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首页 / 专利分类库 / 有机化学 / 杂环化合物（高分子化合物入C08） / 杂环化合物，含五元环，不与其他环稠合，带1个氮原子作为惟一的环杂原 / .只有氢或碳原子直接连在环氮原子上 / ..环原子间或环原子与非环原子间有两个双键 / ...只有氢原子，烃基或取代的烃基，直接连在碳原子上 / ....有取代的烃基直接连在环氮原子上 / .....被以3个键连杂原子、其中最多以1个键连卤素的碳原子，例如酯基或腈基取代的基 / 虾红素蛋白酶的杂芳族抑制剂

虾红素蛋白酶的杂芳族抑制剂
申请号 CN202080057197.6 申请日 2020-06-12 公开(公告)号 CN114585608A 公开(公告)日 2022-06-03
申请人 维沃永治疗公众有限公司; 发明人 D·拉姆斯贝克; K·塔恩; D·施伦齐希; M·布赫霍尔茨; H·辛尼斯; S·席林;
摘要 本 发明 涉及新的异羟肟酸衍 生物 ，其可用作虾红素(astacin)金属蛋白酶(特别是前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶、穿膜肽酶、ovastacin和/或 线虫 虾红素，更特别地人或 哺乳动物 穿膜肽酶α、穿膜肽酶β、BMP‑1、ovastacin和/或来自线虫的DPY‑31)的 抑制剂 ；包含这样的化合物的药物组合物； 治疗 或 预防 疾病 或病况(尤其是与所述金属蛋白酶相关的疾病或病况)的方法；以及用于这样的方法的化合物和药物组合物。
权利要求

1.根据下式I的化合物，
其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，其中：
A独立地选自
B独立地选自
C独立地选自‑N＝、 ‑O‑和‑S‑；
F，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
G，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
H，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
I，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
其中，如果存在F、G、H和I，则：
D是
E独立地选自 并且
2
由D、E、F、G、H和I形成的环被p个由R表示的取代基取代，
其中p是0、1、2、3或4；
否则，如果不存在F、G、H和I，则：
D独立地选自 ‑N＝和 并且
E独立地选自 和‑N＝，其中p是0、1、2、3、4或5；
1 2 1
L和L各自独立地选自烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其中L
2
和L可以连接在一起形成环；
a b a
每个X独立地选自C(R)R、NR和O；
2
X和L可以连接在一起形成环，其中所述环可以任选地与芳基稠合；
n是1、2、3或4；
m是0、1、2、3、4或5；
1
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
2
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基、羟基和杂芳基的基团取代；
3
每个R独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、与芳基稠合的杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基的基团取代，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
a b
R和R各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基，
其中，除非另有说明：
所述芳基独立地是单环或双环C6‑10，优选C6芳基；
所述杂环基独立地是单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5杂环基，其包含1至4个选自N、S和O的环杂原子；
所述杂芳基独立地是单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5芳族杂环基团，其包含1至3个选自N、S和O的环杂原子；
所述烷基或烷独立地是直链或支链的、开链或环状的C1‑12，优选C1‑6，更优选C1‑3，甚至更优选C1‑2烷基；
所述烯基独立地是包含至少一个C＝C键的直链或支链的、开链或环状C2‑12，优选C2‑4，更优选C2‑3，甚至更优选C2基团；
所述炔基独立地是包含至少一个C≡C键的直链或支链的、开链或环状C2‑12，优选C2‑6，更优选C2‑4，甚至更优选C2‑3基团；
所述环烷基独立地是C3‑12，优选C3‑6的单环或双环烷基；
所述环烯基独立地是包含至少一个C＝C键的C3‑12，优选C4‑6，更优选C5‑6碳环基团；
其中每个上述基团均可以被一个或多个选自卤素、羧基、氰基、甲氧基和羟基的基团取
代，
其中，当环片段 由 表示时，则：
3
R选自氢以及以下基团：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的环烷基、任选取代的环烯基、取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂芳基烷基，其中任选取代的或取代的分别是指被一个或多个独立地选自以下的基团任选取代或取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；
当环片段 由 表示时，则m和p中的至少一个大于0；并且
当环片段 由 表示时，则m大于0。
1 2
2.根据权利要求1所述的化合物，其中L 和L各自独立地选自芳基、杂环基、杂芳基、环
1 2
烷基和环烯基，其中L和L可以连接在一起形成环；
a b a
每个X独立地选自C(R)R、NR和O；
n是1、2、3或4；
m是0、1、2、3、4或5；
1
R选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
2
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
3
每个R独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自以下的基团取代：
氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其由以下式Ia和Ib之一表示：
4.根据权利要求1、2或3中任一项所述的化合物，其中如果不存在F、G、H和I，则环片段由以下结构之一表示：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中如果存在F、G、H和I，则环片段
由以下结构之一表示：
1 2
6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R和R是相同或不同的，并且各自独
立地选自氯、氟、溴、碘、氰基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6烷基、氟(C1‑6烷基)、氟(C1‑6烷氧基)和具有酸性氢的官能团，所述具有酸性氢的官能团选自羟基、羧基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH四唑‑5‑基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH和四唑‑5‑基。
1 1 2 2
7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中L (R)m和L (R)p是相同或不同的，
并且
(a)各自独立地由以下结构表示：
其中：
(i)Ro、Ro’、Rm、Rm’和Rp中的至少一个是具有酸性氢的官能团，所述具有酸性氢的官能团选自羟基、羧基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH和四唑‑5‑基，并且其余的是H或如前述权
1 2
利要求中任一项对R或R所定义；和/或
(ii)Ro、Ro’、Rm、Rm’和Rp中的至少两个是烷氧基，其连接在一起作为5至8元杂环的一部
1 2
分，并且其余的是H或如前述权利要求中任一项对R或R所定义；和/或
(b)各自独立地选自2‑羧基苯基、3‑羧基苯基、4‑羧基苯基、3‑氯苯基、3‑氰基苯基、3‑氟苯基、3‑甲氧基苯基、3‑甲基苯基、4‑羧基苯基、4‑氯苯基、4‑氰基苯基、4‑氟苯基、4‑甲氧基苯基、3，4‑二甲氧基苯基、4‑甲基苯基、3‑羧基‑4‑甲氧基苯基、3‑氟‑4‑甲氧基苯基、4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基、5‑氯‑3‑氟‑4‑羟基苯基、3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基、3，5‑二氯‑4‑羟基苯基、2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基、2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基、1，3‑苯并二噁茂‑5‑基、
3‑(三氟甲基)‑1H‑吡唑‑4‑基、3‑(1H‑四唑‑5‑基)苯基、2‑羧基环己基、3‑羧基环己基、3‑羧基环己基和(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)甲基。
3
8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其中每个R独立地选自
(a)氢以及以下基团：C1‑6烷基、羧基(C1‑6烷基)、氨基(C1‑6烷基)、氰基(C1‑6烷基)、C2‑6炔基、C3‑6环烷基、羧基(C6‑10芳基)、C1‑6烷氧基(C6‑10芳基)、氰基(C6‑10芳基)、卤代(C6‑10芳基)、羟基(C6‑10芳基)、C1‑6烷氧基(C2‑8杂芳基)、氰基(C2‑8杂芳基)、卤代(C2‑8杂芳基)、C3‑5杂芳基(C6‑10芳基)、羟基(C2‑8杂芳基)、羧基(C2‑8杂芳基)、(C6‑10芳基)甲基、(C1‑6烷氧基(C6‑10芳基))甲基、(羟基(C6‑10芳基))甲基、(羧基(C6‑10芳基))甲基、(C1‑6烷氧基(C2‑8杂芳基))甲基、(C2‑8杂芳基‑(C6‑10芳基))甲基、(羟基(C2‑8杂芳基))甲基和(羧基(C2‑8杂芳基))甲基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自氯、氟、溴、碘、羧基氰基、C1‑6烷基、C1‑C6烷氧基和羟基的基团取代；和/或
(b)氢以及以下基团：甲基、乙基、2‑丙基、1‑丙基、苯基、2‑氨基乙基、炔丙基、环丙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苯基、3‑羧基苯基、3‑氯苯基、3‑氰基苯基、3‑氟苯基、3‑甲氧基苯基、3‑甲基苯基、4‑羧基苯基、4‑氯苯基、4‑氰基苯基、4‑氟苯基、4‑甲氧基苯基、4‑甲基苯基、3‑羧基‑4‑甲氧基苯基、3‑氟‑4‑甲氧基苯基、4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基、3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基、
3，5‑二氯‑4‑羟基苯基、2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基、1，3‑苯并二噁茂‑5‑基、苄基、(3‑羧基苯基)甲基、(3‑氯苯基)甲基、(3‑氰基苯基)甲基、(3‑氟苯基)甲基、(3‑甲氧基苯基)甲基、(3‑甲基苯基)甲基、(4‑羧基苯基)甲基、(4‑氯苯基)甲基、(4‑氰基苯基)甲基、(4‑氟苯基)甲基、(4‑甲氧基苯基)甲基、(4‑甲基苯基)甲基、(3‑羧基‑4‑甲氧基苯基)甲基、(3‑氟‑4‑甲氧基苯基)甲基，(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基)甲基、(3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基)甲基、(3，5‑二氯‑
4‑羟基苯基)甲基、(2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基)甲基、(2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基)甲基和(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)甲基、对甲基苯甲酸和间甲基苯甲酸。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中：
a b a b a
每个X是C(R)R，其中所述C(R)R基团之一可以被NR基团替代；
n是1或2；
m是0、1、2或3；
p是0、1、2或3；
1
L是苯基；
2
L是苯基；
1 1
R独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个R 基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环或2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；
2 2
R独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个R 基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环或2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；
3
R选自氢、甲基、乙基、炔丙基、环丙基、2‑氨基乙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苄基、未取代的苯基，和选自3‑羧基苯基和4‑羧基苯基的取代的苯基；并且
a b
R和R是氢。
10.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物，其中
a b
X为C(R)R；
n为1；并且
m和p中的至少一个大于0。
11.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中：
a b
每个X是C(R)R；
n是1或2；
m是0、1、2或3；
p是0、1、2或3；
1
L为苯基；
2
L为环己基；
1
R为COOH，
2
R为COOH；
3
R为氢；并且
a b
R和R为氢。
12.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中：
a b a b a
每个X是C(R)R，其中所述C(R)R基团之一可以被NR基团替代；
n是1或2；
m为0、1、2或3；
p为0、1、2或3；
1
L为苯基；
2
L为苯基；
1 1
R独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个R 基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环
1
或2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；优选地，R为氢；
2 3
R为酸性基团的生物电子等排置换，优选地，R为四唑；
3
R选自氢、甲基、乙基、炔丙基、环丙基、2‑氨基乙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苄基、未取代的
3
苯基，和选自3‑羧基苯基和4‑羧基苯基的取代的苯基；优选地，R是氢；并且
a b
R和R是氢。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其选自：
14.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其选自：
15.药物组合物，其包含根据权利要求1至14中任一项所述的化合物和药学上可接受的
赋形剂。
16.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物或根据权利要求15所述的药物组合物，
其用于治疗人或动物体的方法。
17.根据下式I的化合物，
其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，其中：
A独立地选自
B独立地选自
C独立地选自‑N＝、 ‑O‑和‑S‑；
F，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
G，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
H，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
I，如果存在，独立地选自 和‑N＝；
其中，如果存在F、G、H和I，则：
D是
E独立地选自 并且
2
由D、E、F、G、H和I形成的环被p个由R表示的取代基取代，
其中p是0、1、2、3或4；
否则，如果不存在F、G、H和I，则：
D独立地选自 ‑N＝和 并且
E独立地选自 和‑N＝，其中p是0、1、2、3、4或5；
1 2 1
L和L各自独立地选自烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其中L
2
和L可以连接在一起形成环；
a b a
每个X独立地选自C(R)R、NR和O；
2
x和L可以连接在一起形成环，其中所述环可以任选地与芳基稠合；
n是1、2、3或4；
m是0、1、2、3、4或5；
1
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
2
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基、羟基和杂芳基的基团取代；
3
每个R独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、与芳基稠合的杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
a b
R和R各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基，
或者包含所述化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其用于治疗或预防选自
以下疾病和病况的方法：
(a)阿尔茨海默病；肾炎；肾损伤；肾缺血性损伤；缺血性急性肾小管坏死；急性肾衰竭；
膀胱炎症；炎性肠病(IBD)；克罗恩病；溃疡性结肠炎；慢性炎症；结肠炎；纤维化；纤维化病症；瘢痕疙瘩；肺动脉高压；间质性肺病(ILD)；癌症；结直肠癌；
(b)纤维化；急性纤维化疾病和病症；慢性纤维化疾病和病症；发生在器官中和/或伴随
选自以下疾病和病症的纤维化：肝炎、肝硬化、高血压、心肌梗塞、心力衰竭、哮喘、肺动脉高压、硬皮病、纤维化皮肤和内脏器官、糖尿病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化和纤维化血管；增生性皮肤瘢痕；瘢痕疙瘩；肺纤维化；创伤后急性CNS瘢痕；中风或脊髓损伤后的神经元再生；移植物中空结构的闭塞性纤维化；慢性同种异体移植排斥；伤口愈合障碍；术后瘢痕；皮肤瘢痕；妇科手术引起的纤维化；眼科手术后纤维化；血管成形术后纤维化；关节手术后纤维化；防止恶性角质形成细胞或鳞状细胞癌(SCC)的局部侵润、复发和转移；
(c)哺乳动物不孕症；用于哺乳动物体外受精(IVF)治疗的治疗用途；
(d)线虫感染；由环纹背带线虫(Teladorsagia circumcincta)引起的感染；由捻转血
矛线虫(Haemonchus contortus)引起的感染；以及由马来丝虫(Brugia malayi)引起的感染。
18.根据权利要求17所述的化合物或药物组合物，其中
1 2 1 2
L和L 各自独立地选自芳基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其中L 和L 可以连接在一起形成环；
a b a
每个X独立地选自C(R)R、NR和O；
n是1、2、3或4；
m是0、1、2、3、4或5；
1
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
2
每个R独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
3
每个R独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自以下的基团取代：
氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
a b
R和R各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基。
19.选自以下的化合物：
其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，或者包含所述化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其用于权利要求17中的方法。
20.选自以下的化合物：
其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，或者包含所述化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其用于权利要求17中的方法。
说明书全文

虾红素蛋白酶的杂芳族抑制剂

发明领域

[0001] 本发明涉及新的异羟肟酸衍生物，其可用作虾红素(astacin)金属蛋白酶(特别是前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶、穿膜肽酶、ovastacin和/或线虫虾红素，更特别地人或哺乳动物穿膜肽酶α、穿膜肽酶β、BMP‑1、ovastacin和/或来自线虫的DPY‑31)的抑制剂；包含这样的化合物的药物组合物；治疗或预防疾病或病况(尤其是与所述金属蛋白酶相关的疾病或病况)的方法；以及用于这样的方法的化合物和药物组合物。

背景技术

[0002] 来自虾红素家族的蛋白酶代表了广泛存在于低等和高等生物体中的一组金属蛋白酶。虾红素是蛋白酶的甲硫氨酸锌蛋白(metzincin)超家族的一个亚家族，其全部具有在其活性位点的保守的锌结合序列，在锌位点后面的保守的含甲硫氨酸转角(Met‑转角)及其催化结构域的惊人相似的三维结构(Sterchi等人，Mol Aspects Med.(2008)，29(5)：309‑
328)。在人生物体中，具有虾红素家族的至少四种酶：骨形态生成蛋白1(BMP‑1)、两种穿膜肽酶(穿膜肽酶α和β)，以及ovastacin。此外，诸如旋毛虫和钩虫的线虫寄生虫分泌多种虾红素，这些虾红素存在于整个线虫动物门(Nemathelminthes)分类单元中。
[0003] BMP‑1和穿膜肽酶参与胶原蛋白的形成，因此在与结缔组织病理形成相关的多种疾病中发挥作用，例如纤维化病况，包括肺纤维化和瘢痕疙瘩。此外，已有描述穿模肽酶与多种类型的癌症、阿尔茨海默病、急性肾衰竭和慢性炎性肠病有关。因此，穿模肽酶抑制剂代表了治疗这样的疾病的新候选物。
[0004] 此外，ovastacin在生殖中起作用。在卵母细胞受精后，透明带发生硬化(ZPH)，这是由ovastacin活性诱导的，并通过建立阻止多精入卵的阻断及确保胚胎的正常发育来为受精卵提供机械保护。然而，如果这样的硬化发生得太早，或者甚至在没有受精的情况下即发生，就会出现不育。因此，抑制ovastacin可以代表解决未实现的生育愿望和/或在体外受精和生殖医学的背景下的一种新方法。
[0005] 进一步地，已经在线虫中鉴定了多种虾红素蛋白酶。它们在含有胶原蛋白的角质层的形成中起重要作用。线虫感染是一个主要问题，尤其是在畜牧业中。此外，线虫寄生虫是多种热带疾病的罪魁祸首。抑制这些酶会干扰外部保护层的形成，并导致蠕虫的生长缓慢或死亡。因此，这样的线虫虾红素的抑制剂代表了用于治疗寄生虫感染的新型驱虫剂。
[0006] 甲硫氨酸锌蛋白和虾红素家族
[0007] 如上所述，虾红素是一个多结构域金属肽酶家族，在代谢中具有多种功能。其是分泌的，或者是膜锚定的，并且通过作为无活性酶原合成和通过共定位蛋白质抑制剂而被调节。不同的家族成员由N末端信号肽和前片段(pro‑segment)、锌依赖性催化结构域、更下游的细胞外结构域、跨膜锚和胞质结构域组成。对四种虾红素的催化结构域和其中一种的酶原已经进行结构鉴定，表明包含紧密的～200个残基锌依赖性部分，通过活性位点分裂分为N末端和C末端亚结构域。虾红素包括一个扩展的锌结合基序(HEXXHXXGXXH)，其包括三个金属配体并将其分组为金属肽酶的甲硫氨酸锌蛋白家族中。在成熟的未结合的虾红素中，保守的酪氨酸作为额外的锌配体，在“酪氨酸转换(tyrosineswitch)”运动中随着底物或抑制剂结合而被外摆。虾红素催化结构域的其它特征结构元素是三个大的α‑螺旋和一个五链β‑折叠，以及两个或三个二硫键。N‑末端前片段长度可变且相当非结构化。其通过嵌入保守基序(FXGD)的天冬氨酸介导的“天冬氨酸转换”机制抑制催化锌。去除前片段暴露出一个深而延伸的活性位点裂缝，其通常显示出对特异性袋(S1’)中天冬氨酸残基的优选性(Gomis‑Rüth等人，Biol.Chem.(2012)，393：1027‑1041)。
[0008] 除了虾红素家族之外，甲硫氨酸锌蛋白超家族中的其它金属蛋白酶家族还包括ADAM(“解整联蛋白和金属蛋白酶”，如ADAM金属肽酶结构域17(ADAM17)，也称为TACE(肿瘤坏死因子‑α‑转化酶)；和ADAM10，即α分泌酶)和MMP(“基质金属蛋白酶”，例如MMP1胶原酶；
MMP2明胶酶；MMP9；和MMP13)，如Sterchi等人，Mol Aspects Med.(2008)，29(5)：309‑328的图1所示。
[0009] 例如，TACE(ADAM17)抑制剂是已知的。然而，这些化合物中的许多表现出非选择性，是基质金属蛋白酶尤其是MMP‑1的强力有效抑制剂，在金属蛋白酶抑制剂的临床试验中已假定抑制其会引起关节疼痛(如WO 2008/142376 A1所述)。其中公开了双环磺酸(BCSA)化合物，所有这些化合物都具有共同的结构基序2‑(1，1‑二氧代‑2‑苯基‑2，3‑二氢‑1H‑苯并[d]异噻唑‑3‑基)乙酸、(1，1‑二氧代‑2‑苯基‑2，3‑二氢‑1H‑异噻唑并[4，5‑b]吡啶‑3‑基)乙酸、2‑(1，1‑二氧代‑2‑苯基‑2，3‑二氢‑1H‑苯并[b]噻吩‑3‑基)乙酸或其取代的衍生物。换句话说，其中的所有化合物均具有在双环系统的5元环内的1位的SO2基团。此外，其中描述的双环系统的所有形成5元环的部分是部分饱和的，即折叠的(puckered)。最后，其中公开的化合物是TACE(一种ADAM金属蛋白酶)而不是虾红素金属蛋白酶的抑制剂。
[0010] 在人和小鼠基因组中，编码虾红素蛋白酶的基因包括BMP‑1、tll1、tll2、mep1a、mep1b和astl。前三个基因编码所谓的tolloid亚组，包括蛋白质BMP‑1及其主要的剪接变体，哺乳动物tolloid。这两种也称为前胶原C蛋白酶，并且其对细胞外基质组装是重要的。基因mepla和mep1b分别编码多结构域蛋白穿模肽酶α和穿模肽酶β。脊椎动物中的另一个虾红素亚组包括所谓的孵化酶，仅由哺乳动物中的一个称为ovastacin的成员代表，其在精子‑卵子相互作用中发挥作用。最后，低等无脊椎动物(尤其是线虫)的基因组包含比哺乳动物基因组更多的虾红素基因(在如秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的线虫中多达约40个(Gomis‑Rüth等人，Biol.Chem.(2012)，393：1027‑1041)。
[0011] 穿模肽酶
[0012] 具体而言，穿模肽酶α和β均代表虾红素家族和甲硫氨酸锌蛋白超家族的锌依赖性金属蛋白酶。它们显示出相似的结构域结构，并且人酶彼此具有45％的序列同源性。穿模肽酶β是具有细胞外蛋白酶活性的1型跨膜蛋白，而穿模肽酶α在分泌途径期间脱落并分泌到细胞外空间。这两种酶在肾和肠道上皮细胞中均以高表达率以酶原的形式表达，并且其已经在肠道白细胞、皮肤和某些癌细胞中得到证实。
[0013] 穿模肽酶显示出不同的底物特异性，优选在P1’位的酸性氨基酸(Becker‑Pauly等人Mol.Cell Proteomics(2011)，doi：10.1074/mcp.M111.009233)。已经鉴定了数种体外底物，包括细胞外基质蛋白、肽激素和细胞因子。穿模肽酶β的已知体外底物包括orcokinin、胃泌素17、肽YY、运动升压素(kinetensin)、骨桥蛋白、白细胞介素1β、APP、MUC 2粘蛋白和囊性纤维化穿膜传导调节蛋白E‑钙黏着蛋白，而穿模肽酶α的已知体外底物包括铃蟾肽、神经降压素、P物质、血管紧张素I、促黄体激素释放激素、缬酪肽、血管活性肠肽、缓激肽、α‑黑素细胞刺激素、MCP‑1和闭锁蛋白。穿模肽酶β和α二者的已知的体外底物是例如胃泌素释放肽和缩胆囊素。尽管穿模肽酶在体内的功能仍有待阐明，但越来越多的证据表明其在胶原蛋白组装、炎症、肠道免疫反应和神经变性中起作用。
[0014] 小鼠中缺乏穿模肽酶β和α或使用放线酰胺素(Actinonin，一种穿模肽酶抑制剂)已示出针对肾损伤和膀胱炎症提供保护(Bylander等人，American  journal of physiology.Renal physiology(2008)，294(3)：F480‑90；Yura等人，American journal of physiology.Renal physiology(2009)，296(1)：F135‑44)。因此，穿模肽酶β和α似乎参与例如肾炎、肾损伤、肾缺血性损伤、缺血性急性肾小管坏死、急性肾衰竭和膀胱炎症的发病机制和/或疾病进展。
[0015] 这两种酶均己被证明是C‑和N‑前胶原蛋白酶及诱导胶原蛋白成熟和组装(Biasin等人，The Journal of pathology(2014)，233(1)：7‑17；Prox等人，Matrix biology(2015)，44‑46：7‑13)。在纤维化条件下(瘢痕疙瘩、肺动脉高压)，在这些研究中已经发现所述酶的过表达。因此，穿模肽酶β和α似乎参与例如纤维化和纤维化病症(瘢痕疙瘩、肺动脉高压)和间质性肺病(ILD)的发病机制和/或疾病进展。
[0016] 穿模肽酶β已被证明可作为淀粉样前体蛋白的β‑分泌酶而起作用，以在体外形成淀粉样β(Aβ)肽(Bien等人，The Journal of biological chemistry(2012)，287(40)：33304‑33313)。Aβ肽广泛存在于阿尔茨海默病患者的大脑中，是该疾病发病机制的关键因素。所述研究表明，与BACE I相反，穿模肽酶β能形成N末端截短的Aβ，并因此可能参与潜在毒性更强的Aβ种类的产生。因此，穿模肽酶β似乎参与了例如阿尔茨海默病的发病机制和/或疾病进展。
[0017] 穿模肽酶α已被证明是IBD(克罗恩病(Crohn’s disease)、溃疡性结肠炎)的易感基因，并且其缺失会增加慢性炎症，而穿模肽酶β具有促炎活性，其缺乏会导致对损伤的一些保护作用(Banerjee等人，Am.J.Physiol.Gastrointest.Liver Physiol.(2011)，300(2)：G273‑2)。因此，穿模肽酶β和α似乎参与了例如慢性炎症、克罗恩病、溃疡性结肠炎和炎性肠病(IBD)的发病机制和/或疾病进展。已经描述了穿模肽酶α的促血管生成活性和非极化分泌，由此增加了结直肠癌的侵袭力(Lottaz等人，PloS one(2011)，6(11)：e26450)。因此，穿模肽酶α与癌症尤其是结直肠癌的发病机制和/或疾病进展有关。
[0018] 已经阐明了数种广谱金属蛋白酶和MMP抑制剂关于其对于穿模肽酶α和β的抑制活性(Broder等人，The Biochemical Journal(2013)，450：253‑264)。尽管一些化合物显示出对穿模肽酶α的抑制，但是所有化合物对穿模肽酶β的抑制作用要低得多(显示出在微摩尔范围内的抑制常数)或缺乏可接受的类药特性(Madoux等人，Biopolymers(2014)，102(5)：396‑406)。穿模肽酶β的次磷酸抑制剂(PMI)在蛋白酶网站中的金属蛋白酶穿模肽酶α和穿模肽酶β的Broder C.，Characterization中描述(2013年8月；博士论文；
Kiel；登录号urn：nbn：de：gbv：8‑diss‑146034；pp.29，53)。
[0019] PCP酶；BMP‑1
[0020] 骨形态生成蛋白BMP‑1属于前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶，其是一小组密切相关的锌金属蛋白酶，具有特异性裂解纤维状胶原蛋白的羧基前结构域的能力(Turtle等人，Expert Opin.，Ther.Patents(2004)，14(8)：1185‑1197)。PCP是锌金属蛋白酶的虾红素家族的一部分。虾红素是来自鳌虾的消化酶，在这个多样的蛋白酶家族中是最小的成员之一。BMP‑1与虾红素具有39％的序列同源性，并且与该家族的所有成员一样包含保守的锌结合基序HEXXHXXGXXH。虾红素活性位点结构域包含在大的N末端与C末端结构域之间的裂缝内。所述活性位点锌由共有序列的三个组氨酸残基、酪氨酸序列和水分子配位。共有序列的谷氨酸作为锌结合水分子的通用碱基，亲核试剂攻击底物的易裂酰胺键。
[0021] BMP‑1是最小的PCP异构体。除BMP‑1外，还发现了四种密切相关的哺乳动物PCP：mTLD、TLL‑1和TLL‑2以及BMP‑1/His酶。所有这五种酶在催化虾红素样结构域中具有高度序列同源性，并且在某些功能上似乎也具有冗余性。PCP主要因其具有前胶原蛋白处理(纤维化和伤口愈合所需的过程)的能力以及其与促进胶原蛋白重塑的条件相关而被注意。PCP抑制作为抗纤维化方法的观念基于以下假设：阻断PCP活性本身不会减少前胶原蛋白的形成，但会阻止高度结构化的胶原纤维形成。在未被PCP裂解时，前胶原蛋白保留可溶解至0.5‑
1.0mg/ml，并且不容易掺入胶原纤维中。PCP的抑制与胶原蛋白的沉积有关，其更容易被基质金属蛋白酶(MMP)快速降解。因此，抑制PCP酶(尤其是BMP‑1)已被确立为治疗纤维化/瘢痕以及与之相关的疾病和病况的治疗方法(Turtle等人，Expert Opin.Ther.Patents
(2004)，14(8)：1185‑1197)。
[0022] 瘢痕形成是对组织或器官损伤的自然愈合反应的一部分。伤口愈合过程包括血液凝固、炎症反应、组织形成和组织重塑，重塑的组织成为瘢痕或纤维化组织。在理想的伤口愈合条件下，纤维化反应产生最小的瘢痕组织，大部分功能组织完好无损，从而保持器官功能。纤维化疾病特征在于成纤维细胞过度增殖和胶原蛋白过度沉积，表现为其自身贯穿组织的致密纤维。由此产生的纤维化组织会阻塞动脉、固定关节并使内脏硬化，阻碍身体维持正常功能的能力。纤维化疾病仍然是世界上的头号杀手，占美国总死亡率的45％以上，但目前大多数纤维化疾病都没有足够的治疗方法(Turtle等人，Expert Opin.Ther.Patents(2004)，14(8)：1185‑1197)。
[0023] 虽然纤维化通常不是原发性病理事件，而是在外伤、感染、炎症或外科手术之后发生，但其可能因未知原因发生，也可能具有遗传和自身免疫成分。因此，纤维化可发生在任何器官并伴随许多疾病状态，如肝炎(肝硬化)、高血压和心肌梗塞(心力衰竭)、哮喘和肺动脉高压(肺纤维化)、硬皮病(皮肤和内脏纤维化)、糖尿病(肾病)、动脉粥样硬化(纤维化血管)。此外，增生性皮肤瘢痕和瘢痕疙瘩可导致残疾和毁容，以及在中风和脊髓损伤的创伤后的急性CNS瘢痕是神经元再生的主要障碍。移植物内的中空结构的闭塞性纤维化的发生是慢性同种异体移植排斥的共同特性。纤维化和伤口愈合的过程，无论其病因学如何，实际上概括要点通常与胚胎发生相关的主要事件。然而，潜在的机制却大不相同；在成人中，伤口愈合通常伴随有瘢痕，而胎儿伤口愈合时很少或没有瘢痕。除了严重的常常危及生命的慢性纤维化疾病外，急性纤维化疾病如手术后瘢痕和皮肤瘢痕代表了抗纤维化药物的重要潜在市场。每年进行数以百万计的外科手术。手术瘢痕会使医疗程序复杂化并限制恢复，且治疗需求远远超出美容应用：妇科手术引起的纤维化可导致不孕；眼科手术后的纤维化可导致失明；血管成形术后的纤维化可导致再狭窄；关节手术后的纤维化会严重限制运动范围。最后，也已经假设PCP抑制剂可用于预防鳞状细胞癌(SCC)、恶性角质形成细胞的局部侵润、复发和转移，这是一种常见的癌症形式，尤其是皮肤癌。总之，对PCP具有选择性的抑制剂例如BMP‑1被认为是阻止与病理性纤维化病症和相关疾病相关的过量胶原蛋白沉积的最佳选择(Turtle等人，Expert Opin.Ther.Patents(2004)，14(8)：1185‑1197)。
[0024] 然而，也已经注意到，MMP的非特异性抑制与在人体临床试验中观察到的肌肉骨骼硬化副作用有关(Turtle等人，Expert Opin.Ther.Patents(2004)14(8)：1185‑1197，p.1190)。因此，需要选择性PCP、特别是BMP‑1抑制剂，其优选对MMP如MMP2、MMP9等具有选择性。
[0025] 孵化酶；Ovastacin
[0026] 据报道，ovastacin的抑制与哺乳动物配子融合直接相关，因此与生殖生物学和生育控制高度相关( 等人，Biol.Chem.(2014)，395(10)：1195‑1199)。透明带是哺乳动物卵母细胞周围的糖蛋白基质，在第一个精子侵入后会变硬，从而保护胚胎直至植入并防止多次受精(多精入卵)。决定性的透明带硬化是由金属蛋白酶ovastacin介导的，其在精子穿透后从卵母细胞的皮质颗粒中释放出来。然而，即使在没有精子的情况下，少量的
ovastacin也会从未受精的卵子中渗出，导致透明带硬化。这些少量的蛋白酶被血浆蛋白胎球蛋白‑B灭活，从而保持卵子可受精。一旦精子进入卵子，来自皮质囊泡的ovastacin制服胎球蛋白B并启动透明带硬化。受精控制的分子机制是在胎球蛋白‑B和皮质颗粒蛋白酶
ovastacin的高度特异性相互作用中发现的。提出的卵细胞表面ovastacin和胎球蛋白‑B相互作用机制是基于以下观察：在野生型小鼠卵母细胞中，未受精卵中渗出的少量ovastacin被胎球蛋白B抑制。侵入的精子触发皮质脱粒反应。皮质颗粒中的大量ovastacin释放将制服透明带中胎球蛋白B的抑制作用。Ovastacin裂解ZP2，且透明带会变硬。因此，会建立对受‑/‑
精卵的机械保护和针对多精入卵的阻断。相比之下，在没有胎球蛋白B的fetuB 小鼠中，未受精卵中渗出的少量ovastacin不被胎球蛋白B抑制。因此，即使没有受精，透明带硬化
(ZPH)也会发生，而过早的ZPH会使卵母细胞无法受精( 等人，Biol.Chem.(2014)，395
(10)：1195‑1199；见其中图1)。
[0027] ovastacin过早释放也被认为是缺乏胎球蛋白B的雌性小鼠不育的原因。此外，在IVF期间加入胎球蛋白B(天然存在的ovastacin抑制剂)部分阻止ZPH并改善受精率(等人，Molecular Human Reproduction(2017)，23(9)：607‑616)。
[0028] 因此，开发新的ovastacin抑制剂可有助于治疗哺乳动物不孕症并改善体外受精。
[0029] 线虫虾红素
[0030] 线虫虾红素对线虫(蛔虫)的发育至关重要，并在孵化、蜕皮和角质层合成中具有特异性作用，如Stepek等人(International Journal for Parasitology(2015)，45：345‑355)所述。正如其中所指出的，胃肠道(GI)线虫在全世界的牲畜和人体中导致慢性致衰弱性感染，对绵羊养殖产生重大经济影响，导致绵羊食欲不振、体重减轻、羊毛和羊肉及羊奶收率减少以及死亡。目前的治疗方法是使用驱虫药；然而，现在在兽医学寄生虫中已经对三大类驱虫药产生了多重抗药性。近年来，只有有限数目的具有新型作用方式的新药上市，从而限制了有效控制的前景。
[0031] 所有线虫都被称为角质层的外部保护结构包围。角质层作为外骨骼发挥作用，并在发育期间提供免受外部环境影响的保护作用，因此其对于线虫的生存很重要。这样的结构的合成是一个复杂的多步骤过程，涉及多种酶。角质层主要由胶原蛋白构成，其在独立生存的线虫秀丽隐杆线虫(C.elegans)和寄生线虫(例如绵羊的主要胃肠道线虫环纹背带线虫(Teladorsagia circumcincta)和捻转血矛线虫(Haemonchus contortus))之间是同源
的。已在秀丽隐杆线虫中详细研究了角质层生物合成的过程，许多关键的角质层合成酶和蛋白酶也存在于寄生线虫中，表明秀丽隐杆线虫与其寄生对应体的角质层生物合成过程可能相似。蛋白酶对于线虫在宿主中的持续发育和存活至关重要，并主要分为以下重要种类：
天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、苏氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。虾红素金属蛋白酶在秀丽隐杆线虫的角质层生物合成中起重要作用。这些酶是锌金属内肽酶，其特征在于N末端虾红素结构域中的两个保守基序：锌结合活性位点和甲硫氨酸转角(SxMHY)。
锌在活性位点的结合对于酶的催化活性是必不可少的；这样的锌在结合基序中的三个组氨酸残基、甲硫氨酸转角中的酪氨酸和一个水分子之间以三角‑双锥体几何结构五配位。虾红素蛋白酶在寄生线虫中的功能作用包括通过感染性L3s对宿主组织的渗透(Williamson等
人，Infect.Immun.(2006)，74：961‑967)、角质层形成和蜕皮(Gamble等人，J.Parasitol.(1989)，82：197‑202；Stepek等人，Int.J.Parasitol.(2010)，40：533‑542；Stepek等人，Parasitology(2011)，138：237‑248)以及消化(Gallego等人，Parasitol.Int.(2005)，54：
123‑133)。
[0032] 有39种线虫虾红素(NAS)金属蛋白酶在秀丽隐杆线虫中表达(Stepek等人，International Journal for Parasitology(2015)，45：345‑355)。所有的秀丽隐杆线虫NAS均具有相似的结构域排列。其中，DPY‑31(也称为NAS‑35)与上述脊椎动物原胶原C蛋白酶骨形态生成蛋白1(BMP‑1)(其在软骨和骨形成期间对胶原纤维的组装至关重要，通过其切除前胶原的C末端结构域以形成成熟的胶原蛋白)有相似之处。在秀丽隐杆线虫中，DPY‑
31在整个生命周期均表达，特别是在胚胎和幼虫阶段，在大多数皮下细胞以及直肠和外阴上皮细胞中(Novelli等人，Genetics(2004)168，1259‑1273)。DPY‑31(e2770)突变体中的前胶原蛋白仍处于部分加工状态，不能形成成熟的胶原蛋白(Novelli等人，Genetics(2006)，
172，2253‑2267)。因此，DPY‑31在秀丽隐杆线虫中的角质层形成和蜕皮过程中起着至关重要的作用。
[0033] 已注意到来自秀丽隐杆线虫和环纹背带线虫(T.circumcincta)的DPY‑31之间的相同性为74％，来自秀丽隐杆线虫和捻转血矛线虫(H.contortus)的DPY‑31之间相同性为
70％，以及来自环纹背带线虫和捻转血矛线虫的蛋白质之间的相同性为89％。DPY‑31同源基因序列在整个线虫门中的存在支持了该蛋白酶在线虫发育期间的保守的关键作用。已经进一步发现，针对靶前胶原C‑蛋白酶(PCP)特异性开发的多种化合物也是重组线虫DPY‑31的重要抑制剂，因此有望用于开发抗击重要线虫感染的新药(Stepek等人，International Journal for Parasitology(2015)，45：345‑355)。最后，France等人(Bioorganic&
Medicinal Chemistry Letters(2015)，25：5752‑5755)报道了来自人丝虫线虫马来丝虫(Brugia malayi)的DPY‑31的数种抑制剂，其对于来自羊寄生性胃肠道线虫环纹背带线虫的DPY‑31也具有活性。
[0034] 因此，虾红素家族的锌依赖性甲硫氨酸锌蛋白金属蛋白酶、更具体地是前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶、穿模肽酶、ovastacin和/或线虫蛋白以及甚至更具体地人或哺乳动物BMP‑1、穿模肽酶α、穿模肽酶β和/或ovastacin以及线虫DPY‑31可以被认为是高度相关的治疗靶点，并且对开发与之相关的疾病和病况的新疗法有很高的需求。
[0035] 化合物
[0036] US 4,146,721公开了吡唑‑4‑乙酸化合物，例如取代的吡唑‑4‑乙酸、其酯、酰胺、亚硝酸盐及其药学上可接受的盐，并且公开了这些化合物的制备方法。这些化合物是有用的镇痛剂、抗炎剂和退热剂。
[0037] WO 2006114263 A1公开了咪唑并[1，2‑a]吡啶衍生物，其是新型的肽去甲酰酶(PDF)抑制剂，因此作为新型抗生素受到特别关注。
[0038] E.Adiguzel等人(JOURNAL OF MOLECULAR STRUCTURE.vol.1127，第403‑412页)公开了两种新的异羟肟酸衍生物及其金属络合物的合成和鉴定，特别是对其酮/烯醇E/Z和氧肟酸酯(hydroxamate)/羟肟酸酯(hydroximate)形式的研究。
[0039] 本发明要解决的问题
[0040] 鉴于上述，本发明的目的在于提供化合物和/或药物组合物，所述化合物和/或药物组合物能够抑制虾红素家族的金属蛋白酶；特别是前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶、穿模肽酶、ovastacin和/或线虫虾红素；更特别是人或哺乳动物穿模肽酶α(例如人穿模肽酶α，hMeprin α)、穿模肽酶β(例如人穿模肽酶β，hMeprin β)、BMP‑1(例如人BMP‑1，hBMP‑1)、ovastacin(例如人ovastacin，hOvastacin)和/或来自线虫的DPY‑31(例如来自环纹背带线虫(tcDPY‑31)、捻转血矛线虫(hcDPY‑31)和马来丝虫(bmDPY‑31)的DPY‑31)。
[0041] 优选地，为了减轻潜在的副作用，所述抑制剂和/或药物组合物应当对包括ADAM(例如ADAM10和ADAM17(TACE))及MMP(例如MMP2、MMP9和MMP13)的甲硫氨酸锌蛋白超家族的其它成员具有选择性。优选地，所述抑制剂应选择性抑制选自hMeprin α、hMeprin β、hBMP‑
1、hOvastacin、tcDPY‑31、hcDPY‑31和bmDPY‑31中的一种或多种酶。更优选地，所述抑制剂应具有可接受的类药特性。
[0042] 另一个目的是提供包含根据任何前述目的的抑制剂的药物组合物，其适合给药至需要其的个体。
[0043] 另一个目的是提供制备这样的化合物的方法。
[0044] 另一个目的是提供治疗或预防人或动物体的方法，以及用于这样的方法的化合物或药物组合物。
[0045] 另一个目的是提供治疗或预防患有与一种或多种上述虾红素家族金属蛋白酶相关的疾病或病况或者具有发生其的风险的个体的方法。优选地，所述疾病或病况与选自
hMeprin α、hMeprin β、hBMP‑1、hOvastacin、tcDPY‑31、hcDPY‑31和bmDPY‑31中的一种或多种酶相关。
[0046] 另一个目的是提供治疗或预防患有选自以下的疾病或病况或者具有发生其的风险的个体的方法：阿尔茨海默病；肾炎；肾损伤；肾缺血性损伤；缺血性急性肾小管坏死；急性肾衰竭；膀胱炎症；炎性肠病(IBD)；克罗恩病；溃疡性结肠炎；慢性炎症；结肠炎；纤维化；
纤维化病症；瘢痕疙瘩；肺动脉高压；间质性肺病(ILD)；癌症；和结直肠癌，和/或用于这样的方法中的化合物。
[0047] 另一个目的是提供治疗或预防患有选自以下的疾病或病况或者具有发生其的风险的个体的方法：纤维化；急性纤维化疾病和病症；慢性纤维化疾病和病症；发生在器官中和/或伴随选自以下疾病和病症的纤维化：肝炎、肝硬化、高血压、心肌梗塞、心力衰竭、哮喘、肺动脉高压、硬皮病、纤维化皮肤和内脏器官、糖尿病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化和纤维化血管；增生性皮肤瘢痕；瘢痕疙瘩；肺纤维化；创伤后急性CNS瘢痕；中风或脊髓损伤后的神经元再生；移植物中空结构的闭塞性纤维化；慢性同种异体移植排斥；伤口愈合障碍；
术后瘢痕；皮肤瘢痕；妇科手术引起的纤维化；眼科手术后纤维化；血管成形术后纤维化；关节手术后纤维化；防止恶性角质形成细胞或鳞状细胞癌(SCC)的局部侵润、复发和转移；和/或用于这样的方法的化合物。
[0048] 另一个目的是提供治疗或预防哺乳动物不孕症的方法和用于哺乳动物体外受精(IVF)治疗的治疗用途，和/或用于这样的方法的化合物。
[0049] 另一个目的是提供治疗或预防患有选自以下的疾病或病况或者具有发生其的风险的个体的方法：线虫感染；由环纹背带线虫(Teladorsagia circumcincta)引起的感染；
由捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)引起的感染；和由马来丝虫(Brugia malayi)引起的感染；和/或用于这样的方法的化合物。
[0050] 发明概述
[0051] 作为上述问题的解决方案，本发明提供根据下式I的化合物，
[0052]
[0053] 其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体或其药学上可接受的盐，其中：
[0054] A独立地选自 和
[0055] B独立地选自 和
[0056] C独立地选自 ‑O‑和‑S‑；
[0057] F，如果存在的话，独立地选自 和
[0058] G，如果存在的话，独立地选自 和
[0059] H，如果存在的话，独立地选自 和
[0060] I，如果存在的话，独立地选自 和
[0061] 其中，如果存在F、G、H和I，则：
[0062] D是
[0063] E独立地选自 和 并且
[0064] 由D、E、F、G、H和I形成的环被R2表示的p个取代基取代，其中p为0、1、2、3或4；
[0065] 否则，如果不存在F、G、H和I，则：
[0066] D独立地选自 和 并且
[0067] E独立地选自 和 其中p是0、1、2、3、4或5；
[0068] L1和L2各自独立地选自烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其1 2
中L和L可以连接在一起形成环；
[0069] 每个X独立地选自C(Ra)Rb、NRa和O；
[0070] X和L2可以连接在一起形成环，其中所述环可以任选地与芳基稠合；
[0071] n是1、2、3或4；
[0072] m为0、1、2、3、4或5；
[0073] 每个R1独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基(sulfono)、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
[0074] 每个R2独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基、羟基和杂芳基的基团取代；
[0075] 每个R3独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、与芳基稠合的杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基的，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
[0076] Ra和Rb各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基。
[0077] 本发明进一步提供包含如上定义的化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
[0078] 本发明还提供制备上述化合物的方法。
[0079] 本发明进一步提供如上定义的化合物或药物组合物，其用于通过手术或疗法来治疗或预防人或动物体的方法；以及通过手术或疗法来治疗或预防人或动物体的方法，其包括向需要其的个体给药治疗有效量的上述化合物或药物组合物。
[0080] 本发明进一步提供如上定义的化合物或药物，其用于治疗或预防选自以下的疾病和病况的方法：
[0081] (a)阿尔茨海默病；肾炎；肾损伤；肾缺血性损伤；缺血性急性肾小管坏死；急性肾衰竭；膀胱炎症；炎性肠病(IBD)；克罗恩病；溃疡性结肠炎；慢性炎症；结肠炎；纤维化；纤维化病症；瘢痕疙瘩；肺动脉高压；间质性肺病(ILD)；癌症；结直肠癌；
[0082] (b)纤维化；急性纤维化疾病和病症；慢性纤维化疾病和病症；发生在器官中和/或伴随选自以下疾病和病症的纤维化：肝炎、肝硬化、高血压、心肌梗塞、心力衰竭、哮喘、肺动脉高压、硬皮病、纤维化皮肤和内脏器官、糖尿病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化和纤维化血管；增生性皮肤瘢痕；瘢痕疙瘩；肺纤维化；创伤后急性CNS瘢痕；中风或脊髓损伤后的神经元再生；移植物中空结构的闭塞性纤维化；慢性同种异体移植排斥；伤口愈合障碍；术后瘢痕；皮肤瘢痕；妇科手术引起的纤维化；眼科手术后纤维化；血管成形术后纤维化；关节手术后纤维化；防止恶性角质形成细胞或鳞状细胞癌(SCC)的局部侵润、复发和转移；
[0083] (c)哺乳动物不孕症；用于哺乳动物体外受精(IVF)治疗的治疗用途；
[0084] (d)线虫感染；由环纹背带线虫引起的感染；由捻转血矛线虫引起的感染；和由马来丝虫引起的感染；
[0085] 以及，和/或治疗或预防任何前述疾病或病况的方法，所述方法包括向需要其的个体给药治疗有效量的上述化合物或药物组合物。
[0086] 附图简述
[0087] 图1示出虾红素‑蛋白酶的结构比对。hMeprinα(同源模型，模板pdb：4GWN)、hMeprinβ(X射线，pdb：4GWN)、hOvastacin(同源模型，模板pdb：3LQB)、环纹背带线虫DPY‑31(tcDPY‑31，同源模型，模板pdb：6BTO)、捻转血矛线虫DPY‑31(hcDPY‑31，同源模型，模板pdb：6BTO)、hBMP‑1(X射线，pdb：6BTO)。
[0088] 图2示出比对的蛋白酶(hMeprinα(同源模型，模板pdb：4GWN)、hMeprin β(X射线，pdb：4GWN)、hOvastacin(同源模型，模板pdb：3LQB)的活性位点视图。示出抑制剂结合的关键侧链。
[0089] 图3示出比对的蛋白酶(hMeprin α(同源模型，模板pdb：4GWN)、hMeprin β(X射线，pdb：4GWN))、环纹背带线虫DPY‑31(tcDPY‑31，同源模型，模板pdb：6BTO)、捻转血矛线虫DPY‑31(hcDPY‑31，同源模型，模板pdb：6BTO)的活性位点视图。示出抑制剂结合的关键侧链。
[0090] 图4示出比对的蛋白酶(hMeprin α(同源模型，模板pdb：4GWN)、hMeprin β(X射线，pdb：4GWN)、hBMP‑1(X射线，pdb：6BTO)的活性位点视图。示出抑制剂结合的关键侧链。
[0091] 图5示出hMeprinα、hMeprin β、hOvastacin、tcDPY‑31和hcDPY‑31的CLUSTAL O(1.2.4)多重序列比对。
[0092] 发明详述
[0093] 治疗靶点、抑制活性和通过本发明实现的功效
[0094] 本发明人已经发现，如本文所示的实验结果所证明，根据式I的化合物表现出针对多种虾红素金属蛋白酶(特别是针对hMeprinα和hMeprin β)的高抑制活性(参见表2)。此外，如表3所示结果所证明，所述化合物还对虾红素金属蛋白酶表现出选择性，同时对包括ADAM(例如ADAM10和ADAM17(TACE))以及MMP(例如MMP2、MMP9和MMP13)的甲硫氨酸锌蛋白超家族的其它成员的活性显著较低，从而降低潜在副作用的风险。
[0095] 此外，同一家族中的其它酶如hOvastacin、tcDPY‑31和hcDPY‑31在其各自的活性2+
位点都具有相同的Zn 结合序列、相同的特异性袋(S1’)和在锌位点后面的高度保守的含甲硫氨酸转角(Met‑转角，SxMHY)，这从图5所示的序列比对中可以看出。此外，hMeprinα、hMeprin β与hOvastacin、tcDPY‑31和hcDPY‑31在整体三维结构中惊人地相似(如图1所示)，特别是其也用于抑制剂结合的活性位点(如图2‑4所示)。
[0096] 此外，早期的工作表明，已知作为前胶原C‑蛋白酶(例如BMP‑1)或穿模肽酶(放线酰胺素)的高效抑制剂的化合物也对线虫DPY‑31酶例如tcDPY‑31和hcDPY‑31(Stepek等人，International Journal for Parasitology(2015)，45：345‑355)以及tcDPY‑31和bmDPY‑31(France等人，Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters(2015)，25：5752‑5755)有效。
[0097] 鉴于上述证据和本文所示的实验结果，本发明的所有化合物均可用作虾红素家族的金属蛋白酶的抑制剂；所述虾红素家族的金属蛋白酶特别是前胶原C‑蛋白酶(PCP)酶、穿模肽酶、ovastacin和/或线虫虾红素；更特别是人或哺乳动物穿模肽酶α(如人穿模肽酶α，hMeprin α)、穿模肽酶β(如人穿模肽酶β，hMeprinβ)、BMP‑1(如人BMP‑1，hBMP‑1)、Ovastacin(如人ovastacin，hOvastacin)和/或线虫DPY‑31(如来自环纹背带线虫的DPY‑31(tcDPY‑31)、来自捻转血矛线虫的DPY‑31(hcDPY‑31)和来自马来丝虫的DPY‑31(bmDPY‑31)。
[0098] 本发明提供一类新的抑制剂，其物理化学性质不同于现有技术中已知的化合物(例如叔胺抑制剂)。此外，所述新分子的药代动力学和药效学性质也因此受到影响，这导致例如针对靶酶的改善的活性。此外，本发明化合物的特征在于存在平面的芳族或杂芳族中心环系。本发明描述的化合物的结构特征明显不同于任何先前描述的虾红素金属蛋白酶或相关酶的抑制剂。
[0099] 化合物
[0100] 具体地，本公开提供以下方面<1>至<31>中任一项的化合物。
[0101] <1>根据下式I的化合物，
[0102]
[0103] 其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，其中：
[0104] A独立地选自 和
[0105] B独立地选自 和
[0106] C独立地选自 ‑O‑和‑S‑；
[0107] F，如果存在，独立地选自 和
[0108] G，如果存在，独立地选自 和
[0109] H，如果存在，独立地选自 和
[0110] I，如果存在，独立地选自 和
[0111] 其中，如果存在F、G、H和I，则：
[0112] D是
[0113] E独立地选自 和 并且
[0114] 由D、E、F、G、H和I形成的环被p个由R2表示的取代基取代，
[0115] 其中p是0、1、2、3或4；
[0116] 否则，如果不存在F、G、H和I，则：
[0117] D独立地选自 和 并且
[0118] E独立地选自 和 其中p是0、1、2、3、4或5；
[0119] L1和L2各自独立地选自烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其1 2 1 2
中L 和L可以连接在一起形成环；优选地，L 和L各自独立地选自芳基、杂环基、杂芳基、环
1 2
烷基和环烯基，其中L和L可以连接在一起形成环；
[0120] 每个X独立地选自C(Ra)Rb、NRa和O；
[0121] n是1、2、3或4；
[0122] m是0、1、2、3、4或5；
[0123] 每个R1独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
[0124] 每个R2独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基羟基和杂芳基的基团取代；
[0125] 每个R3独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、与芳基稠合的杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
[0126] Ra和Rb各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基。
[0127] <2>根据方面1所述的化合物，除非另有说明，否则其中：
[0128] 所述芳基独立地选自单环C6‑10、双环C6‑10、单环C6和双环C6芳基；
[0129] 所述杂环基独立地选自单环C2‑11、单环C2‑8、单环C3‑5、双环C2‑11、双环C2‑8和双环C3‑5杂环基，其各自包含1至4个选自N、S和O的环杂原子；
[0130] 所述杂芳基独立地选自单环C2‑11、单环C2‑8、单环C3‑5、双环C2‑11、双环C2‑8和双环C3‑5芳族杂环基团，其各自包含1至3个选自N、S和O的环杂原子；
[0131] 所述烷基或烷(alk)独立地选自C1‑12、C1‑6、C1‑3、C1.2和C1烷基，其各自可以是直链或支链的、开链或环状的；
[0132] 所述烯基独立地选自包含至少一个C＝C键的C2‑12、C2‑4、C2‑3和C2基团，其各自可以是直链或支链的、开链或环状的；
[0133] 所述炔基独立地选自包含至少一个C≡C键的C2‑12、C2‑6、C2‑4、C2‑3和C2基团，其各自可以是直链或支链的、开链或环状的；
[0134] 所述环烷基独立地选自单环C3‑12、单环C3‑6、双环C3‑12和双环C3‑6烷基；
[0135] 所述环烯基独立地选自包含至少一个C＝C键的C3‑12、C4‑6和C5‑6碳环基团；
[0136] 其中每个上述基团均可以被一个或多个选自卤素、羧基、氰基、甲氧基和羟基的基团取代。
[0137] <3>根据方面1或2所述的化合物，除非另有说明，否则其中：
[0138] 所述芳基独立地是单环或双环C6‑10，优选C6芳基；
[0139] 所述杂环基独立地是包含1至4个选自N、S和O的环杂原子的单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5杂环基；
[0140] 所述杂芳基独立地是包含1至3个选自N、S和O的环杂原子的单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5芳族杂环基；
[0141] 所述烷基或烷独立地是直链或支链的、开链或环状的C1‑12，优选为C1‑6，更优选C1‑3，甚至更优选C1‑2烷基；
[0142] 所述烯基独立地是包含至少一个C＝C键的直链或支链的、开链或环状的C2‑12，优选C2‑4，更优选C2‑3，甚至更优选C2基团；
[0143] 所述炔基独立地是包含至少一个C≡C键的直链或支链的、开链或环状C2‑12，优选C2‑6，更优选C2‑4，甚至更优选C2‑3基团；
[0144] 所述环烷基独立地是C3‑12，优选C3‑6的单环或双环烷基；
[0145] 所述环烯基独立地是包含至少一个C＝C键的C3‑12，优选C4‑6，更优选C5‑6碳环基团；
[0146] 其中每个上述基团均可以被一个或多个选自卤素、羧基、氰基、甲氧基和羟基的基团取代。
[0147] <4>根据方面1至3中任一项所述的化合物，其由下式Ia表示：
[0148]
[0149] <5>根据方面1至4中任一项所述的化合物，其中如果不存在F、G、H和I，则环片段由以下结构之一表示：
[0150]
[0151] <6>根据方面1至5中任一项所述的化合物，其中当环片段 由表示时，
[0152] 则：
[0153] R3选自氢以及以下基团：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的环烷基、任选取代的环烯基、取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂芳基烷基，其中任选取代的或取代的分别是指被一个或多个独立地选自以下的基团任选取代或取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代。
[0154] <7>根据方面1至6中任一项所述的化合物，其中R3是被一个或多个独立地选自氨基、氯、氟、溴、碘、氰基、羟基、羧基、C1‑6烷基、C1‑C6烷氧基和羟基的基团取代的芳基。
[0155] <8>根据方面1至7中任一项所述的化合物，其由下式Ib表示：
[0156]
[0157] <9>根据方面1至8中任一项所述的化合物，其中如果存在F、G、H和I，则环片段由以下结构之一表示：
[0158]
[0159] <10>根据方面1至9中任一项所述的化合物，其中当环片段 由表示时，
[0160] 则m和p中的至少一个大于0。
[0161] <11>根据方面8至10中任一项所述的化合物，其中n＝1。
[0162] <12>根据方面1至11中任一项所述的化合物，其中m和p中的至少一个或各自均大于0。
[0163] <13>根据方面1至12中任一项所述的化合物，其中R1和R2是相同或不同的，并且各自独立地选自氯、氟、溴、碘、氰基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6烷基、氟(C1‑6烷基)、氟(C1‑6烷氧基)和具有酸性氢的官能团，所述具有酸性氢的官能团选自羟基、羧基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH四唑‑5‑基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH和四唑‑5‑基。
[0164] <14>根据方面1至13中任一项所述的化合物，其中L1(R1)m和L2(R2)p是相同或不同的，并且各自独立地由以下结构表示：
[0165]
[0166] 其中：
[0167] (i)Ro、Ro’、Rm、Rm’和Rp中的至少一个是具有酸性氢的官能团，所述具有酸性氢的官能团选自羟基、羧基、‑SO3H、‑P(O)(OH)2、‑C(O)‑NH‑OH和四唑‑5‑基，并且其余的是H或如前1 2
述方面中任一项对R或R所定义；和/或
[0168] (ii)Ro、Ro’、Rm、Rm’和Rp中的至少两个是烷氧基，其连接在一起作为5至8元杂环的1 2
一部分，并且其余的是H或如前述方面中任一项对R或R所定义；和/或
[0169] <15>根据方面1至14中任一项所述的化合物，其中L1(R1)m和L2(R2)p是相同或不同的，并且各自独立地选自2‑羧基苯基、3‑羧基苯基、4‑羧基苯基、3‑氯苯基、3‑氰基苯基、3‑氟苯基、3‑甲氧基苯基、3‑甲基苯基、4‑羧基苯基、4‑氯苯基、4‑氰基苯基、4‑氟苯基、4‑甲氧基苯基、3，4‑二甲氧基苯基、4‑甲基苯基、3‑羧基‑4‑甲氧基苯基、3‑氟‑4‑甲氧基苯基、4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基、5‑氯‑3‑氟‑4‑羟基苯基、3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基、3，5‑二氯‑4‑羟基苯基、2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基、2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基、1，3‑苯并二噁茂‑5‑基、3‑(三氟甲基)‑1H‑吡唑‑4‑基、3‑(1H‑四唑‑5‑基)苯基、2‑羧基环己基、3‑羧基环己基、3‑羧基环己基和(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)甲基；优选选自3‑羧基苯基、3‑氯苯基、3‑氰基苯基、3‑氟苯基、3‑甲氧基苯基、3‑甲基苯基、4‑羧基苯基、4‑氯苯基、4‑氰基苯基、4‑氟苯基、4‑甲氧基苯基、4‑甲基苯基、3‑羧基‑4‑甲氧基苯基、3‑氟‑4‑甲氧基苯基、4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基、
3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基、3，5‑二氯‑4‑羟基苯基、2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基、2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基和1，3‑苯并二噁茂‑5‑基。
[0170] <16>根据方面1至15中任一项所述的化合物，其中L1(R1)m和L2(R2)p是相同的。
[0171] <17>根据方面1至15中任一项所述的化合物，其中L1(R1)m和L2(R2)p是不同的。
[0172] <18>根据方面1至17中任一项所述的化合物，其中每个R3独立地选自氢以及以下基团：C1‑6烷基、羧基(C1‑6烷基)、氨基(C1‑6烷基)、氰基(C1‑6烷基)、C2‑6炔基、C3‑6环烷基、羧基(C6‑10芳基)、C1‑6烷氧基(C6‑10芳基)、氰基(C6‑10芳基)、卤代(C6‑10芳基)、羟基(C6‑10芳基)、C1‑6烷氧基(C2‑8杂芳基)、氰基(C2‑8杂芳基)、卤代(C2‑8杂芳基)、C3‑5杂芳基(C6‑10芳基)、羟基(C2‑8杂芳基)、羧基(C2‑8杂芳基)、(C6‑10芳基)甲基、(C1‑6烷氧基(C6‑10芳基))甲基、(羟基(C6‑10芳基))甲基、(羧基(C6‑10芳基))甲基、(C1‑6烷氧基(C2‑8杂芳基))甲基、(C2‑8杂芳基‑(C6‑10芳基))甲基、(羟基(C2‑8杂芳基))甲基和(羧基(C2‑8杂芳基))甲基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自氯、氟、溴、碘、羧基氰基、C1‑6烷基、C1‑C6烷氧基和羟基的基团取代。
[0173] <19>根据方面1至18中任一项所述的化合物，其中每个R3独立地选自氢以及以下基团：甲基、乙基、2‑丙基、1‑丙基、苯基、2‑氨基乙基、炔丙基、环丙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苯基、3‑羧基苯基、3‑氯苯基、3‑氰基苯基、3‑氟苯基、3‑甲氧基苯基、3‑甲基苯基、4‑羧基苯基、4‑氯苯基、4‑氰基苯基、4‑氟苯基、4‑甲氧基苯基、4‑甲基苯基、3‑羧基‑4‑甲氧基苯基、
3‑氟‑4‑甲氧基苯基、4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苯基、3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基、3，5‑二氯‑4‑羟基苯基、2，6‑二氟‑4‑甲氧基苯基、1，3‑苯并二噁茂‑5‑基、苄基、(3‑羧基苯基)甲基、(3‑氯苯基)甲基、(3‑氰基苯基)甲基、(3‑氟苯基)甲基、(3‑甲氧基苯基)甲基、(3‑甲基苯基)甲基、(4‑羧基苯基)甲基、(4‑氯苯基)甲基、(4‑氰基苯基)甲基、(4‑氟苯基)甲基、(4‑甲氧基苯基)甲基、(4‑甲基苯基)甲基、(3‑羧基‑4‑甲氧基苯基)甲基、(3‑氟‑4‑甲氧基苯基)甲基，(4‑氯‑
2‑氟‑3‑羟基苯基)甲基、(3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基苯基)甲基、(3，5‑二氯‑4‑羟基苯基)甲基、(2，
6‑二氟‑4‑甲氧基苯基)甲基、(2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基)甲基和(1，3‑苯并二噁茂‑
5‑基)甲基，和/或选自对甲基苯甲酸和间甲基苯甲酸。
[0174] <20>根据方面1至19中任一项所述的化合物，其中：
[0175] C选自 ‑O‑和‑S‑；
[0176] D选自 和 并且
[0177] R3C和R3D彼此相同或不同，并且各自独立地选自根据前述方面中任一项对于R3所定义的基团。
[0178] <21>根据方面20所述的化合物，其中R3C和R3D是彼此不同的。
[0179] <22>根据方面1至21中任一项所述的化合物，其中：每个X是C(Ra)Rb，其中所述Ca b a 1 2(R)R基团之一可以被NR基团替代；n是1或2；m是0、1、2或3；p是0、1、2或3；L是苯基；L是苯
1 1
基；R独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个R基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环或
2
2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；R 独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个
2 3
R基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环或2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；R选自氢、甲基、乙基、炔丙基、环丙基、2‑氨基乙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苄基、未取代的苯基，和选自3‑羧a b
基苯基和4‑羧基苯基的取代的苯基；并且R和R是氢。
[0180] <23>根据方面1至22中任一项所述的化合物，其中X为C(Ra)Rb；n为1；并且m和p中的至少一个大于0。
[0181] <24>根据方面1至21中任一项所述的化合物，其中每个X是C(Ra)Rb；n是1或2；m是0、1 2 1 2 3 a
1、2或3；p是0、1、2或3；L为苯基；L为环己基；R为COOH，R为COOH；R为氢；并且R和Rb为氢。
[0182] <25>根据方面1至21中任一项所述的化合物，其中每个X是C(Ra)Rb，其中所述C(Ra)b a 1 2R基团之一可以被NR基团替代；n是1或2；m为0、1、2或3；p为0、1、2或3；L为苯基；L为苯基；
1 1
R独立地选自Cl、F、OH、CN、OCH3和COOH，和/或两个R 基团一起形成1，3‑苯并二噁茂环或2，
1 2
3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英环的一部分；优选地，R 为氢；R为酸性基团的生物电子等排置换，
3 3
优选地，R为四唑；R选自氢、甲基、乙基、炔丙基、环丙基、2‑氨基乙基、‑CH2COOH、‑CH2CN、苄
3 a
基、未取代的苯基，和选自3‑羧基苯基和4‑羧基苯基的取代的苯基；优选地，R 是氢；并且R和Rb是氢。
[0183] <26>具有选自表2的结构的化合物、其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐。
[0184] <27>药物组合物，其包含根据方面1至25中任一项所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
[0185] <28>根据方面1至26中任一项所述的化合物或根据方面26所述的药物组合物，其用于治疗人或动物体的方法。
[0186] <29>根据方面1至26中任一项所述的化合物或根据方面26所述的药物组合物，其用于治疗或预防选自以下疾病和病况的方法：阿尔茨海默病；肾炎；肾损伤；肾缺血性损伤；
缺血性急性肾小管坏死；急性肾衰竭；膀胱炎症；炎性肠病(IBD)；克罗恩病；溃疡性结肠炎；
慢性炎症；结肠炎；纤维化；纤维化病症；瘢痕疙瘩；肺动脉高压；间质性肺病(ILD)；癌症；和结直肠癌。
[0187] <30>根据方面1至26中任一项所述的化合物或根据方面27所述的药物组合物，其用于治疗或预防选自以下疾病和病况的方法：纤维化；急性纤维化疾病和病症；慢性纤维化疾病和病症；发生在器官中和/或伴随选自以下疾病和病症的纤维化：肝炎、肝硬化、高血压、心肌梗塞、心力衰竭、哮喘、肺动脉高压、硬皮病、纤维化皮肤和内脏器官、糖尿病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化和纤维化血管；增生性皮肤瘢痕；瘢痕疙瘩；肺纤维化；创伤后急性CNS瘢痕；中风或脊髓损伤后的神经元再生；移植物中空结构的闭塞性纤维化；慢性同种异体移植排斥；伤口愈合障碍；术后瘢痕；皮肤瘢痕；妇科手术引起的纤维化；眼科手术后纤维化；血管成形术后纤维化；关节手术后纤维化；防止恶性角质形成细胞或鳞状细胞癌(SCC)的局部侵润、复发和转移。
[0188] <31>根据方面1至26中任一项所述的化合物或根据方面27所述的药物组合物，其用于治疗或预防选自哺乳动物不孕症的疾病和病况的方法，及在哺乳动物体外受精(IVF)治疗中的治疗用途。
[0189] <32>根据方面1至26中任一项所述的化合物或根据方面27所述的药物组合物，其用于治疗或预防选自以下的疾病和病况的方法：线虫感染；由环纹背带线虫引起的感染；由捻转血矛线虫引起的感染；以及由马来丝虫引起的感染。
[0190] 在方面<1>的一个优选实施方案中，本公开提供下式I的化合物，
[0191]
[0192] 其各个对映异构体、其各个非对映异构体、其水合物、其溶剂合物、其晶体形式、其各个互变异构体，或其药学上可接受的盐，其中：
[0193] A独立地选自 和]
[0194] B独立地选自 和
[0195] C独立地选自 ‑O‑和‑S‑；
[0196] F，如果存在，独立地选自 和
[0197] G，如果存在，独立地选自 和
[0198] H，如果存在，独立地选自 和
[0199] I，如果存在，独立地选自 和
[0200] 其中如果存在F、G、H和I，则：
[0201] D是
[0202] E独立地选自 和 并且
[0203] 由D、E、F、G、H和I形成的环被p个由R2表示的取代基取代，
[0204] 其中p是0、1、2、3或4；
[0205] 否则，如果不存在F、G、H和I，则：
[0206] D独立地选自 和 并且
[0207] E独立地选自 和 其中p是0、1、2、3、4或5；
[0208] L1和L2各自独立地选自烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和环烯基，其1 2
中L和L可以连接在一起形成环；
[0209] 每个x独立地选自C(Ra)Rb、NRa和O；
[0210] X和L2可以连接在一起形成环，其中所述环可以任选地与芳基稠合；
[0211] n是1、2、3或4；
[0212] m是0、1、2、3、4或5；
[0213] 每个R1独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基和羟基的基团取代；
[0214] 每个R2独立地选自卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH(烷基)、‑C(O)‑NH2、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷氧基、羟基和杂芳基的基团取代；
[0215] 每个R3独立地选自氢以及以下基团：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、与芳基稠合的杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以被一个或多个独立地选自氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基的基团取代，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；并且
[0216] Ra和Rb各自独立地选自氢、氘和C1‑3烷基，
[0217] 其中，除非另有说明：
[0218] 所述芳基独立地是单环或双环C6‑10，优选C6芳基；
[0219] 所述杂环基独立地是单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5杂环基，其包含1至4个选自N、S和O的环杂原子；
[0220] 所述杂芳基独立地是单环或双环C2‑11，优选C2‑8，更优选C3‑5芳族杂环基团，其包含1至3个选自N、S和O的环杂原子；
[0221] 所述烷基或烷独立地是直链或支链的、开链或环状的C1‑12，优选C1‑6，更优选C1‑3，甚至更优选C1‑2烷基；
[0222] 所述烯基独立地是包含至少一个C＝C键的直链或支链的、开链或环状C2‑12，优选C2‑4，更优选C2‑3，甚至更优选C2基团；
[0223] 所述炔基独立地是包含至少一个C≡C键的直链或支链的、开链或环状C2‑12，优选C2‑6，更优选C2‑4，甚至更优选C2‑3基团；
[0224] 所述环烷基独立地是C3‑12，优选C3‑6的单环或双环烷基；
[0225] 所述环烯基独立地是包含至少一个C＝C键的C3‑12，优选C4‑6，更优选C5‑6碳环基团；
[0226] 其中每个上述基团均可以被一个或多个选自卤素、羧基、氰基、甲氧基和羟基的基团取代，
[0227] 其中，当环片段 由 表示时，则：
[0228] R3选目氢以及以下基团：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的环烷基、任选取代的环烯基、取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂芳基烷基，其中任选取代的或取代的分别是指被一个或多个独立地选自以下的基团任选取代或取代：氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；
[0229] 当环片段 由 表示时，则m和p中的至少一个大于0；并且
[0230] 当环片段 由 表示时，则m大于0。
[0231] 在进一步优选的实施方案中，以下化合物a)至d)被排除在式(I)的化合物的范围之外：
[0232] 化合物a)：
[0233]
[0234] 1‑苯基‑3‑(p‑氯苯基)‑吡唑‑4‑基‑甲基异羟肟酸；
[0235] 化合物b)：
[0236]
[0237] 1，3，5‑三苯基‑吡唑‑4‑基‑甲基‑异羟肟酸；
[0238] 化合物c)：
[0239]
[0240] N‑羟基‑2‑(5‑甲基‑2‑苯基‑咪唑并[1，2‑a]吡啶‑3‑基‑氨基)‑乙酰胺；以及[0241] 化合物d)：
[0242]
[0243] (2‑苯基‑苯并咪唑‑1‑基)‑甲基异羟肟酸。
[0244] 化合物a)和b)在US 4,146,721中公开。
[0245] 化合物c)在WO 2006114263 A1中公开。
[0246] 化合物d)在E.Adiguzel等人(JOURNAL OF MOLECULAR STRUCTURE.vol.1127，第403‑412页)中公开。
[0247] 更优选地，就其在本文所述的疾病和病症的治疗或预防方法中的应用而言，化合物a)至d)不排除在式(I)的化合物的范围之外。
[0248] 定义2
[0249] 如本文所用，符号 表示能够与另外三个原子连接的sp碳原子，并且应理解为表示各自分子结构内的任何方向，例如也是 条件是双键必须是各自的平面环
系(ABCDE或ABCDEFGHI)的一部分。这类似地应用于符号 和 在这
2
些情况下的唯一区别是各自的sp碳原子能够与各自平面环系的另外两个原子连接，而基
2 2 3
团H、L (R)p和R分别是各自的平面环系(ABCDE或ABCDEFGHI)的取代基。如本文所用，符号
2
表示能够与另外两个原子连接的sp氮原子，并且应理解为表示各自分子结构内的
任何方向，例如也可以是 条件是双键必须是各自的平面环系(ABCDE或ABCDEFGHI)
3
的一部分。如本文所用，符号 表示能够与三个另外的原子连接的sp氮原子，并且应当
理解为在各自的分子结构内包括任何方向。这类似地应用于符号 在这样的情况下唯
3 3
一的区别是sp氮原子能够与各自的平面环系的另外两个原子连接，而基团R是各自平面环系的取代基。
[0250] 除非特别限定，否则本文所用的表述“烷基”表示C1‑12烷基，合适地为C1‑8烷基，例如C1‑6烷基，例如C1‑4烷基。烷基可以是直链或支链的。合适的烷基包括例如甲基、乙基、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)、戊基(例如正戊基)、己基(例如正己基)、庚基(例如正庚基)和辛基(例如正辛基)。术语“烷基”还包括环烷基。除非特别限定，否则表述“环烷基”表示C3‑10环烷基(即3至10个环碳原子)，更合适地表示C3‑8环烷基，例如C3‑6环烷基。示例性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。最合适的环碳原子数是三至六个。
[0251] 除非特别限定，表述“杂烷基”是指其中一个或多个碳原子(优选1、2或3个碳原子)被选自N、S和O的杂原子代替的烷基。
[0252] 除非特别限定，否则表述“碳环基”和“碳环”表示任何环系，其中所有环原子均是碳并且包含三至十二个环碳原子，合适地三至十个碳原子，并且更合适地三至八个碳原子。碳环基可以是饱和的或部分不饱和的，但不包括芳环。示例性碳环基包括单环、双环和三环环系，特别是单环和双环环系。其它碳环基包括桥环系(例如双环[2.2.1]庚烯基)。碳环基的具体实例是环烷基。碳环基的另一个实例是环烯基。
[0253] 除非特别限定，否则表述“芳基”表示C6‑12芳基，合适地C6‑10芳基，更合适地C6‑8芳基。芳基包含至少一个芳环(例如1、2或3个环)。具有一个芳环的代表性芳基的实例是苯基。具有两个芳环的代表性芳基的实例是萘基。
[0254] 除非特别限定，否则表述“杂环基”和“杂环”是指其中一个或多个(例如1、2或3个)环原子被选自N、S和O的杂原子替代的碳环基。杂环基的具体实例是环烷基(例如环戊基，或更特别是环己基)，其中一个或多个(例如1、2或3个，特别是1或2个，特别是1个)环原子被选自N、S或O的杂原子替代。示例性的含有一个杂原子的杂环基包括吡咯烷、四氢呋喃和哌啶，示例性含有两个杂原子的杂环基包括吗啉和哌嗪。杂环基的另一具体实例是环烯基(例如环己烯基)，其中一个或多个(例如1、2或3个，特别是1或2个，尤其是1个)环原子被选自N、S和O的杂原子替代。这样的基团的实例是二氢吡喃基(例如3，4‑二氢‑2H‑吡喃‑2‑基‑)。
[0255] 除非特别限定，否则表述“杂芳基”表示芳基，其中一个或多个(例如1、2、3或4个，合适地1、2或3个)环原子被选自N、S和O的杂原子替代，或表示含有一个或多个(例如1、2、3或4个，适当地1、2或3个)选自N、S和O的环原子的5元芳环。杂芳基表示“杂环基”或“杂环”基团的一般类别中的一个特定亚类。具有一个杂原子的示例性单环杂芳基包括：五元环(例如吡咯、呋喃、噻吩)；和六元环(例如吡啶，如吡啶‑2‑基、吡啶‑3‑基和吡啶‑4‑基)。具有两个杂原子的示例性单环杂芳基包括：五元环(例如吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、咪唑，如咪唑‑1‑基、咪唑‑2‑基、咪唑‑4‑基)；六元环(例如哒嗪、嘧啶、吡嗪)。具有三个杂原子的示例性单环杂芳基包括：1，2，3‑三唑和1，2，4‑三唑。具有四个杂原子的示例性单环杂芳基包括四唑。示例性双环杂芳基包括：吲哚(例如吲哚‑6‑基)、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、异喹啉、吲唑、苯并咪唑、苯并噻唑、喹唑啉和嘌呤。
[0256] 除非特别限定，否则表述“烷氧基芳基”、“羧基芳基”、“氰基芳基”、“卤代芳基”、“羟基芳基”和“杂芳基芳基”表示分别被至少一个烷氧基、羧基、氰基、卤素、羟基和杂芳基取代的芳基。
[0257] 除非特别限定，否则表述“烷氧基杂芳基”、“羧基杂芳基”、“氰基杂芳基”、“卤代杂芳基”和“羟基杂芳基”表示分别被至少一个烷氧基、羧基、氰基、卤素和羟基取代的杂芳基。
[0258] 例如在表述“烷氧基”、“卤代烷基”中的表述“烷”，应根据“烷基”的定义来解释。示例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基)、丁氧基(例如正丁氧基)、戊氧基(例如正戊氧基)、己氧基(例如正己氧基)、庚氧基(例如正庚氧基)和辛氧基(例如正辛氧基)。示例性卤代烷基包括氟烷基，例如CF3；示例性卤代烷氧基包括氟烷基，例如OCF3。
[0259] 术语“卤素”或“卤代”包括氟(F)、氯(C1)、溴(Br)和碘(I)。
[0260] 如本文所用，术语“氢”或“H”涵盖氢的所有同位素，特别是氕(1H)和氘(2H，也表示为D)。
[0261] 术语“任选取代的”是指任选地被一个或多个独立地选自氨基、卤素、氰基、羟基、羧基、‑C(O)O(烷基)、‑C(O)NH2、‑C(O)NH(烷基)、烷基磺酰基、具有酸性氢的官能团、烷氧基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂芳基和杂芳基烷基的基团取代，每个基团均可以进一步被一个或多个独立地选自卤素、羧基、氰基、烷基、烷氧基和羟基的基团取代；其中优选地，在每次出现时，所述芳基是C6芳基；所述杂环基是包含1至4个选自N、S和O的环杂原子的杂环基；所述杂芳基是包含1至3个选自N、S和O的环杂原子的C3‑5芳族杂环基团；所述烷基或烷为C1‑2烷基；所述烯基为包含至少一个C＝C键的C2基团；所述炔基为包含至少一个C≡C键的C2‑3基团；所述环烷基是C3‑6单环或双环烷基；所述环烯基是包含至少一个C＝C键的C5‑6碳环基团。
[0262] 如本文所用，术语“包含/包括”的含义包括三个选项，即“包含/包括”、“由...组成”和“基本上由...组成”。
[0263] 立体异构体
[0264] 请求保护的化合物的所有可能的立体异构体均包括在本发明中。在根据本发明的化合物具有至少一个手性中心时，其因此可以对映异构体的形式存在。当所述化合物具有两个或更多个手性中心时，其另外可以非对映异构体的形式存在。应理解，所有这样的异构体及其混合物均包含在本发明的范围内。在制备本发明化合物的方法产生立体异构体混合物的情况下，这些异构体可以通过常规技术(例如制备色谱法)分离。所述化合物可以消旋体形式制备，或者各个对映异构体可以通过对映选择性(enantiospecific)合成或通过拆分来制备。例如，可以通过标准技术将化合物拆分为其组分对映异构体，例如通过与旋光活性酸例如(‑)‑二‑对‑甲苯酰基‑d‑酒石酸和/或(+)‑二‑对甲苯酰基‑1‑酒石酸形成盐来形成非对映异构体对，然后分步结晶并再次生成游离碱，或者与旋光活性碱例如奎宁、奎尼丁、奎尼辛、cinkotoxine、(S)‑苯乙胺、(1R，2S)‑麻黄碱、(R)‑苯甘氨醇、(S)‑2‑氨基丁醇形成盐，然后分步结晶并再次生成游离酸。所述化合物还可以通过形成非对映异构体酯或酰胺，然后进行色谱分离并移除手性助剂来拆分。或者，所述化合物可以通过使用手性HPLC柱拆分。
[0265] 多晶型物晶体形式、溶剂合物、水合物
[0266] 此外，所述化合物的一些各个晶体形式可以多晶型物形式物存在，并且因此意在包括在本发明中。此外，一些化合物可与水(即水合物)或常见的有机溶剂形成溶剂合物，并且这样的溶剂合物也包括在本发明的范围内。所述化合物，包括其盐，也可以以其水合物形式获得，或者包含用于其结晶的其它溶剂。鉴于游离化合物与其盐、水合物或溶剂合物形式的化合物之间的密切关系，每当在本文中提及化合物时，也意指相应的盐、溶剂合物或多晶型物，条件是这在所述情况下是可能的或适当的。
[0267] 互变异构体
[0268] 如本文所用，术语“互变异构体”是指相邻单键和双键之间的质子迁移。互变异构过程是可逆的。本文所述的化合物可以经历在化合物的物理特性内的任何可能的互变异构化。
[0269] 药学可接受的盐
[0270] 如本文所用，术语“药学上可接受的”包括人和兽医用途。例如，术语“药学上可接受的”包括兽医学上可接受的化合物或人医学和保健中可接受的化合物。
[0271] 适用于医学的式I的化合物的盐、水合物和溶剂合物及其生理功能衍生物是其中反离子或缔合溶剂是药学上可接受的那些。然而，具有非药学上可接受的反离子或缔合溶剂的盐、水合物和溶剂合物在本发明的范围内，例如用作制备其它化合物及其药学上可接受的盐、水合物和溶剂合物的中间体。
[0272] 根据本发明的合适的盐包括与有机和无机酸或碱形成的那些盐。药学上可接受的酸加成盐包括与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、三氟乙酸、三苯乙酸、氨基磺酸、磺胺酸、琥珀酸、草酸、富马酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、谷氨酸、天冬氨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙磺酸、芳基磺酸(例如对甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸)、水杨酸、戊二酸、葡糖酸、丙三羧酸、肉桂酸、取代的肉桂酸(例如苯基、甲基、甲氧基或卤素取代的肉桂酸，包括4‑甲基和4‑甲氧基肉桂酸)、抗坏血酸、油酸、萘甲酸、羟基萘甲酸(例如1‑或3‑羟基‑2‑萘甲酸)、萘丙烯酸(例如萘‑丙烯酸)、苯甲酸、4‑甲氧基苯甲酸、2‑或4‑羟基苯甲酸、4‑氯苯甲酸、4‑苯基苯甲酸、苯丙烯酸(例如1，4‑苯二丙烯酸)、羟乙磺酸、高氯酸、丙酸、乙醇酸、羟基乙磺酸、双羟萘酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、糖精酸和三氟乙酸形成的那些盐。药学上可接受的碱盐包括铵盐、碱金属盐例如钠盐和钾盐、碱土金属盐例如钙和镁盐，以及与有机碱例如二环己胺和N‑甲基‑D‑葡糖胺的盐。
[0273] 本发明化合物的所有药学上可接受的酸加成盐形式均包括在本发明的范围内。
[0274] 药物组合物
[0275] 本发明的药物组合物包含上述化合物和药学上可接受的赋形剂。
[0276] 如本文所用，术语“药物组合物”旨在涵盖包含治疗有效量的请求保护的化合物的产品，以及直接或间接得自请求保护的化合物的组合的任何产品。如本文所用，术语“赋形剂”是指用于盖仑制剂的载体、粘合剂、崩解剂和/或其它合适的添加剂，例如用于液体口服制剂如混悬剂、酏剂和溶液剂；和/或用于固体口服制剂例如散剂、胶囊剂、胶囊锭和片剂。可加入混合物中的载体包括必要且惰性的药物赋形剂，包括但不限于合适的助悬剂、润滑剂、调味剂、甜味剂、防腐剂、包衣、造粒剂、染料和着色剂。
[0277] 治疗应用
[0278] 本公开提供化合物，例如上述方面<1>至<24>中任一项所述的化合物，和/或如上所述的药物组合物，其用于治疗人或动物体的方法。本公开还提供治疗人或动物体的方法，其中所述方法包括向需要其的个体给药治疗有效量的所述化合物或组合物。
[0279] 本公开还提供如本文所述的化合物和/或药物组合物，例如上述方面<1>至<24>中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防与穿模肽酶α和/或穿模肽酶β相关的疾病和病况的方法；以及治疗或预防这样的疾病和病况的方法，其中所述方法包括向需要其的个体给药治疗有效量的所述化合物或组合物。如上文背景部分所解释，这样的与穿模肽酶α和/或穿模肽酶β相关的疾病和病况包括阿尔茨海默病；肾炎；肾损伤；肾缺血性损伤；缺血性急性肾小管坏死；急性肾衰竭；膀胱炎症；炎性肠病(IBD)；克罗恩病；溃疡性结肠炎；慢性炎症；结肠炎；纤维化；纤维化病症；瘢痕疙瘩；肺动脉高压；间质性肺病(ILD)；癌症；和结直肠癌。
[0280] 本公开还提供如本文所述的化合物和/或药物组合物，例如上述方面<1>至<24>中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防与BMP‑1相关的疾病和病况的方法；以及治疗或预防这样的疾病和病况的方法，其中所述方法包括向需要其的个体给药治疗有效量的所述化合物或组合物。如上文背景部分所解释，这样的与BMP‑1相关的疾病和病况包括纤维化；急性纤维化疾病和病症；慢性纤维化疾病和病症；发生在器官中和/或伴随选自以下疾病和病症的纤维化：肝炎、肝硬化、高血压、心肌梗塞、心力衰竭、哮喘、肺动脉高压、硬皮病、纤维化皮肤和内脏器官、糖尿病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化和纤维化血管；增生性皮肤瘢痕；瘢痕疙瘩；肺纤维化；创伤后急性CNS瘢痕；中风或脊髓损伤后的神经元再生；移植物中空结构的闭塞性纤维化；慢性同种异体移植排斥；伤口愈合障碍；术后瘢痕；皮肤瘢痕；妇科手术引起的纤维化；眼科手术后纤维化；血管成形术后纤维化；关节手术后纤维化；以及防止恶性角质形成细胞或鳞状细胞癌(SCC)的局部侵润、复发和转移。
[0281] 本公开还提供如本文所述的化合物和/或药物组合物，例如上述方面<1>至<24>中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防与ovastacin相关的疾病和病况的方法；以及治疗或预防这样的疾病和病况的方法，其中所述方法包括向需要其的个体给药治疗有效量的所述化合物或组合物。如以上背景部分所解释，这样的与ovastacin相关的疾病和病况包括哺乳动物不孕症；以及用于哺乳动物体外受精(IVF)治疗的治疗用途。这样的治疗的代表性候选者可以是患有或疑似患有不孕症的个体(哺乳动物)。优选地，所述个体是雌性。更优选地，所述个体是女人。根据WHO‑ICMART修订后的术语表，人不孕症可以定义为“一种生殖系统疾病，定义为在12个月或更长时间的有规律的无预防措施性交后未能实现临床妊娠”。此外，本发明化合物可以给药至接受辅助生殖治疗如体外受精的女性，例如用于刺激受精。此外，本发明化合物可用作改善接受辅助生殖治疗或程序的个体的受精率的方法，例如通过向接受这样的治疗的个体给药治疗有效量的所述化合物或组合物，和/或通过在体外使卵母细胞与包含如本文所述的化合物的组合物接触。
[0282] 术语“体外受精(IVF)”可以指包括收集卵子、在体外用精子使卵子受精，以及当卵裂进行到一定程度时将卵子植入子宫腔中的方法，即可以包括诱导排卵、取卵、体外受精以及培养和胚胎移植的过程。
[0283] 本文使用的术语“个体”是指动物，优选哺乳动物，最优选人。
[0284] 如本文所用，术语“治疗有效量”是指在组织系统、动物或人体中引发研究人员、兽医、医师或其它临床医生寻求的生物学或医学反应(包括缓解正在治疗的疾病或病况的症状)的活性化合物或药剂的量。实施例
[0285] 合成方法的描述
[0286] 路线1
[0287]
[0288] 方法i：
[0289] 将各自的1，3‑二芳基‑1，3‑丙二酮或唑衍生物或苯并稠合的N‑杂环(1eq)溶解在DMF(c＝0.5M)中，冷却至0℃并用氢化钠(1.2eq)处理。30分钟后，滴加溴乙酸甲酯或另一种合适的烷基卤化物(1.1eq)。使混合物升温至室温并搅拌12小时。通过加入水停止反应并用EtOAc(3x30m1)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0290] 方法ii：
[0291] 将各自的1，3‑二芳基‑1，3‑丙二酮(1eq)溶解在二氯甲烷(c＝0.2M)中，冷却至0℃并用1，8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳‑7‑烯(DBU，0.2eq)处理。15分钟后，在15分钟内滴加溶解在DCM中的丙烯酸甲酯(2eq)。完全加入后，将反应升温至室温并搅拌48小时。通过加入饱和NaHCO3水溶液终止反应。分离有机层，并将水相用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0292] 方法iii：
[0293] 将通过方法i或ii获得的化合物(1eq)溶解在EtOH/THF混合物(2∶1，v/v，c＝0.07M)中。加入肼一水合物(5eq)并将混合物在室温下搅拌。在原料完全消耗后(约4至5小时)，蒸发挥发物。将剩余物在水中溶解，通过稀释的HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0294] 方法iv：
[0295] 将通过方法i或ii获得的化合物(1eq)溶解在EtOH/水混合物(3∶2，v/v，c＝0.4M)中。加入盐酸羟胺(1eq)并将混合物在微波中在110℃加热20分钟。冷却后，将混合物倒入冰水中并用DCM(2×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0296] 方法v：
[0297] 将各自的酯衍生物(1eq)溶解在MeOH(5ml)中，用NaOCH3(6eq)和盐酸羟胺(3eq)处理。将混合物在微波中在80℃加热10分钟。蒸发挥发物。将剩余物溶于水中，通过稀释的HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过半制备型HPLC纯化剩余物。
[0298] 实施例1：2‑(3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0299] 根据上述方法i、iii和v合成化合物。收率(最后一步)：83mg(40％)；ESI‑MS：m/z + 1294.5[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 12.03min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.32(s，
1.8H)，3.63(s，0.2H)，7.38‑7.42(m，2H)，7.46‑7.49(m，4H)，7.64‑7.66(m，4H)，10.09(br s，0.1H)，10.62(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0300] 实施例2：2‑(3，5‑二苯基异噁唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0301] 根据上述方法i、iv和v合成化合物。收率(最后一步)：32mg(35％)；ESI‑MS：m/z + + 1295.1[M+H] ，317.2[M+Na] ；HPLC(梯度1)：rt 14.56min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：
δ3.41(s，2H)，7.55‑7.62(m，6H)，7.68‑7.70(m，2H)，7.79‑7.82(m，2H)，10.77(s，1H).[0302] 实施例3：3‑(3，5‑三苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)丙烷异羟肟酸
[0303] 根据上述方法ii、iii和v合成化合物。收率(最后一步)：58mg(19％)；ESI‑MS：m/z + 1308.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.52min(96.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.06‑2.11(m，2H)，2.93‑2.97(m，2H)，7.41(t，2H，3J＝7.3Hz)，7.50(t，4H，3J＝7.6Hz)，7.64(d，4H，3J＝7.8Hz)，10.33(br s，1H).
[0304] 实施例4：3‑(3，5‑二苯基异噁唑‑4‑基)丙烷异羟肟酸
[0305] 根据上述方法ii、iv和v合成化合物。收率(最后一步)：11mg(22％)；ESI‑MS：m/z + + 1309.4[M+H] ，331.4[M+Na] ；HPLC(梯度1)：rt 14.93min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6xδ2.09‑2.13(m，2H)，2.95‑2.99(m，2H)，7.57‑7.63(m，2H)，7.69‑7.71(m，2H)，7.81‑7.84(m，
2H)，10.36(br s，1H).
[0306] 路线2
[0307]
[0308] 方法vi：
[0309] 将通过上述方法iii获得的各自的二芳基吡唑(1eq)或另一种合适的唑衍生物溶解在乙腈(c＝1.7M)中并用DBU(0.5eq)和丙烯酸甲酯(1.5eq)处理。将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物，并将剩余物溶解在EtOAc中。加入水，将水层用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。剩余物无需进一步纯化即可使用。
[0310] 实施例5：2‑(3，5‑二苯基吡唑‑1‑基)乙烷异羟肟酸
[0311] 根据上述方法iii、i和v合成化合物。收率(最后一步)：141mg(57％)；ESI‑MS：m/z + 1294.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.63min(97.5％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.68(s，
1.8H)，5.04(br s，0.2H)，6.91(s，1H)，7.31‑7.35(m，1H)，7.41‑7.55(m，5H)，7.65‑7.68(m，
2H)，7.83‑7.85(m，2H)，9.12(br s，0.9H)，9.36(br s，0.1H)，10.35(br s，0.1H)，10.93(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0312] 实施例6：3‑(3，5‑二苯基吡唑‑1‑基)丙烷异羟肟酸
[0313] 根据上述方法iii、vi和v合成化合物。收率(最后一步)：171mg(66％)；ESI‑MS：m/z + 1308.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 17.68min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.66(t，2H，3J＝7.2Hz)，4.32(t，2H，3J＝7.2Hz)，6.84(s，1H)，7.30‑7.34(m，1H)，7.41‑7.45(m，2H)，
7.47‑7.57(m，3H)，7.60‑7.63(m，2H)，7.84‑7.86(m，2H)，9.97(br s，0.1H)，10.53(br s，
0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0314] 路线3
[0315]
[0316] 方法vii：
[0317] 在氩气气氛下，将各自的苯甲酰胺衍生物(1eq)和2‑氟‑吡啶(1.1eq)溶解在密封管中的DCM(3ml)中。将混合物在冰浴上冷却并通过注射器缓慢加入三氟甲磺酸酐(1.1eq)。在0℃下进一步搅拌45分钟后，加入各自的苯甲酰肼。在室温下45分钟后，将混合物在微波中在140℃加热2小时。冷却后，加入饱和NaHCO3水溶液并用DCM(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅、CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0318] 实施例7：2‑(3，5‑二苯基‑1，2，4‑三唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0319] 根据上述方法vii和v合成化合物。收率(最后一步)：45mg(53％)；ESI‑MS：m/z + 1295.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 7.73min(98.2％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.56(s，
1.5H)，4.85(s，0.5H)，7.58‑7.70(m，10H)，10.50(br s，0.3H)，10.81(br s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0320] 实施例8：3‑(3，5‑二苯基‑1，2，4‑三唑‑4‑基)丙烷异羟肟酸
[0321] 根据上述方法vii和v合成化合物。收率(最后一步)：39mg(37％)；ESI‑MS：m/z + 1309.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 8.59min(97.0％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.10(t，2H，3J＝7.6Hz)，4.39(t，2H，3J＝7.5Hz)，7.61‑7.63(m，6H)，7.75‑7.78(m，4H)，9.89(br s，
0.1H)，10.28(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0322] 路线4
[0323]
[0324] 方法viii：
[0325] 将各自的1，4‑丁二酮(1eq)溶解在THF/甲苯(1：1v/v，c＝0.1M)中。加入合适的苄基保护的氨基酸衍生物(1.5eq)和对甲苯磺酸(0.07eq)并将混合物加热回流48小时。蒸发挥发物，将剩余物重新溶解在水中，用NaHCO3水溶液稍微碱化并用EtOAc(3×25ml)萃取。蒸发合并的有机层并通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化。
[0326] 方法ix：
[0327] 将各自的苄基保护的异羟肟酸衍生物溶解在MeOH/THF(1∶1v/v，10ml)中。加入钯碳并用氢气冲洗小瓶。在4巴下4小时后，将混合物通过Celite过滤并蒸发。通过半制备型HPLC纯化剩余物。
[0328] 实施例9：2‑(2，5‑二苯基吡咯‑1‑基)乙烷异羟肟酸
[0329] 根据上述方法viii和ix合成化合物。收率(最后一步)：25mg(37％)；ESI‑MS：m/z + 1293.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.84min(97.7％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.34(s，
1.5H)，4.65(s，0.5H)，6.27(s，2H)，7.33‑7.36(m，2H)，7.41‑7.47(m，8H)，8.99(br s，
0.6H)，9.19(br s，0.2H)，10.26(br s，0.2H)，10.54(br s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0330] 实施例10：3‑(2，5‑二苯基吡咯‑1‑基)丙烷异羟肟酸
[0331] 根据上述方法viii和ix合成化合物。收率(最后一步)：9mg(4％)；ESI‑MS：m/z + + 1307.4[M+H] ，329.4[M+Na] ；HPLC(梯度1)：rt 16.27min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：
δ1.83‑1.87(m，1.8H)，2.09‑2.13(m，0.2H)，4.28‑4.32(m，2H)，6.23(s，2H)，7.34‑7.38(m，
2H)，7.44‑7.51(m，8H)，8.57(br s，0.6H)，8.81(br s，0.1H)，9.76(br s，0.1H)，10.16(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0332] 路线5
[0333]
[0334] 方法x：
[0335] 将各自的4‑氧‑4‑苯基丁酸酯(1eq)溶解在甲苯(c＝0.2M)中。加入甲苯磺酰肼(1eq)并将混合物在80℃下搅拌2小时。加入苯胺衍生物(2eq)、Cu(OAc)2(1eq)和特戊酸(2eq)并将混合物加热至100℃过夜。蒸发挥发物，并通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/乙醚梯度)纯化剩余物。
[0336] 实施例11：2‑(3，5‑二苯基三唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0337] 根据上述方法x和v合成化合物。收率(最后一步)：23mg(32％)；ESI‑MS：m/z 295.1+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 10.43min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.63(s，1.7H)，
3.92(s，0.3H)，7.42‑7.45(m，1H)，7.52(t，2H，3J＝7.8Hz)，7.57‑7.69(m，5H)，7.75‑7.77(m，2H)，9.04(br s，0.6H)，9.39(br s，0.2H)，10.33(s，0.1H)，10.76(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0338] 路线6
[0339]
[0340] 方法xi：
[0341] 将丙二酸乙酯钾(1.5eq)、MgCl2(无水，1eq)在THF(c＝0.6M)中的悬浮液在氩气气氛下在50℃搅拌6小时。在另一个烧瓶中，在0℃在氩气气氛下将N，N’‑羰基二咪唑(1.5eq)分批加入Boc‑Phg‑OH(1eq)在THF(c＝0.6M)中的溶液中，并将混合物在室温下搅拌2小时。通过注射器向所述悬浮液中加入上述Boc‑苯基甘氨酸溶液，并将混合物在室温下用力搅拌过夜。蒸发挥发物，将剩余物在水中溶解并通过稀释的HCl水溶液调节至pH 3。将水层用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。将剩余物用在EtOAc(20ml)中的HCl溶液处理并将混合物在室温搅拌直至TLC显示原料完全转化。蒸发挥发物，剩余物无需进一步纯化即可使用。
[0342] 方法xii：
[0343] 将得自方法xi的化合物溶解在EtOH(c＝0.4M)中。向溶液中加入三乙胺(1.5eq)和异硫氰酸苯酯(1.2eq)，并将混合物加热至50℃保持4小时。然后将反应混合物真空浓缩至干。将剩余物悬浮在甲苯(c＝0.4M)中并用PPTS(0.1eq)处理。将混合物加热至120℃持续4小时。冷却至室温后，蒸发挥发物并将剩余物在水中溶解。将水层用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0344] 方法xiii：
[0345] 将得自方法xii的环状硫脲悬浮在冰醋酸(c＝0.3M)中。逐滴加入H2O2(30％，4eq)并将混合物在室温下搅拌5分钟。将反应冷却至0℃并用10％K2CO3溶液(10ml)淬灭。用1N NaOH溶液将混合物的pH调节至pH9。将混合物用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0346] 实施例12：2‑(3，5‑二苯基咪唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0347] 根据上述方法xi、xii、xiii和v合成化合物。收率(最后一步)：34mg(39％)；ESI‑+ 1MS：m/z 294.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.51min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.47(s，1.7H)，3.77(s，0.3H)，7.44‑7.47(m，1H)，7.51‑7.69(m，9H)，8.88(br s，0.1H)，9.32(br s，0.1H)，10.25(s，0.2H)，10.61(s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0348] 路线7
[0349]
[0350] 方法xiv：
[0351] 将邻苯二胺或取代的类似物(1eq)溶解在乙腈(c＝0.2M)中。加入各自的醛(1eq)、30％过氧化氢(4eq)和硝酸铈铵(0.1eq)并将混合物在微波照射下加热至50℃持续12分钟。
蒸发挥发物，将剩余物用水溶解并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0352] 方法xv：
[0353] 将通过方法xiv获得的各自的2‑苯基苯并咪唑(1eq)溶解在乙腈(2ml)中。加入丙烯酸甲酯(1.1eq)和K2CO3(1eq)并将混合物加热回流6小时。蒸发挥发物并用少量EtOAc溶解。加入水，并将混合物用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0354] 实施例13：2‑(2‑苯基苯并咪唑‑1‑基)乙烷异羟肟酸
[0355] 根据上述方法xiv、i和v合成化合物。收率(最后一步)：88mg(66％)；ESI‑MS：m/z + 1268.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 5.96min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.95(s，1.6H)，
5.29(s，0.4H)，7.44‑7.51(m，2H)，7.64‑7.71(m，4H)，7.78‑7.84(m，1H)，7.88‑7.90(m，2H)，
10.62(br s，0.2H)，11.10(br s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0356] 实施例14：3‑(2‑苯基苯并咪唑‑1‑基)丙烷异羟肟酸
[0357] 根据上述方法xiv、xv和v合成化合物。收率(最后一步)：33mg(37％)；ESI‑MS：m/z + 1282.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.61min(95.7％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.59(t，2H，3J＝7.4Hz)，4.60(t，2H，3J＝7.7Hz)，7.49‑7.57(m，2H)，7.67‑7.74(m，3H)，7.80‑7.83(m，
1H)，7.87‑7.89(m，2H)，7.93‑7.95(m，1H)，10.05(br s，0.1H)，10.50(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0358] 实施例15：2‑[2‑(4‑甲氧基苯基)苯并咪唑‑1‑基]乙烷异羟肟酸
[0359] 根据上述方法xiv、i和v合成化合物。收率(最后一步)：55mg(36％)；ESI‑MS：m/z + 1298.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.88min(98.2％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.90(s，3H)，
4.97(s，1.6H)，5.32(s，0.4H)，7.22‑7.26(m，2H)，7.72‑7.87(m，4H)，10.67(s，0.2H)，11.15(s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0360] 实施例16：2‑[2‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)苯并咪唑‑1‑基]乙烷异羟肟酸[0361] 根据上述方法xiv、i和v合成化合物，苯酚的最终脱保护通过用BBr3(1M在DCM中，+5eq)处理来完成。收率(最后一步)：24mg(51％)；ESI‑MS：m/z 336.5[M+H] ；HPLC(梯度1)：
1
rt 7.31min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.80(s，1.6H)，5.13(s，0.4H)，7.06‑7.46(m，3H)，7.62(d，1H，3J＝7.7Hz)，7.77(d，1H，3J＝7.7Hz)，10.43(br s，0.2H)，10.91(br s，
0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0362] 路线8
[0363]
[0364] 方法xvi：
[0365] 将各自的1‑氟‑2‑硝基苯衍生物(1eq)、氨基酸叔丁酯(1eq)和NaHCO3(2eq)悬浮在EtOH(c＝0.3M)中。在微波照射下将混合物加热至120℃持续20分钟。冷却至室温后，将混合物转移到烧瓶中并用EtOH(5ml)稀释。分批加入各自的醛和Na2S2O4。将混合物加热回流过夜。蒸发挥发物。将剩余物用少量水溶解，加入饱和NaHCO3水溶液，并将混合物用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0366] 方法xvii：
[0367] 将通过方法i或xvi获得的化合物(1eq)用在二氧六环中的5M HCl溶液(50eq)处理并用冰冷却。使混合物升温至室温并搅拌过夜。蒸发挥发物，无需进一步纯化即可使用。
[0368] 方法xviii：
[0369] 将通过方法xvii获得的各自的2‑(2‑苯基‑1H‑苯并咪唑‑1‑基)乙酸(1eq)溶解在二甲基甲酰胺(c＝0.2M)中。加入TBTU(1eq)和DIPEA(2eq)并将混合物在室温下搅拌。数分钟后，加入O‑苄基羟胺盐酸盐(1eq)和DIPEA(2eq)并将混合物在室温下搅拌3小时。用水淬灭反应并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。在氩气气氛下，将纯化的产物在密封烧瓶中的DCM(c＝0.1M)中溶解。将混合物冷却至0℃并用BBr3(1M在DCM中，10‑13eq)处理以最终脱保护。使混合物升温至室温并搅拌过夜。用水淬灭反应并用冰冷却。将水层用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过半制备型HPLC纯化剩余物。
[0370] 实施例17：2‑[1‑[2‑(羟基氨基‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑2‑基]苯甲酸
[0371] 根据上述方法xiv、i、xvii和xviii合成化合物。收率(最后一步)：1.5mg(2％)；+ 1
ESI‑MS：m/z 312.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 5.17min(＞99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ
5.21(br s，0.4H)，7.61‑7.67(m，2H)，7.72‑7.82(m，3H)，7.86‑7.92(m，2H)，8.34‑8.37(m，
1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0372] 实施例18：3‑[1‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑2‑基]苯甲酸
[0373] 根据上述方法xiv、i、xvii和xviii合成化合物。收率(最后一步)：5mg(3％)；ESI‑+ 1MS：m/z 312[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.13min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.92(s，
1.6H)，5.25(s，0.4H)，7.39‑7.46(m，2H)，7.63‑7.66(m，1H)，7.74‑7.80(m，2H)，7.99‑8.01(m，0.2H)，8.11‑8.13(m，0.8H)，8.17‑8.19(m，1H)，8.35(s，0.2H)，8.46(s，0.8H)，10.60(s，
0.2H)，11.05(s，0.8H)，13.31(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0374] 实施例19：4‑[1‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑2‑基]苯甲酸
[0375] 根据上述方法xiv、i、xvii和xviii合成化合物。收翠(最后一步)：4mg(4％)；ESI‑+ 1MS：m/z 312[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.37min(>99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ5.09(s，
1.5H)，5.47(s，0.5H)，7.61‑7.66(m，2H)，7.76‑7.78(m，1H)，7.84‑7.86(m，1H)，7.92‑7.94(m 0.4H)，7.99‑8.01(m，1.6H)，8.29‑8.33(m，2H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0376] 实施例20：2‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑1‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑4‑羧酸
[0377] 根据上述方法xvi、xvii和xiii合成化合物。收率(最后一步)：32mg(39％)；ESI‑+ 1MS：m/z 380[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 7.44min(91.4％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.88(s，
1.6H)，5.20(br s，0.4H)，7.08‑7.11(m，0.2H)，7.15‑7.19(m，0.8H)，7.43‑7.45(m，1H)，
7.53(t，1H，3J＝7.5Hz)，7.91‑7.95(m，2H)，10.48(br s，0.2H)，10.90(s，0.8H)，10.95(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0378] 实施例21：2‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑1‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑5‑羧酸
[0379] 根据上述方法xvi、xvii和xiii合成化合物。收翠(最后一步)：35mg(26％)；ESI‑+ 1MS：m/z 380[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 8.48min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.79(s，
1.6H)，5.10(s，0.4H)，7.02‑7.06(m，0.2H)，7.10‑7.14(m，0.8H)，7.40‑7.42(m，1H)，7.58‑
7.60(m，0.2H)，7.63‑7.65(m，0.8H)，7.93‑7.97(m，1H)，8.29(s，1H)，10.39(br s，0.2H)，
10.83(br s，0.7H)，10.87(s，1H)，12.83(br s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0380] 实施例22：2‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑3‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]苯并咪唑‑5‑羧酸
[0381] 根据上述方法xvi、xvii和xiii合成化合物。收率(最后一步)：49mg(43％)；ESI‑+ 1MS：m/z 379.9[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 8.75min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.83(s，1.6H)，5.14(s，0.4H)，7.03‑7.06(m，0.2H)，7.12‑7.16(m，0.8H)，7.40‑7.43(m，1H)，
7.78‑7.81(m，1H)，7.90‑7.93(m，1H)，8.12(s，0.2H)，8.21(s，0.8H)，10.42(s，0.2H)，10.84(br s，0.8H)，10.90(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0382] 路线9
[0383]
[0384] 力法xiv*：
[0385] 将吡啶‑2，3‑二胺或取代的类似物(1eq)溶解在水(1M)中，用各自的醛(1eq)处理并加热回流过夜。冷却后，将混合物用NaHCO3水溶液碱化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0386] 方法xix：
[0387] 将各自的氨基酸酯(1eq)溶解在二甲基甲酰胺(c＝1.0M)中。加入2‑氯‑3‑硝基吡啶衍生物(1eq)和三乙胺(2.5eq)并将混合物在微波中加热至120℃持续20分钟。冷却后，加入水并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。剩余物无需进一步纯化即可使用。
[0388] 方法xx：
[0389] 将通过方法xix获得的硝基吡啶衍生物溶解在DMF/EtOH(1∶1v/v，c＝0.15M)中。加入各自的醛(1eq)和Na2S2O4(3eq)并将混合物在80℃搅拌22小时。蒸发挥发物，并将剩余物用少量水溶解。将混合物用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc 1∶1)纯化剩余物。
[0390] 实施例23：2‑(2‑苯基咪唑并[4，5‑b]吡啶‑3‑基)乙烷‑异羟肟酸
[0391] 根据上述方法xix、xx和v合成化合物。收翠(最后一步)：35mg(39％)；ESI‑MS：m/z + 1269.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.75min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.92(s，
1.6H)，5.26(s，0.4H)，7.36‑7.39(m，1H)，7.58‑7.61(m，3H)，7.78‑7.80(m，0.5H)，7.87‑
4
7.89(m，1.5H)，8.14‑8.16(dd，1H，3J＝7.8Hz，J＝1.2Hz)，8.38‑8.89(m，1H)，9.53(br s，
0.2H)，10.45(s，0.2H)，11.01(s，0.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0392] 实施例24：2‑(2‑苯基咪唑并[4，5‑b]吡啶‑1‑基)乙烷‑异羟肟酸
[0393] 根据上述方法xiv*、i和v合成化合物。收率(最后一步)：38mg(20％)；ESI‑MS：m/z + 1269.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 6.61min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ5.54(s，
1.4H)，5.86(s，0.6H)，7.69‑7.71(m，3H)，7.98(t，1H，3J＝7.1Hz)，8.32‑8.34(m，2H)，8.73‑
8.79(m，2H)，9.32(br s，0.7H)，9.84(br s，0.3H)，10.80(s，0.3H)，11.27(s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0394] 路线10
[0395]
[0396] 实施例25：2‑(2‑苯基吲哚‑1‑基)乙烷异羟肟酸
[0397] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：91mg(34％)；ESI‑MS：m/z267.3+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.81min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.66(s，1.7H)，4.99(s，0.3H)，6.58(s，1H)，7.08‑7.12(m，1H)，7.16‑7.20(m，1H)，7.36‑7.38(m，1H)，7.43‑7.47(m，1H)，7.49‑7.53(m，2H)，7.58‑7.64(m，3H)，10.34(s，0.1H)，10.93(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0398] 实施例26：3‑(2‑苯基吲哚‑1‑基)丙烷异羟肟酸
[0399] 根据上述方法vi和v合成化合物。收率(最后一步)：33mg(18％)；ESI‑MS：m/z + 1281.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.22min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.34‑2.38(m，2H)，4.36‑4.40(m，2H)，6.54(s，1H)，7.07‑7.10(m，1H)，7.18‑7.22(m，1H)，7.45‑7.49(m，1H)，7.51‑7.58(m，6H)，9.97(br s，0.1H)，10.46(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0400] 路线11
[0401]
[0402] 方法xxi：
[0403] 将各自的苯甲酰基丙酸(1eq)溶解在乙酸(c＝0.33M)中。加入苯肼(1.2eq)、对甲苯磺酸(1.1eq)和ZnCl2(1eq)并将混合物在微波中加热至180℃持续40分钟。冷却后，加入水，并将混合物用EtOAc(3×25m1)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0404] 方法xxii：
[0405] 将通过方法xxi获得的各自的吲哚衍生物溶解在甲醇(5ml)中并用浓H2SO4处理。将混合物加热回流4小时。蒸发挥发物，重新溶解在二氯甲烷中并用饱和NaHCO3水溶液小心洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并蒸发。剩余物无需进一步纯化即可使用。
[0406] 实施例27：2‑(2‑苯基‑1H‑吲哚‑3‑基)乙烷异羟肟酸
[0407] 根据上述方法xxi、xxii和v合成化合物。收率(最后一步)：14mg(15％)；ESI‑MS：m/+ + 1z267.2[M+H] ，206.1[M‑CH2NO2] ；HPLC(梯度1)：rt 11.97min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.51(s，1.9H)，3.85(s，0.1H)，7.02(t，1H，3J＝7.6Hz)，7.12(t，1H，3J＝7.5Hz)，
7.36‑7.42(m，2H)，7.51(t，2H，3J＝7.7Hz)，7.61(d，1H，3J＝7.8Hz)，7.87(d，2H，3J＝
7.8Hz)，10.77(s，1H)，11.26(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0408] 路线12
[0409]
[0410] 方法xxiii：
[0411] 将氨基吡啶(1eq)和各自的醛(1.2eq)溶解在甲苯(c＝0.2M)中。加入分子筛(200mg)并将混合物加热至120℃持续14小时。冷却至室温后，加入Cu(OAc)2×H2O(0.1eq)和丙炔酸乙酯(1eq)并加热至120℃持续3小时。然后，将混合物通过Celite过滤并蒸发挥发物。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0412] 实施例28：2‑[2‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)咪唑并[1，2‑a]吡啶‑3‑基]乙烷异羟肟酸
[0413] 根据上述方法xxiii和v合成化合物，苯酚的最终脱保护通过用BBr3(1M在DCM中，+5eq)处理来完成。收率(最后一步)：7mg(13％)；ESI‑MS：m/z 336.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
6.75min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.90(s，1.7H)，4.19(s，0.3H)，7.05‑7.14(m，
1H)，7.42‑7.44(m，2H)，7.81‑7.93(m，2H)，8.62‑8.74(m，1H)，9.01(br s，0.3H)，9.45(br s，0.1H)，10.37und 10.84(br s，1H)，10.80(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0414] 路线13
[0415]
[0416] 方法xxiv：
[0417] 将2‑氨基吡啶或取代的类似物(1eq)溶解在MeOH(c＝0.4M)中。加入各自的醛(1eq)并将混合物在环境温度下搅拌10分钟。加入异氰基乙酸甲酯(1eq)后，在微波照射下将反应在100℃加热30分钟。冷却后，加入冷却的乙醚。通过过滤收集所得沉淀物，无需进一步纯化即可使用。
[0418] 实施例29：2‑[(2‑苯基咪唑并[1，2‑a]吡啶‑3‑基)氨基]‑乙烷异羟肟酸
[0419] 根据上述方法xxiv和v合成化合物。收率(最后一步)：32mg(6％)；ESI‑MS：m/z + 1283.2[M+H] ；HPLC(梯度2)：rt 6.91min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.56(s，1.8H)，
3.90(s，0.2H)，5.86(br s，1H)，7.44‑7.53(m，2H)，7.61(t，2H，3J＝7.8Hz)，7.83‑7.84(m，
2H)，8.01‑8.03(m，2H)，8.91‑8.93(m，2H)，10.10(br s，0.3H)，10.54(br s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0420] 实施例30：4‑[3‑[[2‑(羟基氨基)‑2‑氢代‑乙基]氨基]‑咪唑并[1，2‑a]吡啶‑2‑基]苯甲酸
[0421] 根据上述方法xxiv和v合成化合物。收率(最后一步)：67mg(11％)；ESI‑MS：m/z + 1327.2[M+H] ；HPLC(梯度2)：rt 6.69min(93.4％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.91(s，2H)，
5.92(br s，1H)，7.35‑7.41(m，1H)，7.71‑7.79(m，2H)，8.11‑8.17(m，4H)，8.84‑8.90(m，
2H)，10.51(s，1H)，13.13(br s，1H).
[0422] 实施例31：3‑[3‑[[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]氨基]‑咪唑并[1，2‑a]吡啶‑2‑基]苯甲酸
[0423] 根据上述方法xxiv和v合成化合物。收率(最后一步)：39mg(10％)；ESI‑MS：m/z + 1327.2[M+H] ；HPLC(梯度2)：rt 7.15min(98.9％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.90(s，2H)，
5.93(br s，1H)，7.41‑7.45(m，1H)，7.72(t，1H，3J＝7.8Hz)，7.80‑7.84(m，2H)，8.03‑8.05(m，1H)，8.29‑8.31(m，1H)，8.59(br s，1H)，8.89‑8.96(m，2H)，10.52(br s，1H).[0424] 实施例32：2‑[[2‑(2，3‑二氢‑1，4‑苯并二噁英‑6‑基)咪唑并[1，2‑a]吡啶‑3‑基]氨基]乙烷异羟肟酸
[0425] 根据上述方法xxiv和v合成化合物。收率(最后一步)：36mg(10％)；ESI‑MS：m/z + 1327.2[M+H] ；HPLC(梯度2)：rt 8.19min(96.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.55(s，2H)，
4.34(s，4H)，5.81(br s，1H)，7.09‑7.11(m，1H)，7.46‑7.55(m，3H)，7.81‑7.88(m，2H)，
8.92‑8.94(m，2H)，10.11(br s，0.3H)，10.53(br s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0426] 实施例33：3‑[[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]氨基]‑2‑苯基‑咪唑并[1，2‑a]吡啶‑8‑羧酸
[0427] 根据上述方法xxiv和v合成化合物。收率(最后一步)：16mg(11％)；ESI‑MS：m/z + 1327.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 5.81min(98.0％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.51(s，2H)，
5.78(br s，1H)，7.36‑7.63(m，6H)，7.98‑8.04(m，2H)，8.17‑8.29(m，1H)，10.50(s，1H).[0428] 路线14
[0429]
[0430] 方法xxv：
[0431] 将含有各自的吡啶(1eq)、[Cp*RhCl2]2(0.05eq)和Cu(OAc)2(2eq)的小瓶密封并用氩气吹扫。加入二甲基甲酰胺(c＝0.2M)和丙烯酸甲酯(1.2eq)并将混合物在130℃下搅拌过夜。用水淬灭反应并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0432] 实施例34：2‑(2‑苯基吲唑‑3‑基)乙烷异羟肟酸
[0433] 根据上述方法xxv和v合成化合物。收率(最后一步)：18mg(56％)；ESI‑MS：m/z + 1268.1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 9.49min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.83(s，1.8H)，
4.15(s，0.2H)，7.08‑7.11(m，1H)，7.30‑7.34(m，1H)，7.55‑7.66(m，4H)，7.72‑7.78(m，3H)，
10.21(s，0.1H)，10.86(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0434] 路线15
[0435]
[0436] 方法xxvi：
[0437] 将2‑(3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)‑N‑三苯甲基氧基‑乙酰胺(1eq)溶解在二氯甲烷(c＝0.1M)中。加入各自的硼酸(2eq)、三乙胺(2eq)、Cu(OAc)2(1.5eq)和分子筛，并将混合物在室温下用力搅拌直至TLC显示原料完全转化。将混合物通过Celite过滤并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。将纯化的产物用TFA/DCM(1：1v/v，10ml)和三异丙基硅烷(180μl)处理并在室温下搅拌1至2小时。蒸发挥发物，剩余物通过半制备型HPLC纯化。
[0438] 实施例35：2‑(1‑甲基‑3，5‑二苯基‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0439] 根据上述方法i和v合成化合物。收翠(最后一步)：96mg(45％)；ESI‑MS：m/z 308.2+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 11.55min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.14(s，1.8H)，
3.45(s，0.2H)，3.77(s，3H)，7.33‑7.37(m，1H)，7.41‑7.58(m，7H)，7.64‑7.67(m，2H)，10.00(s，0.1H)，10.45(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0440] 实施例36：2‑(1，3，5‑三苯基吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0441] 根据上述方法xxvi合成化合物。收率(最后一步)：50mg(14％)；ESI‑MS：m/z 370.3+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.63min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.24(s，1.8H)，
3.54(s，0.2H)，7.28‑7.50(m，13H)，7.66‑7.77(m，2H)，10.06(s，0.1H)，10.53(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0442] 实施例37：4‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑3，5‑二苯基‑吡唑‑1‑基]苯甲酸[0443] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：55mg(13％)；ESI‑MS：m/z414.2+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 13.08min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.24(s，1.8H)，3.55(s，0.2H)，7.28‑7.52(m，10H)，7.68‑7.79(m，2H)，7.90‑7.92(m，2H)，10.09(s，0.1H)，10.55(s，0.9H)，13.06(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0444] 实施例38：3‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑3，5‑二苯基‑吡唑‑1‑基]苯甲酸[0445] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：45mg(11％)；ESI‑MS：m/z 414.3+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 13.09min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.25(s，1.8H)，3.55(s，0.2H)，7.27‑7.51(m，10H)，7.67‑7.78(m，2H)，7.83‑7.91(m，2H)，10.08(s，0.1H)，10.53(s，0.9H)，13.13(brs，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0446] 实施例39：2‑(1‑苄基‑3，5‑二苯基‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0447] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：81mg(35％)；ESI‑MS：m/z 383.4+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.63min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.18(s，1.8H)，3.47(s，0.2H)，5.28(s，2H)，7.01‑7.04(m，2H)，7.22‑7.31(m，3H)，7.34‑7.52(m，8H)，7.58‑7.70(m，2H)，9.97(s，0.1H)，10.45(S，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0448] 实施例40：4‑[[4‑(2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑1‑基]甲基]苯甲酸
[0449] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：130mg(32％)；ESI‑MS：m/z + 1428.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 12.69min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.18(s，
1.8H)，3.48(s，0.2H)，5.35(s，2H)，7.13‑7.15(m，2H)，7.35‑7.49(m，8H)，7.60‑7.70(m，
2H)，7.85‑7.87(m，2H)，9.98(s，0.1H)，10.45(s，0.9H)，12.90(brs，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0450] 实施例41：3‑[[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑1‑基]甲基]苯甲酸
[0451] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：16mg(5％)；ESI‑MS：m/z 428.2+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 12.88min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.17(s，1.8H)，3.47(s，0.2H)，5.34(s，2H)，7.23‑7.25(m，1H)，7.35‑7.50(m，9H)，7.59‑7.70(m，3H)，7.81‑7.83(m，1H)，9.96(s，0.1H)，10.45(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0452] 实施例42：2‑[1‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基苄基)‑3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0453] 根据上述方法i和v合成化合物，随后使用在DCM(5ml)中的3eq的BBr3进行苯酚脱+
保护。收率(最后一步)：142mg(54％)；ESI‑MS：m/z 452.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
14.75min(98.4％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.15(s，1.8H)，3.46(s，0.2H)，5.27(s，2H)，
6.42‑6.46(m，1H)，7.11‑7.13(m，1H)，7.34‑7.53(m，8H)，7.57‑7.67(m，2H)，9.97(s，0.1H)，
10.36‑10.44(m，1.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0454] 实施例43：2‑[1‑(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基甲基)‑3，5‑二苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0455] 根据上述方法i和v合成化合物。收率(最后一步)：161mg(53％)；ESI‑MS：m/z + 1428.4[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 15.33min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.15(s，
1.8H)，3.46(s，0.2H)，5.17(s，2H)，5.97(s，2H)，6.47‑6.49(m，1H)，6.56‑6.57(M，1H)，
6.79‑6.81(m，1H)，7.34‑7.51(m，8H)，7.58‑7.69(m，2H)，9.96(s，0.1H)，10.44(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0456] 路线16
[0457]
[0458] 方法xxvii：
[0459] 在用隔膜密封的烧瓶中，将各自的苯乙酮衍生物(1eq)溶解在无水甲苯(c＝1M)中。将溶液冷却至‑60℃。通过注射器在‑60℃在氩气气氛下加入DMPU(3.6eq)和LiHMDS(1M在THF中，1.2eq)。搅拌30分钟后，滴加溴乙酸甲酯或其它合适的烷基卤化物(1.5eq)。将混合物再搅拌10分钟，然后升温至室温并再搅拌5小时。蒸发挥发物，并用少量水溶解剩余物。
将水层通过稀释的HCl水溶液轻微酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。剩余物通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/乙醚梯度)纯化。
[0460] 方法xxviii：
[0461] 将通过方法xxvii获得的各自叔丁酯衍生物在0℃下用TFA/DCM(1∶1，10ml)处理并搅拌2小时。蒸发挥发物，并通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0462] 方法xxviii＊：
[0463] 将各自的甲酯衍生物溶解在THF/水(3∶1，c＝0.4M)中。加入LiOH*H2O(2eq)并将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物并将剩余物溶于水中，通过稀释的HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。剩余物无需进一步纯化即可使用。
[0464] 方法xxix：
[0465] 将各自的4‑氧‑4‑苯基丁酸衍生物(1eq)溶解在二甲基甲酰胺(c＝0.2M)中。加入TBTU(1eq)和DIPEA(2eq)并将混合物在室温下搅拌。数分钟后，加入O‑苄基羟胺盐酸盐(1eq)和DIPEA(2eq)并将混合物在室温下搅拌3小时。用水淬灭反应并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，庚烷/EtOAc梯度)纯化剩余物。
[0466] 方法xxx：
[0467] 在用隔膜密封的烧瓶中，将通过方法xxix获得的各自的N‑苄氧基‑4‑氧代‑4‑苯基丁酰胺衍生物(1eq)溶解在干燥甲苯(c＝0.4M)中。在氩气下将溶液冷却至0℃。通过注射器快速加入LiHMDS(1M在THF溶液中，2.1eq)并将混合物搅拌5分钟。一次性加入各自的酰氯衍生物(0.5eq)并使混合物升温至室温。用力搅拌混合物直至TLC显示酰氯完全转化。向混合物中加入AcOH(2ml)。加入EtOH(10ml)和THF(5ml)以形成均匀混合物，然后加入N2H4*H2O(34.3eq)。将混合物加热至50℃并通过TLC监测反应。蒸发挥发物并将剩余物溶于水中，通过稀释的HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0468] 方法xxx＊：
[0469] 将各自的羧酸衍生物(0.5eq)溶解在无水THF(c＝0.3M)中。在氩气气氛下，将CDI加入溶液中。将混合物在室温下搅拌1小时。在单独的烧瓶中，将通过方法xxix获得的各自的N‑苄氧基‑4‑氧代‑4‑苯基丁酰胺衍生物(1eq)溶解在干燥甲苯(c＝0.4M)中并用隔膜密封。在氩气下将溶液冷却至0℃。通过注射器快速加入LiHMDS(1M在THF溶液中，2.1eq)并将混合物搅拌5分钟。一次性加入各自的活化羧酸衍生物(0‑5eq)并使混合物升温至室温。用力搅拌混合物直至TLC显示羧酸衍生物完全转化。向混合物中加入AcOH(2ml)。加入EtOH(10ml)和THF(5ml)以形成均匀混合物，然后加入肼一水合物(34.3eq)。将混合物加热至50℃并通过TLC监测反应。蒸发挥发物并将剩余物溶于水中，通过稀释的HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过快速色谱法(二氧化硅，CHCl3/MeOH梯度)纯化剩余物。
[0470] 方法xxxi：
[0471] 在氩气气氛下，将通过方法xxx或xxx*获得的化合物溶解在密封烧瓶中的DCM(c＝0.1M)中。将混合物冷却至0℃并用BBr3(1M在DCM中，3‑15eq)处理以用于最终脱保护。使混合物升温至室温并搅拌过夜。用水淬灭反应并用冰冷却。将水层用EtOAc(3×25ml)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过半制备型HPLC纯化剩余物。
[0472] 实施例44：2‑(3‑甲基‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0473] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+
最终脱保护。收率(最后一步)：22mg(27％)；ESI‑MS：m/z 232.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
6.56min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ2.20(s，3H)，3.21(s，1.9H)，3.55(br s，
0.1H)，7.34‑7.38(m，1H)，7.44(t，2H，3J＝7.3Hz)，7.65‑7.67(m，2H)，10.58(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0474] 实施例45：2‑(3‑环戊基‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0475] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+
最终脱保护。收率(最后一步)：49mg(31％)；ESI‑MS：m/z 286.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
9.07min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ1.60‑1.71(m，4H)，1.74‑1.78(m，2H)，1.93‑
2.00(m，2H)，3.05‑3.13(m，1H)，3.22(s，1.9H)，3.56(br s，0.1H)，7.34‑7.38(m，1H)，7.43(t，2H，3J＝7.3Hz)，7.67(d，2H，3J＝7.3Hz)，9.96(br s，0.1H)，10.56(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0476] 实施例46：2‑(3‑苄基‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基)乙烷异羟肟酸
[0477] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+
最终脱保护。收率(最后一步)：24mg(30％)；ESI‑MS：m/z 308.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.43min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.21(s，1.8H)，3.54(br s，0.2H)，3.96(s，
2H)，7.17‑7.22(m，1H)，7.26‑7.29(m，4H)，7.34‑7.37(m，1H)，7.43(t，2H，3J＝7.6Hz)，
7.66‑7.68(m，2H)，9.98(br s，0.1H)，10.61(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0478] 实施例47：2‑[3‑(3‑甲氧基苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0479] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法ix完成苄基保护的异羟肟酸的最+
终脱保护。收率(最后一步)：145mg(82％)；ESI‑MS：m/z 324.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.69min(98.1％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.32(s，1.8H)，3.63(br s，0.2H)，3.81(s，
3H)，6.95‑6.98(m，1H)，7.20‑7.22(m，2H)，7.36‑7.42(m，2H)，7.47(t，2H，3J＝7.5Hz)，
7.64‑7.65(m，2H)，10.12(br s，0.1H)，10.63(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0480] 实施例48：2‑[3‑(4‑甲氧基苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0481] 根据上还方法xxix和xxx合成化合彻，根据方法ix完成苄基保护的异羟肟酸的最+
终脱保护。收率(最后一步)：114mg(48％)；ESI‑MS：m/z 324.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.37min(97.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.29(s，1.8H)，3.60(s，0.2H)，3.81(s，3H)，
7.03(d，2H，3J＝8.7Hz)，7.37‑7.41(m，1H)，7.46(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.57(d，2H，3J＝
8.7Hz)，7.63‑7.65(m，2H)，10.08(br，0.1H)，10.60(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0482] 实施例49：2‑[3‑(3，4‑二甲氧基苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0483] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法ix完成苄基保护的异羟肟酸的最+
终脱保护。收率(最后一步)：49mg(52％)；ESI‑MS：m/z 354.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
9.95min(98.6％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.30(s，1.8H)，3.61(br s，0.2H)，3.80‑3.81(m，6H)，7.03‑7.06(m，1H)，7.15‑7.17(m，1H)，7.23‑7.24(m，1H)，7.37‑7.41(m，1H)，7.47(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.66(d，2H，3J＝7.6Hz)，10.13(br s，0.1H)，10.63(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0484] 实施例50：2‑[3‑(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0485] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法ix完成苄基保护的异羟肟酸的最+
终脱保护。收率(最后一步)：45mg(41％)；ESI‑MS：m/z 338.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.40main(98.1％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.29(s，1.8H)，3.59(s，0.2H)，6.08(s，2H)，
7.00‑7.02(m，1H)，7.11‑7.14(m，1H)，7.20‑7.21(m，1H)，7.37‑7.41(m，1H)，7.47(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.61‑7.63(m，2H)，10.11(br s，0.1H)，10.62(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0486] 实施例51：3‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]苯甲酸[0487] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异+
羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：5mg(6％)；ESI‑MS：m/z 338.2[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 9.39min(95.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.35(s，1.7H)，3.65(br s，0.3H)，
7.40‑7.43(m，1H)，7.49(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.57‑7.65(m，3H)，7.89(d，1H，3J＝7.8Hz)，
7.96(d，1H，3J＝7.8Hz)，8.27(s，1H)，10.12(br s，0.1H)，10.61(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0488] 实施例52：4‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]苯甲酸[0489] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异+羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：16mg(5％)；ESI‑MS：m/z 338.3[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 9.41min(95.5％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.67(br s，0.2H)，7.41‑7.44(m，1H)，
7.49(t，2H，3J＝7.5Hz)，7.65(d，2H，3J＝7.6Hz)，7.79(d，2H，3J＝8.1Hz)，8.01‑8.05(m，
2H)，8.91(br s，0.7H)，9.26(br s，0.1H)，10.13(br s，0.1H)，10.66(s，0.9H)，13.16(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0490] 实施例53：2‑[3‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0491] 根据上述方法xxix和xxx‑合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚和苄基保护的异羟+肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：28mg(45％)；ESI‑MS：m/z 362.2[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 10.32min(97.0％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.24(s，1.8H)，3.55(br s，0.2H)，
7.00(t，1H，3J＝7.8Hz)，7.26‑7.29(m，1H)，7.38‑7.42(m，1H)，7.47(t，2H，3J＝7.3Hz)，
7.66(d，2H，3J＝7.3Hz)，9.92(br s，0.1H)，10.45(br s，1.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0492] 实施例54：2‑[3‑(3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基‑苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0493] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚和苄基保护的异羟+肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：13mg(17％)；ESI‑MS：m/z 362.3[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 10.51min(95.9％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.30(s，1.8H)，3.61(s，0.2H)，7.39‑
7.44(m，1H)，7.46‑7.52(m，4H)，7.60(d，2H，3J＝7.3Hz)，10.57(br s，1H)，10.69(s，0.9H)，
10.92(s，0.1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0494] 实施例55：2‑[3‑(3‑氰基苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0495] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+最终脱保护。收率(最后一步)：25mg(39％)；ESI‑MS：m/z 319.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.48min(95.6％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.36(s，1.8H)，3.66(br s，0.2H)，7.42‑7.45(m，1H)，7.50(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.61‑7.64(m，2H)，7.66‑7.71(m，1H)，7.86(d，1H，3J＝
7.7Hz)，8.02(d，1H，3J＝7.8Hz)，8.12(s，1H)，10.69(s，0.9H)，10.92(s，0.1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0496] 实施例56：2‑[3‑(4‑氰基苯基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0497] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：27mg(42％)；ESI‑MS：m/z 74.1C2H4NO2·片段，319.2[M+H+ 1] ；HPLC(梯度1)：rt 10.56min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.36(s，1.8H)，3.67(br s，0.2H)，7.42‑7.45(m，1H)，7.50(t，2H，3J＝7.6Hz)，7.62(d，2H，3J＝7.7Hz)，7.88‑7.94(m，4H)，10.15(br s，0.1H)，10.68(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0498] 实施例57：2‑[3，5‑双(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0499] 根据上述方法xxvii、xxviii*、xxix和xxx合成化合物，根据方法ix完成苄基保护+的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：29mg(13％)；ESI‑MS：m/z 382.3[M+H] ；HPLC
1
(梯度1)：rt 10.72min(95.4％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.26(s，1.9H)，3.56(br s，
0.1H)，6.08(s，4H)，6.99‑7.01(m，2H)，7.08‑7.10(m，2H)，7.16‑7.17(m，2H)，10.12(br s，
0.1H)，10.63(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0500] 实施例58：3‑[3‑(3‑羧基苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基]苯甲酸
[0501] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：3mg(3％)；ESI‑MS：m/z 382.3[M++ 1H] ；HPLC(梯度1)：rt8.67min(93.0％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.37(s，1.3H)，3.66(s，
0.1H)，7.61(t，2H，3J＝7.8Hz)，7.87‑7.89(m，2H)，7.96‑7.98(m，2H)，8.20‑8.25(m，2H)，
10.13(br s，0.1H)，10.61(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0502] 实施例59：4‑[3‑(4‑羧基苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基]苯甲酸
[0503] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：3mg(5％)；ESI‑MS：m/z 382.2[M++ 1H]；HPLC(梯度1)：rt 8.43min(90.2％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ3.49(s，2H)，7.74‑7.76(m，4H)，8.09‑8.14(m，4H).
[0504] 实施例60：2‑[3，5‑双(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0505] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：4mg(11％)；ESI‑MS：m/z 430.3[M+H+ 1]；HPLC(梯度1)：rt 10.40min(96.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.15(s，1.8H)，3.47(br s，0.2H)，6.99‑7.03(m，2H)，7.26‑7.29(m，2H)，9.76(br s，0.1H)，10.31(s，0.9H)，10.50(br s，2H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0506] 实施例61：3‑[3‑(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基)苯甲酸
[0507] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxviii*和ix完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：90mg(69％)；ESI‑MS：m/z + + 1382.3[M+H] ，404.3[M+Na] ；HPLC(梯度1)：rt 9.63min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ
3.32(s，1.8H)，3.61(br s，0.2H)，6.09(s，2H)，7.02‑7.04(m，1H)，7.10‑7.13(m，1H)，7.19‑
7.20(m，1H)，7.58(t，1H，3J＝7.7Hz)，7.84‑7.86(m，1H)，7.94‑7.96(m，1H)，8.18‑8.24(m，
1H)，10.13(br s，0.1H)，10.62(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0508] 实施例62：4‑[3‑(1，3‑苯并二噁茂‑5‑基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基)苯甲酸
[0509] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxviii*和ix完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：8mg(10％)；ESI‑MS：m/z + 1382.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 9.68min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.33(s，1.7H)，
3.63(br s，0.3H)，6.09(s，2H)，7.02‑7.04(m，1H)，7.12‑7.14(m，1H)，7.21‑7.22(m，1H)，
7.75‑7.77(m，2H)，8.00‑8.02(m，2H)，10.14(br s，0.1H)，10.66(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0510] 实施例63：3‑[5‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑3‑基]苯甲酸
[0511] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚、甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：4mg(16％)；ESI‑MS：m/z + 1406.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 9.55min(95.3％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：63.26(s，2H)，
6.97‑7.01(m，1H)，7.28‑7.30(m，1H)，7.57‑7.61(m，1H)，7.90‑7.92(m，1H)，7.95‑7.97(m，
1H)，8.21‑8.27(m，1H)，9.95(br s，0.1H)，10.45(s，0.7H)，10.53(br s，0.5H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0512] 实施例64：3‑[5‑(3‑氯‑5‑氟‑4‑羟基‑苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑3‑基]苯甲酸
[0513] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚、甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：18mg(26％)；ESI‑MS：m/z + 1406.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 9.55min(97.6％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.33(s，
1.8H)，3.63(br s，0.2H)，7.47‑7.52(m，2H)，7.60(t，1H，3J＝7.8Hz)，7.83‑7.84(m，1H)，
7.96‑7.98(m，1H)，8.16‑8.22(m，1H)，10.19(br s，0.1H)，10.62‑10.68(m，2H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0514] 实施例65：4‑[5‑(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑3‑基]苯甲酸
[0515] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苯酚、甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：4mg(5％)；ESI‑MS：m/z 406.3+ 1[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 9.63min(＞99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ3.40(s，1.9H)，3.74(br s，0.1H)，6.97‑7.01(m，1H)，7.21‑7.24(m，1H)，7.76‑7.78(m，2H)，8.11‑8.13(m，2H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0516] 实施例66：3‑[3‑(4‑羧基苯基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基]苯甲酸
[0517] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：3mg(7％)；ESI‑MS：m/z 382.3[M++ 1H]；HPLC(梯度1)：rt 8.64min(＞99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ3.49(s，1.9H)，3.82(br s，0.1H)，7.60(t，1H，3J＝7.8Hz)，7.75‑7.77(m，2H)，7.87‑7.89(m，1H)，8.07‑8.14(m，3H)，
8.30(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0518] 实施例67：3‑苯基‑1，4‑二氢茚并[1，2‑c]吡唑‑4‑羧肟胺(carbohydroxamic acid)
[0519] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+
最终脱保护。收率(最后一步)：37mg(11％)；ESI‑MS：m/z 292.3[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
9.92min(96.5％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ4.66(s，1H)，7.30‑7.34(m，1H)，7.36‑7.43(m，
2H)，7.47‑7.56(m，3H)，7.65‑7.66(m，1H)，7.72‑7.74(m，2H)，10.51(br s，0.1H)，11.07(br s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0520] 实施例68：3‑苯基‑4，5‑二氢‑1H‑苯并[g]吲唑‑4‑羧肟胺
[0521] 根据上述方法xxix和xxx合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的异羟肟酸的+
最终脱保护。收率(最后一步)：4mg(11％)；ESI‑MS：m/z 306.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
10.59min(97.9％)；H NMR，400MHz，MeCN d3：δ3.22‑3.35(m，2H)，3.91‑3.94(m，1H)，7.25‑
7.35(m，3H)，7.41‑7.45(m，1H)，7.48‑7.52(m，2H)，7.60‑7.62(m，2H)，7.74‑7.76(m，1H).[0522] 实施例69：2‑[3‑(3‑羟基异噁唑‑5‑基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0523] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护的羟基异噁唑和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：10mg(16％)；ESI‑MS：m/z 301.3[M+ 1
+H] ；HPLC(梯度1)：rt 8.37min(＞99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.44(s，1.8H)，3.76(s，0.2H)，6.16‑6.25(m，1H)，7.43‑7.47(m，1H)，7.49‑7.53(m，2H)，7.61‑7.63(m，2H)，
10.08(br s，0.1H)，10.63(s，0.9H)，11.37(br s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0524] 实施例70：2‑[5‑苯基‑3‑[3‑(三氟甲基)‑1H‑吡唑‑4‑基]‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸
[0525] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成叔丁基保护的吡唑和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：26mg(31％)；ESI‑MS：m/z 352.2[M+H+ 1] ；HPLC(梯度1)：rt 9.84min(97.9％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.21(s，1.8H)，3.52(br s，0.2H)，7.39‑7.42(m，1H)，7.48(t，2H，3J＝7.7Hz)，7.64‑7.66(m，2H)，8.07(s，1H)，10.00(br s，0.1H)，10.55(s，0.9H)，13.77(br s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0526] 实施例71：2‑[5‑苯基‑3‑[3‑(1H‑四唑‑5‑基)苯基]‑1H‑吡唑‑4‑基]乙烷异羟肟酸[0527] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成PMB‑保护的四唑和苄基+保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：38mg(32％)；ESI‑MS：m/z 362.1[M+H] ；
1
HPLC(梯度1)：rt 9.47min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ3.40(s，1.7H)，3.66(br s，
0.3H)，7.41‑7.45(m，1H)，7.51(t，2H，3J＝7.5Hz)，7.64‑7.72(m，3H)，7.86‑7.88(m，1H)，
8.04‑8.06(m，1H)，8.37(s，1H)，10.11(br s，0.1H)，10.62(s，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0528] 实施例72：3‑[1‑[(4‑氯‑2‑氟‑3‑羟基‑苯基)甲基]‑3，5‑二苯基‑吡唑‑4‑基]丙烷异羟肟酸
[0529] 根据上述方法i和v合成化合物，通过用BBr3(1M在DCM中，3eq)处理完成苯酚的最+终脱保护。收率(最后一步)：56mg(21％)；ESI‑MS：m/z 466.2[M+H] ；HPLC(梯度1)：rt 
1
15.28min(>99％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ1.95‑1.97(m，2H)，2.72‑2.75(m，2H)，5.21(s，
2H)，6.36(t，1H，3J＝7.9Hz)，7.10(d，1H，3J＝8.6Hz)，7.36‑7.38(m，3H)，7.45(t，2H，3J＝
7.5Hz)，7.49‑7.53(m，3H)，7.68(d，2H，3J＝7.5Hz)，10.26(s，1H)，10.36(s，1H).[0530] 实施例73：(1S，2R)‑2‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代乙基]‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]环己烷羧酸
[0531] 根据上述用各自酸酐的方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成苄基保护+的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：2mg(2％)；ESI‑MS：m/z 344.2[M+H] ；HPLC(梯
1
度1)：rt9.01min(91.8％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ1.35‑1.40(m，3H)，1.60‑1.63(m，
0.8H)，1.70‑1.75(m，2.7H)，1.78‑1.79(m，0.2H)，1.85‑1.87(m，0.3H)，1.99‑2.07(m，1H)，
2.18(brs，1H)，2.67‑2.74(m，1H)，3.17‑3.30(m，2H)，7.33‑7.37(m，1H)，7.41‑7.45(m，2H)，
7.48‑7.50(m，0.2H)，7.61‑7.62(m，1.8H)，10.52(brsm，0.2H)，10.50(s，0.7H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0532] 实施例74：3‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]环己烷羧酸
[0533] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异+羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：10mg(8％)；ESI‑MS：m/z 344.3[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 8.64min(96.5％)；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ1.26‑1.49(m，3H)，1.55‑1.64(m，1H)，
1.79‑1.85(m，2H)，1.92‑2.01(m，2H)，2.32‑2.38(m，1H)，2.74‑2.78(m，1H)，3.22(s，2H)，
7.33‑7.37(m，1H)，7.43(t，2H，3J＝7.4Hz)，7.65‑7.67(m，2H)，9.99(br s，0.1H)，10.67(s，
0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0534] 实施例75：顺式‑4‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基)‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]环己烷羧酸
[0535] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异+羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：10mg(13％)；ESI‑MS：m/z 344.2[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 8.67min(26.4％)和8.80min(73.6％)双峰；H NMR，400MHz，DMSO d6：δ1.40‑1.66(m，
5H)，1.83‑1.87(m，1H)，1.95‑2.01(m，1H)，2.10‑2.13(m，1H)，2.19‑2.25(m，0.5H)，2.60‑
2.71(m，1.5H)，3.19(s，1.8H)，3.53(br s，0.2H)，7.33‑7.36(m，1H)，7.40‑7.44(m，2H)，
7.50‑7.53(m，0.2H)，7.64‑7.68(m，1.8H)，9.98(br s，0.1H)，10.59‑10.62(m，0.9H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0536] 实施例76：反式‑4‑[4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑5‑苯基‑1H‑吡唑‑3‑基]环己烷羧酸
[0537] 根据上述方法xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异+羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：8mg(12％)；ESI‑MS：m/z 344.3[M+H] ；HPLC(梯度
1
1)：rt 8.69min(>99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δ1.52‑1.73(m，4H)，2.07‑2.17(m，4H)，
2.39‑2.45(m，1H)，2.81‑2.87(m，1H)，3.42(s，1.8H)，3.79(s，0.2H)，7.45‑7.54(m，3H)，
7.58‑7.59(m，0.2H)，7.63‑7.66(m，1.8H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0538] 实施例77：顺式‑3‑[3‑(4‑羧基环己基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基]苯甲酸
[0539] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：2mg(1％)；ESI‑MS：m/z 388.4[M++ 1H]；HPLC(梯度1)：rt 8.00min(95.2％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：1.57‑1.73(m，4H)，2.04‑
2.15(m，4H)，2.38‑2.48(m，1H)，2.77‑2.83(m，1H)，3.41(s，1.7H)，3.66(s，0.3H)，7.58(t，
1H，3J＝7.6Hz)，7.88‑7.90(m，1H)，8.06‑8.08(m，1H)，8.29(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0540] 实施例78：反式‑3‑[3‑(4‑羧基环己基)‑4‑[2‑(羟基氨基)‑2‑氧代‑乙基]‑1H‑吡唑‑5‑基]苯甲酸
[0541] 根据上述方法xxvii、xxviii、xxix和xxx*合成化合物，根据方法xxxi完成甲基酯和苄基保护的异羟肟酸的最终脱保护。收率(最后一步)：2mg(1％)；ESI‑MS：m/z 388.3[M++ 1H] ；HPLC(梯度1)：rt 7.95min(>99％)；H NMR，400MHz，MeOH d4：δδ1.43‑1.73(m，4H)，
2.04‑2.16(m，4H)，2.38‑2.44(m，1H)，2.78‑2.83(m，1H)，3.41(s，1.4H)，3.67(s，0.6H)，
7.59(t，1H，3J＝7.6Hz)，7.88‑7.93(m，1H)，8.07‑8.09(m，1H)，8.29(s，1H)顺式‑反式异构体的混合物。
[0542] 分析方法
[0543] HPLC：分析型HPLC系统由以下组成：使用LUNA RP 18(5μm)的Merck‑Hitachi设备(型号LaChrom)、分析柱(长度：125mm，直径：4mm)和报告波长λ＝214nm的二极管阵列检测器(DAD)。使用流速为1mL/min的梯度分析化合物；其中洗脱液(A)是乙腈，洗脱液(B)是水，均含有0.04％(v/v)三氟乙酸，使用以下梯度之一：
[0544] 梯度1：0至5分钟‑>5％(A)，5至15分钟‑>5‑60％(A)，15至20分钟60‑95％(A)，20至30分钟95％(A)
[0545] 梯度2：0至15分钟5‑50％(A)，15至20分钟‑＞50‑95％(A)，20至23分钟95％(A)[0546] 所有报告的化合物的纯度均通过在214nm处的峰面积百分比确定。
[0547] 质谱法、NMR‑光谱法：ESI‑质谱用SCIEX API 1200光谱仪(Perkin Elmer)或表达1
CMS(Advion)获得。H NMR光谱在Agilent DD2 400‑MHz光谱仪上记录。化学位移(δ)表示为由四甲基硅烷向低磁场的百万分率(ppm)。分裂模式如下指定：s(单峰)、d(双峰)、dd(双二重峰)、t(三重峰)、m(多重峰)和br(宽信号)。
[0548] I.酶测定
[0549] 酶活性的测定基于内部淬灭的肽底物的裂解。在黑色96孔板中测量的250μl总体积的代表性测定由以下组成：100μl缓冲液、50μl终浓度为5e‑8M至2e‑10M的酶、50μ1底物(0.15至80μM，在缓冲液中，0.5％DMSO)和50μl抑制剂溶液(在缓冲液中，1％DMSO)。在125μl测定体积(黑色96孔半面积板)的情况下，所有体积均减半。ADAM的酶活性在384孔平板中测量，60μl的总检测体积由20μl抑制剂、20μl缓冲液、10μl酶和10μ1底物组成。
[0550] 表1：用于确定酶活性的肽底物和测定条件(Abz＝2‑氨基苯甲酰基；Dnp＝2，4‑二硝基苯基；Mca＝7‑甲氧基香豆素；Dap＝2，3‑二氨基丙酸；hMeprin＝人穿模肽酶；hMMP＝人基质金属蛋白酶，hADAM＝人A解整联蛋白和金属蛋白酶)
[0551]
[0552]
[0553] IC50值通过方法A或/和B确定。对于方法A中的IC50值，在存在一种标准底物浓度(10μM)条件下研究了0至5e‑5M范围内的12种抑制剂浓度对酶活性的影响。对于方法B中的IC50值，研究了在hMeprin α的底物浓度为8μM和hMeprin β的底物浓度为20μM的条件下，浓度范围从0至1e‑5M的14种抑制剂浓度对酶活性的影响。应用在测定条件下在不同底物浓度完全转换后获得的标准曲线，确定初始速度并转换成浓度单位。基于方法B，使用Morrison’(app)s方程确定Ki 值。所有测量均使用荧光酶标仪(FLUOstar OPTIMA，BMG Labtech)在30℃
下进行。在不同的日期至少一式两份地测定动力学参数。激发/发射波长为340/420nm。使用GraFit软件(7.0.3版，Erithacus Software)评估动力学数据。
[0554] 根据制造商的说明(R&D系统)，在通过APMA(对氨基苯汞乙酸盐)处理进行测量之前激活MMP。
[0555] II.穿模肽酶α和β的抑制
[0556] 使用上述一般操作合成了本发明的以下化合物。使用上述酶测定法测量的抑制hMeprinβ和α的IC50值显示在下表中。IC50是指如上所述测量的平均IC50值(独立实验的几何平均值；括号中给出几何SD因子)。
[0557] 表2：针对穿模肽酶α和β的化合物和抑制活性
[0558]
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[0572] *独立的实验的几何平均数(括号内是几何SD因子)
[0573] A使用方法A测定的IC50值
[0574] B使用方法B测定的IC50值
[0575] III.选择的其它金属蛋白酶的抑制
[0576] 表3：其它金属蛋白酶在存在10和200μM选择的抑制剂化合物下的残余酶活性。
[0577]
[0578]

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