本发明属于生物制品组合物及其制备工艺。

抗生素的发现曾给人们带来了莫大的希望，认为一切感染性疾病均已在人们控制 之中，从此迎来了人类与疾病抗争的新时代。但好景不长，由于抗生素的大量使用杀 死了共生的敏感菌，抑制了微生物群体内的生物拮抗效应，使耐药菌得以异常增殖。 同时这种耐药性又可以在细菌间传播、在全世界范围内播散，因而多重耐药菌株的感 染导致患者死亡的报道在逐渐增多。1992年美国疾病控制中心(CDC)的资料表明， 有13300例住院患者，是因为对所使用的抗菌药物耐药，细菌感染得不到控制而死亡。

抗菌药物只能选择性作用于细菌的特定攻击靶位，杀灭或抑制细菌的生长、繁 殖。若病原微生物缺乏上述靶位，如病毒，细菌所产生的内毒素、外毒素及菌体胞壁 产物等，采用抗菌药物治疗是无效的；由内毒素等物质所启动而产生的许多炎性介质 用抗菌药物治疗同样也无丝毫的治疗作用。可想而知，严重感染经过大剂量敏感抗菌 药物治疗却未能挽救病人生命其原因不能说与上述机制无关。因此，则需要生物制 品、需要提高人体及动物的总体免疫能力。

生物制剂及遗传工程在生物制品上的应用，再次给人们带来新的更大的希望。但 是最令人担忧的是以目前这种单一的、纯而又纯的、滞后的、人的主观意志很强的 “科学”---生物制品，来对治可依不同环境瞬息多变的、多耐药的、多品种杂交的细 菌或病毒所造成的疾病或疫情，恐怕是要难上加难，恐怕走地仍然是抗生素走过了的 业已证明失败了的老路。

已有技术的亮点：

目前以抗菌免疫为主的两者协同免疫的机理已越来越被人们所接受。当实验动物 用脂多糖(LPS)菌苗免疫后，对活菌攻击的耐受力有4倍以上增长，而用霍乱毒素免疫 时则有13倍以上增长。如将两者联合免疫，其对活菌攻击的耐受力则可达到100倍以 上。Peterson(1979)也有类似的报告，如单用类毒素免疫其保护指数为10，单用菌苗免 疫保护指数为32。而两者混合使用，其保护指数高达1634，显而易见，上述的结果均 系兼有抗菌和抗毒两种效应联合的结果。(王益寿，《医用生物制品学》P172，1992 年7月浙江科学技术出版社)

美国Energy’s Brookhaven国家实验室在对腺病毒的蛋白激酶的三项研究中发现了 阻断人类腺病毒感染的新方法，这些研究结果发表在2001年10、11、12月出版的 Biochemistry，它将用于设计和开发新型抗病毒蛋白酶抑制剂。

最近Brookhaven实验室发现，病毒最先合成无活性的蛋白激酶，只有当无活性的 蛋白激酶和DNA结合后，蛋白激酶的活性才会被部分地被激活。Mangel说，这种蛋白 激酶的DNA激活方式在以前从未发现过。部分激活的蛋白激酶水解出一个辅助因子， 这个辅助因子和蛋白激酶结合，从而蛋白酶活性才被完全激活。由酶和辅助因子构成 的复合物具有完全的蛋白激酶活性，它沿着病毒DNA移动，降解支架蛋白。

基于上述发现，Mangel提出一种新型的抗病毒方法，也就是用三种不同的药物分 别作用于这种蛋白激酶的三个不同位点——活性中心、辅助因子结合位点和DNA结合 位点。这种“三叉式”抗病毒方法很有可能解决抗病毒治疗中最为头疼的问题——病 毒自发的耐药突变。Mangel解释到，由于这三个位点是相互依赖的，一个位点产生耐 药突变将引起其它两个位点生理功能的改变，因此难以产生耐药性。

Mangel认为，腺病毒蛋白激酶可以用来验证这种“三叉式”抗病毒的有效性。目 前，Mangel的研究小组已经开发出两种新药，一种能可逆的和蛋白激酶活性中心结 合，另一种则不可逆的和蛋白激酶活性中心结合，这些药物很快被美国卫生研究院 (NIH)将作为抗病毒药物进行研究。(摘自基因潮)

上述是已有技术的亮点，但站在本发明的角度认为它的复合程度还不够。就像当 今的结核病联合用药一样，只是给出了联合用药的亮点和方向，然而想靠三、四种有 限的制约点来应付变化万千的微生物变异，恐怕倡导者本人也非常清楚地知道那是不 可能办到的，只是高于现有技术而已。

目前，现有生物制品中的菌苗有活菌苗、死菌苗、化学菌苗、基因重组菌苗，疫 苗有减毒活疫苗、灭活疫苗、亚疫苗单位及类毒素，它们都是在细菌、病毒、细菌外 毒素分离的纯而又纯的基础上，再通过培养或复制、减毒、灭活、裂解等手段制得。 其不足之处在于：①制备耗用时间过长、滞后，在疫情暴发前很难及时上市；②疫苗 或菌苗组分单一，跟不上疫情的发展变化，一旦病原微生物略有变异，其有效率就大 打折扣；③减毒苗毒性大且有返祖的潜在危险。

《本草纲目》中的生物制品，《本草纲目》第三卷百病主治药中有：

伤寒热病主治药中有：腊雪、梁上尘、釜底墨、蜣螂转丸、古文钱、胞衣水、裈 裆、月经衣、头垢、洗足水、激脚布、砧上垢、饭罗、蚯蚓粪、鸡屎白、鸽屎、鼠 屎、马屎、羊屎、羊尿、人屎、人尿、人中黄。

瘟疫主治药中有：古厕木、病人衣、东壁土、五灵脂、雄狐屎、狗屎。

霍乱主治药中有：厕筹、厕户帘、尿桶板、败木梳、故麻鞋底、路旁草鞋、酸浆 水、地浆、东壁土、倒挂尘、砧上垢、牛涎、乌牛尿、黄牛屎、白狗屎、人尿、雄鸟 粪。

痢疾主治药中有：白善土、赤壁土、城东腐木、故衣帛、马屎灰、獭屎灰、牛屎 汁、羊屎汁。

疟疾主治药中有：夜明沙、白僵蚕、故日历、故鞋底、甑带、头垢、人尿、烧人 场上黑土、燕屎、雄鸡屎、白狗屎、乌猫屎、狸屎灰、野狐粪。

黄疸主治药中有：牛屎、豪猪屎、女人月经衣。

站在“卫生”与“科学”的角度，人们早已将上述治疗药物弃之不用，认为是巫 医、巫药，这些药物在中药大辞典中已很少收载，更稀有能登上中华人民共和国药典 这样的大雅之堂。因此，人们哪怕是专业人员已渐渐的忘掉了这些药物，甚至有人认 为那是当时人们无知的产物。

站在前位科学的角度、站在宏观免疫的角度，上述药物无一不是复合生物免疫制 品，并且在当时乃至现在都会有其相应的疗效。其不足之处在于：①其原型直接入药 令患者难以接受，以至，现代人没人愿意使用；②选用的药物是否含有要用药的患者 所感染的特种微生物、特种微生物的含量是否足够尚属未知，因此，疗效不确定。

相关专利：CN95196589.1用于生产具有提高的抗原性的肠细菌的方法及包含此种 细菌的疫苗，该发明涉及到为肠道菌创造一个良好的模拟生物体在体内天然所处的某 些条件和组分，生产出与传统培养方法相比抗原性提高的肠道菌，其交叉保护针对同 种细菌的具有更广泛的株或血清型。这一点说明天然肠道环境生产出的细菌与传统实 验条件下的培养相比更具野性、更适用于细菌变异。该发明的不足之处在于：①该专 利将肠道细菌分割开来，有选择的单品种培养，从而限制了其疫苗的免疫谱；②其只 模拟了肠道的物理环境、化学环境，而忽视了肠道中最为重要的多菌共生的生态环 境。因此可以说：它比传统培养方法抗原性有所提高，只能说明它已模拟出了自然肠 道培养的轮廓，但距离抓到自然肠道培养的精髓还差一步之遥。

本发明的目的在于在不排斥现有生物基因工程的前提下，提出一种能够应付微生 物变异的，全面地、系统地提高人及动物免疫能力的可衍生出不同品种的复合生物制 品组合物及其制备方法，以进一步提高感染性疾病预防成功率及治疗治愈率，并逐步 达到使人们的总体免疫水平提高到趋近于婴儿状态的目的。

本发明的理论假设：

1、在几十年的与耐药菌的抗争中人们已清楚地意识到和看到：以往产生细菌耐药 或人们对耐药菌束手无策，其原因不能只归罪于抗生素的滥用和给药剂量小，更主要 的原因是由于药物的成分过于单一而使突变菌有机可乘。初治结核病人严格的联合用 药所取得的良好疗效，是这方面理论假想的旁证。单一疫苗的无效很大程度是与微生 物的变异有关。

2、人体(或动物)的大多数传染性疾病的病毒(或病原菌等)的基因、耐药基 因、或抗原决定簇基因都会借助于质粒、转座子、噬菌体等，通过不同途径传播或转 移给常年寄居在人(或动物)体内总重约1.5公斤重的400余种肠道细菌之中(其细菌 数量之巨大、基因插入变异机会之多、基因表达速度之快定会令专业人士也感到吃 惊)，或以基因的形式储存在那里、或以表达的形式从形态中体现出来。肠道微生物 是以往疾病和现在疾病对肠道生态影响的记录，这正是本发明选择以肠道微生物为主 线、为平台的原因。

3、同类传染病人集中区域公厕所收集到粪便及其微生物中，携带该特种传染病病 原微生物的当前所流行疫情的基因、耐药基因、抗原决定簇基因及表形，同时也可能 存在着其未来将要流行的趋势基因及表形。将此粪便及其微生物疫苗化，不仅可用于 眼下，而且可服务当来。

4、从耐药的、顽强的微生物的角度看，完全应该有理由相信：无论是病毒也好、 病原菌也好，他们绝不会用轻易就会被水解掉的组分做其赖以生存的与宿主细胞结合 的抗原，即病原微生物的抗原决定簇在一般条件下的噬菌体裂解、酶水解过程中会被 保存下来，这是本发明制备亚疫苗单位的自然后处理的基础。

5、任何疫苗无论是减毒活疫苗、灭活疫苗、还是亚疫苗单位，无论是口服的肠道 给药，还是其他方式的非肠道施用，经多次给药后其抗原决定簇都会通过不同途径， 传播或转移给常年寄居在人(或动物)体内的总重约1.5公斤重的400余种肠道细菌之 中，以表达的形式在肠道中持续的体现出来。这是持久免疫的另一支柱。这也正是为 什么《本草纲目》中人屎被用于治疗时行大热、伤寒热毒，没有被用于瘟疫、霍乱、 痢疾、疟疾、黄疸；而牛屎被用于治疗霍乱、痢疾的原因(正常人及其食物很难接触 到瘟疫、霍乱、痢疾、疟疾、黄疸，因此通常人屎没有上述治疗及预防功能；牛在饮 河水、食稻草的过程中经常接触霍乱、痢疾病原，因此牛的肠道菌所“制出的生物制 品”具有预防或治疗霍乱、痢疾的作用)。

6、健康人肠道所携带的人体正常菌群：有促进宿主免疫系统的发育成熟的作用； 有作为广谱抗原，刺激机体免疫应答的作用；有增强免疫细胞的活性的作用。其裂解 产物如同此菌群的复合亚疫苗单位，具有比正常菌群更强的免疫效果(由于亚疫苗单 位与受体结合时不受体积和空间限制，而结合率更高)。

本发明的复合生物制品组合物，其特征在于：它不是像现有技术那样将细菌或病 毒等分离后进行培养追求纯而又纯、精而又精；它是以常年寄居在人(或动物)体内 总重约1.5公斤重的将以往疾病和现在疾病对肠道菌群影响都记录在案(变异)的总数 达400余种肠道细菌的强大基因库为平台，同时接纳在此强大基因库中尚没有留下抗原 决定簇痕迹的传染病的病原微生物在平台上进行孵化，再经将整体复合微生物疫苗化 的手段，提出一种能够应付微生物变异的，全面地、系统地提高人及动物免疫能力的 可衍生出不同品种的复合生物制品组合物，它是由天然复合微生物的灭活产物、裂解 产物：复合疫苗、复合菌苗、复合类毒素、复合细菌素、复合抗生素、复合短链脂肪 酸等组合而成的。

本发明复合生物制品的微生物来源为：

天然的乃至馆藏的微生物富集地，包括但不局限于：国家微生物菌种保藏管理中 心所藏的菌种、古厕木、古梓木、年久腐木、砧上垢、垃圾箱渗出液、下水道水、溺 坑水、白善土、甘土、赤土、黄土、黑土、腐质土、泥碳、柱下土、粪坑底泥、垃圾 箱底泥、下水道底淤泥、井底泥、湿地淤泥、古瓦、古砖、粱上尘、吸尘器集尘、废 旧书刊、报纸、陈年蒲扇、蒲席、金属币、纸币、病人内衣裤、裹脚布、鞋垫、各种 旧鞋、门帘、病人(或动物)病灶分泌物、病人(或动物)的血液及精液、病人及正 常人(或动物)体表、腔道分泌物及排泄物如唾液、痰液、鼻涕、月经血、尿、粪便 等。微生物来源的选取原则：①年久、脏、富含微生物或特殊微生物，为第一选取原 则；②微生物间共生、拮抗相兼顾原则；③以人为中心向环境扩散就近者优先原则。

复合生物制品的制备方法：

复合微生物物种前期准备及微生物培养：

依据上述选种原则，首先查看所要治疗或预防的传染病的同类病人集中区域公厕 所收集到的粪便中，是否具有携带该特种病的病原微生物、或具有携带该病原微生物 抗原决定簇基因的特种微生物。如果其中一切具足，则可将粪便或完全的粪便复合微 生物与碳源、氮源、胆汁混合，并模拟其它肠道环境进入细菌培养阶段，当培养物的 生长达到晚对数期至稳定期时开始收获并进入人工后处理阶段，或进入自然后处理阶 段。

如果其中没有所需病原微生物及携带该病原微生物抗原决定簇基因的特种微生 物，则可从上述病源微生物来源中以倒序的形式逐一向上查找，如果发现携带该特种 病的病原微生物、或携带致病病源微生物抗原决定簇基因的特种菌，则可依据携带微 生物的习性加入适当的碳源、氮源、胆汁混合，并模拟肠道环境进入细菌培养阶段， 当培养物的生长达到晚对数期至稳定期时开始收获并进入人工后处理阶段，或进入自 然后处理阶段。

在上述两种方法都得不到满意的结果的前提下，可借助基因工程的手段，通过制 备目的基因、体外重组、基因转移、筛选等工序获得携带该特种病的病原微生物抗原 决定簇基因的细菌，并依据携带菌或病原菌的习性加入适当的碳源、氮源、胆汁混 合，并模拟其它肠道环境进入细菌培养阶段，当培养物的生长达到晚对数期至稳定期 时开始收获并进入人工后处理阶段，或进入自然后处理阶段。

为了能进一步地制备出具有全面促进宿主免疫系统的发育成熟作用的、具有全面 刺激机体免疫应答作用的、具有全面增强免疫细胞的活性作用的广谱抗原，可以在上 述培养的中后期，即培养物的生长达到中对数期末期时，向系统中加入适量的新鲜的 健康人的粪便或完全的健康人粪便复合菌。

为了将系统建立成拮抗、互补、多品种共生的完善体系，可在上述病源微生物来 源中选出一种或多种，如果所选的菌源是固体，则可用水或淘米水将复合细菌游离出 来，可以在上述培养的中后期，即培养物的生长达到中对数期末期时，加入系统之 中。

为了节省氮源和碳源，为了给系统中留下多种微生物的基因片断和抗原决定簇片 断，将一种或多种抗生素生产后废弃的灭菌的菌体、菌丝体等固体物收集起来混合 后，按适当比例作为碳源、氮源加入上述细菌培养体系中。

细菌培养产物后处理：

培养产物后处理分为两种：一种是人工后处理，即当培养物的生长达到晚对数期 至稳定期时收获，并立即进行杀死灭活或裂解灭活，杀死灭活包括化学的甲醛溶液固 定，物理的热、超声或辐射；裂解灭活包括超声断裂、氧化还原解聚、酸或碱介质中 控制水解、酶促水解；另一种是自然后处理，即前期复合微生物在生长达到晚对数期 至稳定期后进一步增殖，耗尽所有碳源、氮源及其它能源；中期噬菌体使复合微生物 一一裂解、液化；末期由酶将噬菌体及复合微生物的大分子切割成基因片段或抗原决 定簇片段，其最终产物包括但不局限于：鞭毛蛋白、类毒素蛋白、肽、脂肽、多糖、 膜脂多糖、寡糖、荚膜寡糖、细菌素、抗生素、短链脂肪酸等具有生物活性的成分及 少量杂质。

精制：

将所得产物通过离心、树脂吸附、解吸等几道工序完成精制，此方法不仅可以使 生物有效成分分级、分类，而且可达到去除机械杂质、脱盐、脱色的目的；口服给药 制剂也可直接取用离心后所得上清液这一完全复合成分。

混合：

将精制所得的生物活性成分包括但不局限于：鞭毛蛋白、类毒素蛋白、肽、脂 肽、多糖、膜脂多糖、寡糖、荚膜寡糖、细菌素、抗生素等，依据不同需求分类混 合、组合混合或所有成分全部混合。

制剂：

上述精制液或精制混合液，可直接制成各种液体的肠道非肠道给药制剂；

也可通过包括但不局限于冷冻干燥、低温真空喷雾干燥、喷雾干燥等干燥手段将 其制成利于保藏的固体粉末后，再依据不同需求制成现有技术能够达到的固体的、液 体的、肠道给药制剂、非肠道给药制剂。

在制剂的过程中还可以依据专业人员所熟知的现有技术加入可进一步提高抗原性 的佐剂，例如，但不局限于，铝、油-水乳剂。

根据上述复合生物制品的微生物来源、制备方法可知，本发明所衍生出不同品种 的复合生物制品组合物其积极作用在于可预防及治疗人或动物与传染及免疫有关的疾 病，其包括但不局限于下列疾病：病毒性传染病：流行性感冒，普通感冒，麻疹，风 疹，幼儿急疹，传染性红斑，水痘及带状疱疹，流行性乙型脑炎，淋巴细胞脉络丛脑 膜炎，中枢神经系统病毒感染，中枢神经系统的慢性病毒感染，登革热和登革出血 热，森林脑炎，昏睡性脑炎，流行性出血热，新疆出血热，拉沙热，黄热病，狂犬 病，癌症，艾滋病，尖锐湿疣，扁平疣，生殖器疱疹，柯萨奇病毒感染，埃可病毒感 染，病毒性肝炎，单纯疱疹，流行性腮腺炎，传染性单核细胞增多症，巨细胞病毒感 染，急性出血性结膜炎，口蹄疫，脊髓灰质炎，新型肠道病毒感染，人类微小病毒感 染，病毒性腹泻；细茵性传染病：白喉，溶血性链球菌感染，葡萄球菌感染，流行性 脑脊髓膜炎，细菌性脑膜炎，百日咳，军团菌感染，兔热病，霍乱，伤寒和副伤寒， 细菌性痢疾，大肠杆菌性腹泻，厌氧菌感染，细菌性食物中毒，耶尔森菌感染，弯曲 菌肠炎，螺旋菌感染，亲水气单胞菌感染，类志贺毗邻单胞菌腹泻，难辨梭状芽孢杆 菌结肠炎，感染性心内膜炎，脑脓肿，泌尿道感染，鼠伤寒沙门菌感染，其他沙门菌 感染，破伤风，炭疽，鼻疽(马鼻疽)，布鲁司杆菌病，鼠疫，麻风，淋球菌感染(淋 病)，加特纳菌性阴道炎，李斯特菌病，腹股沟肉芽肿，猫抓病，鼠咬热，大叶性肺 炎，肺脓肿，结核病，软下疳；立克次体病：斑疹伤寒，Q热，恙虫病；真菌性疾 病：深部真菌病，浅部真菌病，生殖器念珠菌病，隐球菌性脑膜炎，曲菌病，组织胞 浆菌病，奴卡菌病；衣原体及支原体感染：衣原体感染，性病淋巴肉芽肿，非淋病性 尿道炎，支原体感染；螺旋体病：钓端螺旋体病，蜱媒螺旋体病(Lyme病)，雅司，回 归热，梅毒。

本发明的优点在于：本发明在不排斥现有生物基因工程的前提下，以常年寄居在 人(或动物)体内总重约1.5公斤重的将以往疾病和现在疾病对肠道菌群影响都记录在 案(变异)的总数达400余种肠道细菌的强大基因库为平台，同时接纳在此强大基因库 中尚没有留下抗原决定簇痕迹的传染病的病原微生物在平台上进行孵化，再经将整体 复合微生物疫苗化的手段，提出一种能够应付微生物变异的，全面地、系统地提高人 及动物免疫能力的可衍生出不同品种的复合生物制品组合物及其制备方法，以进一步 提高传染性疾病的预防成功率及治疗治愈率，并逐步地达到使人们的总体免疫水平提 高到趋近于婴儿免疫状态的目的。

为了进一步说明本发明，但不受此限制的给出如下实施例：

实施例1、痢疾口服复合疫苗制剂

取痢疾病房公厕粪便  2kg    新蒸大米干饭  2kg

尿素  8g                   胆汁  16g

混合均匀，30～37℃发酵24小时，另取天然泥炭1kg、吸尘器灰尘0.1kg加淘米水 2kg充分搅拌均匀、100目沙网过滤，滤液备用。

取上述24小时发酵物  约4kg     正常公厕粪便  4kg

新蒸大米饭  8kg               备用的泥、尘过滤液1kg

尿素  30g

混合均匀，至于容器中，密封，并留一过滤式通气孔，20～30℃发酵、裂解、液 化360小时后，以5000r/min离心30min，取上清液，即为口服复合痢疾疫苗原液。

此原液，可直接加入佐剂及药学可接受的液体制剂载体制成液体口服制剂；也可 经喷雾干燥或冷冻干燥后加入佐剂及药学可接受的固体制剂载体制成固体口服制剂。

实施例2、艾滋病复合疫苗制剂

取艾滋病病房公厕粪便(有胃肠道隐匿性慢性失血者)  2kg

新蒸大米干饭  2kg          尿素  8g       胆汁  16g

混合均匀，30～37℃发酵24小时，另取天然泥炭1kg、吸尘器灰尘0.1kg加淘米水 2kg充分搅拌均匀、100目沙网过滤，滤液备用。

取上述24小时发酵物  约4kg     正常公厕粪便  4kg

新蒸大米饭  8kg               备用的泥、尘过滤液1kg

尿素  30g

混合均匀，至于容器中，密封，并留一过滤式通气孔，20～30C发酵、裂解、液 化360小时后，以5000r/min离心30min，取上清液，即为艾滋病口服复合疫苗原液。

将此原液加15倍的蒸馏水混合均匀，将混合液经2000型大孔吸附树脂、800型大孔 吸附树脂、普通阳离子树脂、阴离子树脂等四级吸附，65％乙醇洗脱，得到脱盐、脱 色的并且依据分子量的大小分为三级的大分子蛋白类、小分子多肽类及多糖、脂多糖 类，并分别喷雾干燥后备用。

此精制产物可依据不同需求选择一类单用、两类混合、或全部入选的方案，制成 口服制剂、注射剂及鼻腔给药喷雾剂。