分(N＝11)

注解：最小二乘均值和单尾P-值来自带有治疗顺序、受试者(顺序)、时 期和治疗的因素的ANOVA分析。
表4.在稳定状态下群体PK模型-预测谷(C谷)和平均(C平均)血浆浓度

PK＝药物动力学
表5.由至少2位完成试验的受试者(N＝11)报告的不良事件
  COSTART术语            安慰剂        ABT-089  2mg      每日两次 ABT-089  4mg      每日两次 ABT-089  20mg     每日两次 整个      头痛 0 3 0 2 5   嗜眠 1 0 0 2 3 疼痛 0 0 0 2 2 食欲增加 1 0 0 1 2   神经紧张 0 1 0 1 2
可以理解，上述详细说明及所附实施例仅仅是说明性的，而不对本 发明的范围构成限制，本发明的范围仅由所附的权利要求书和它们的等 同物进行限定。所公开实施方案的各种改变和修饰对本领域熟练技术人 员来说是显而易见的。

本申请要求2006年1月17日提交的美国专利申请号60/759,314的 优先权，其全部引入本文作为参考。
参考文献
在本文中提及的参考文献的完成引用提供在下面。下面引用的参考 文献在此并入本文作为参考。
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